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1、榕樹葉總黃酮超聲提取工藝條件的研究作者:陳洪濤,蔡丹昭,林立波【摘要】 目的為充分利用榕樹葉資源,研究超聲提取榕樹葉總黃酮的工藝條件。方法以總黃酮含量為考察指標,采用正交設(shè)計的方法研究超聲波輔助提取榕樹葉總黃酮的工藝條件。結(jié)果影響榕樹葉總黃酮超聲提取效果的主次因素為:乙醇濃度>溶劑量>提取次數(shù)>超聲時間,榕樹葉總黃酮最佳提取工藝為16倍量70%乙醇超聲提取3次,40min/次。結(jié)論優(yōu)化的提取方法效率高,穩(wěn)定性好,提取總黃酮含量可達2.42%?!娟P(guān)鍵詞】榕樹葉總黃酮正交設(shè)計超聲波 Abstract:Objecti
2、veTostudyanextractiontechnologyfortotalflavonefromleavesofFicusmicroearpaL.MethodsTheextractionconditionsoftotalflavonebyultrasoniceasuringthecontentofthetotalflavoneextract.ResultsThefactorsesandtimesumprocessoftheextractiontechnologyentandorthogonaldesignesextraction
3、andfortyminuteseachtime.ConclusionTheoptimizedmethodisstableandefficient,therateoftotalflavoneextractedisupto2.42%. KeyicrocarpaL.f.的葉,為廣西壯族民間常用藥,有清熱、解表、化濕、活血散瘀的功效,常用于治療流行性感冒、瘧疾、急性腸炎、跌打損傷等疾病。榕樹葉中主要含黃酮苷、香豆精等化學成分[1]。近年來對黃酮類化合物的藥理作用有較多研究,發(fā)現(xiàn)其具有抗心腦血管病、抗氧化、鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作
4、用[2,3]。研究表明可用超聲波提取榕樹葉總黃酮[4],但未見對其提取條件優(yōu)化的研究。為進一步研究榕樹葉總黃酮的功效,充分利用榕樹葉資源,本實驗以總黃酮含量為考察指標,采用正交實驗的方法對超聲波輔助提取榕樹葉總黃酮的工藝條件進行了研究?! ?儀器與材料 1.1儀器SG3300H超聲波清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司);UV-2500分光光度計(日本島津);SHBⅢ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司);ZFQ85A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海醫(yī)械專機廠)?! ?.2試劑蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所);榕樹葉(采自廣西藥用植物園);
5、95%乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等皆為分析純?! ?方法與結(jié)果 2.1榕樹葉總黃酮的提取取新鮮榕樹葉,烘干,粉碎,準確稱取榕樹葉粉5g,置于250ml錐形瓶中,按要求加入一定量的提取劑,超聲波提取一定時間,抽濾,減壓回收溶劑,定容于50ml容量瓶中,作為待測液?! ?.2標準曲線繪制精密稱取干燥蘆丁對照品20mg,置100ml容量瓶中,60%乙醇溶解,定容,得標準對照液(含無水蘆丁0.2000g/L)。分別精密移取蘆丁對照液0,1.5,2.5,3.5,4.5,5.5ml置25ml容量瓶中,分別加入50g/L亞硝酸鈉溶液0.7
6、5ml,搖勻,靜置6min;再加100g/L硝酸鋁溶液0.75ml,搖勻,靜置6min;再加40g/L氫氧化鈉溶液10ml,60%乙醇稀釋至刻度,搖勻,靜置15min,以第1瓶溶液為空白調(diào)零,取第3瓶溶液進行全波長掃描,測得510nm處有最大吸收,因此于510nm測各瓶溶液吸光度;以濃度(C)與吸光度(A)進行線性回歸,得方程為:A=9.9754C-0.0035,r=0.9989?! ?.3樣品含量測定取“2.1”項中待測液1ml于25ml容量瓶中,從分別加入50g/L亞硝酸鈉溶液起同“2.2”項下操作,510nm處測定吸光度,根據(jù)
7、回歸方程計算各樣品榕樹葉總黃酮含量。 總黃酮含量(%)=總黃酮量/干藥材量×100% 2.4單因素實驗由于乙醇作為提取溶劑具有選擇性好,滲透性強,浸出率較高的優(yōu)點,因此本實驗選擇一定濃度的乙醇溶液作為提取劑,并分別考察了溶劑濃度、溶劑用量、浸泡時間、超聲波萃取時間及萃取次數(shù)等因素對提取率的影響?! ?.4.1溶劑浸泡時間對提取率的影響各取5g樣品,分別加入60%乙醇50ml,浸泡0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5h,超聲波提取30min,抽濾,定容至50ml,按“2.3”項下方法制備樣品,測510nm吸光度值,由回歸方程
8、計算得各樣品總黃酮含量。結(jié)果見表1,圖1。從結(jié)果可見,樣品浸泡1h以上已達到浸泡完全,提取所得總黃酮含量基本一致。表1溶劑浸泡時間與總黃酮含量的關(guān)系(略) 2.4.2乙醇濃度對提取率的影響各取5g樣品,分別加入50ml不同體積分數(shù)的