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《醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文蜈蚣提取物誘導(dǎo)宮頸癌hela細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、蜈蚣提取物誘導(dǎo)宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的研宄姓名：2014年6月25日【摘?！磕康难芯框隍继崛∥飳?duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞生長的抑制及其作用機(jī)制。方法觀察不同濃度的不同蜈蚣提取物對(duì)宮頸癌HcLa細(xì)胞的生長抑制情況：運(yùn)用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，以不同濃度的蜈蚣提取物以及陽性對(duì)照藥順鉑作用于培養(yǎng)的HeLa細(xì)胞48h,采用MTT法測(cè)定細(xì)胞代謝率，以流式細(xì)胞術(shù)觀察DNA含量和凋亡的變化情況，DNA片斷化分析和WesternBlot測(cè)定Bax,Caspase3蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果HeLa細(xì)胞用4,8，16mg/ml的乙醚、乙醇蜈蚣提取物處理48h后，細(xì)胞存活率
2、顯著降低；DNA周期改變明顯，亞G1峰與對(duì)照組有顯著性差異；DNA-Ladder典型；WesternBlot提示蜈蚣提取物作用HeLa細(xì)胞后Bax,Caspase3蛋白表達(dá)，凋亡率顯著增高。結(jié)論中藥蜈蚣乙醚、乙醇提取物在體外對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞的生長有明顯地抑制作用，機(jī)制與改變細(xì)胞DNA周期，促進(jìn)凋亡有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】蜈蚣提取物細(xì)胞周期DNA片斷化細(xì)胞凋亡Abstract：ObjectiveTostudytheinhibitoryeffectsandmechanismofcentipedeextractonproliferationofcervi
3、calcancercelllineHeLa.MethodsToobserveinhibitory-effectofdifferentconcentrationextractonthegrowthofHeLacell.BythemethodMTTtodetectcellsurvivalrate，byflowcytometrytoobservethechangeofDNAcycleandapoptosisandtoassaytheDNAfragmentationanddetecttheproteinBax,caspase3byWesternBlot
4、invitrocellculture.ResultsAfterHeLacellhadbeentreatedwithconcentrationcentipedeextractbyaetherorethanol(4,8,16mg/ml)for48h,thesurvivalratedecreased.Thenumberofeachcyclecellschangedobviously,thesub-Glpeakbetweentestandcontrolgroupwassignificantlydifferent，DNA-Ladderwastypical
5、，theproteinBax,Caspase3expressing，apoptosisrateincreasedsignificantly.ConclusionCentipedeextractcaninhibitthegrowthofHeLacellwhichisrelatedtoinhibitingDNAsynthesis，blockingcancercelldivisiongrowthandenhancingapoptosisinvitro.Keywords：Centipedeextraction；Cellcycle；DNAFragment
6、ation；Apoptosis宮頸癌(cervicalcancer)是常見的婦科惡性腫瘤。在一些地區(qū)隨著人乳頭瘤病毒(HPV)感染率的上升和社會(huì)生活的變化，其發(fā)病率有增高趨勢(shì)，且明顯趨于年輕化，同時(shí)腺癌發(fā)病比例有所上升。蜈蚣為傳統(tǒng)的動(dòng)物中藥材，其藥用始見于2000多年前《神農(nóng)木草經(jīng)》。近年來得到了更廣泛的應(yīng)用，特別是在抗腫瘤［1?3］、治療肝炎、心血管疾病、糖尿病并發(fā)癥及各種腫瘤等方而均有較好作用，引起人們對(duì)其進(jìn)行更深入的研宂［4?9］。本研究用蜈蚣的乙醚、乙醇提取物對(duì)宮頸HeLa細(xì)胞，增殖抑制和促進(jìn)凋亡的作用及其機(jī)制進(jìn)行研究，探討蜈蚣提取成分
7、的抗瘤活性。1材料與方法1.1材料1.1.1細(xì)胞與試劑HeLa細(xì)胞株購自武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保存中心并在本院免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室傳代保種。蜈蚣為湖北宜昌本地產(chǎn)，宜昌醫(yī)藥公司購進(jìn)。陽性對(duì)照順鉑(cisplatin，DDP)為齊魯制藥有限公司產(chǎn)品(批號(hào)5110231DB)；RPMI-1640培養(yǎng)基為美國Gibco產(chǎn)；小牛血清為杭州四季青產(chǎn)品；噻唑藍(lán)(MTT)為Sigma進(jìn)口分裝；DNA檢測(cè)試劑盒為美國Coulter產(chǎn)品；鼠抗人Bax,Caspase3的單克隆抗體(單抗)為美國SantaCruz公司產(chǎn)品。1.1.2儀器及材料酶標(biāo)儀，瑞士Tccan產(chǎn)，G
8、ENios型；流式細(xì)胞儀，美國BeckmanCoulter產(chǎn)，EPICSXL-4型；CO2培養(yǎng)箱，日本Sanyo產(chǎn)，MDF-75型；凝膠成像系統(tǒng)，美國
