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1、榕樹葉總黃酮超聲提取工藝條件的研究論文陳洪濤，蔡丹昭，林立波【摘要】目的為充分利用榕樹葉資源，研究超聲提取榕樹葉總黃酮的工藝條件。方法以總黃酮含量為考察指標，采用正交設(shè)計的方法研究超聲波輔助提取榕樹葉總黃酮的工藝條件。結(jié)果影響榕樹葉總黃酮超聲提取效果的主次因素為：乙醇濃度溶劑量提取次數(shù)超聲時間，榕樹葉總黃酮最佳提取工藝為16倍量70%乙醇超聲提取3次，40min/次。結(jié)論優(yōu)化的提取方法效率高，穩(wěn)定性好.freelleavesofFicusmicroearpaL.MethodsTheextractionconditionsoftot
2、alflavonebyultrasoniceasuringthecontentofthetotalflavoneextract.ResultsThefactorsesandtimesumprocessoftheextractiontechnologyentandorthogonaldesignesextractionandfortyminuteseachtime.ConclusionTheoptimizedmethodisstableandefficient,therateoftotalflavoneextractedisupto
3、2.42%.KeyicrocarpaL.f.的葉，為廣西壯族民間常用藥，有清熱、解表、化濕、活血散瘀的功效，常用于治療流行性感冒、瘧疾、急性腸炎、跌打損傷等疾病。榕樹葉中主要含黃酮苷、香豆精等化學(xué)成分［1］。近年來對黃酮類化合物的藥理作用有較多研究，發(fā)現(xiàn)其具有抗心腦血管病、抗氧化、鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用［2,3］。研究表明可用超聲波提取榕樹葉總黃酮［4］，但未見對其提取條件優(yōu)化的研究。為進一步研究榕樹葉總黃酮的功效，充分利用榕樹葉資源，本實驗以總黃酮含量為考察指標,采用正交實驗的方法對超聲波輔助提取榕樹葉總黃酮的工藝
4、條件進行了研究。1儀器與材料1.1儀器SG3300H超聲波清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司)；UV-2500分光光度計(日本島津)；SHBⅢ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)；ZFQ85A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海醫(yī)械專機廠)。1.2試劑蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所)；榕樹葉（采自廣西藥用植物園）；95%乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等皆為分析純。2方法與結(jié)果2.1榕樹葉總黃酮的提取取新鮮榕樹葉，烘干，粉碎，準確稱取榕樹葉粉5g，置于250ml錐形瓶中，按要求加入一定量的提取劑，超聲波提取一定時間，抽濾，減壓回收溶劑，定容
5、于50ml容量瓶中,作為待測液。2.2標準曲線繪制精密稱取干燥蘆丁對照品20mg，置100ml容量瓶中，60%乙醇溶解，定容，得標準對照液（含無水蘆丁0.2000g/L）。分別精密移取蘆丁對照液0，1.5，2.5，3.5，4.5，5.5ml置25ml容量瓶中,.freell，搖勻，靜置6min；再加100g/L硝酸鋁溶液0.75ml，搖勻，靜置6min；再加40g/L氫氧化鈉溶液10ml，60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置15min，以第1瓶溶液為空白調(diào)零，取第3瓶溶液進行全波長掃描，測得510nm處有最大吸收，因此于510nm測各
6、瓶溶液吸光度；以濃度（C）與吸光度（A）進行線性回歸，得方程為：A=9.9754C-0.0035，r=0.9989。2.3樣品含量測定取“2.1”項中待測液1ml于25ml容量瓶中，從分別加入50g/L亞硝酸鈉溶液起同“2.2”項下操作，510nm處測定吸光度，根據(jù)回歸方程計算各樣品榕樹葉總黃酮含量。總黃酮含量（%）=總黃酮量/干藥材量×100%2.4單因素實驗由于乙醇作為提取溶劑具有選擇性好,滲透性強,浸出率較高的優(yōu)點，因此本實驗選擇一定濃度的乙醇溶液作為提取劑，并分別考察了溶劑濃度、溶劑用量、浸泡時間、超聲波萃取時間及萃取次數(shù)
7、等因素對提取率的影響。2.4.1溶劑浸泡時間對提取率的影響各取5g樣品，分別加入60%乙醇50ml，浸泡0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5h，超聲波提取30min，抽濾，定容至50ml，按“2.3”項下方法制備樣品，測510nm吸光度值，由回歸方程計算得各樣品總黃酮含量。結(jié)果見表1，圖1。從結(jié)果可見，樣品浸泡1h以上已達到浸泡完全，提取所得總黃酮含量基本一致。表1溶劑浸泡時間與總黃酮含量的關(guān)系（略）2.4.2乙醇濃度對提取率的影響各取5g樣品，分別加入50ml不同體積分數(shù)的乙醇(30%，40%，50%，60%，70%，80
8、%，95%)，浸泡1h，超聲波提取30min，抽濾，定容至50ml，測510nm吸光度值，計算總黃酮含量。結(jié)果見表2及圖2。從結(jié)果可見，60%～80%體積分數(shù)的乙醇對榕樹葉總黃酮提取率均較高，其中以70%乙醇最佳。表2乙醇濃度與總黃酮含量的關(guān)系（略
