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《4.1.1蛋白質(zhì)地分離與純化方法》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、實用標(biāo)準(zhǔn)文案課題：4.1.1蛋白質(zhì)的分離與純化方法教學(xué)目標(biāo)：1、知識與技能：掌握蛋白質(zhì)的分離與純化方法，知道從生物材料中提取芳香油2、過程與方法：掌握蛋白質(zhì)的分離與純化三種方法的比較過程3、情感態(tài)度價值觀：培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)實驗的觀點。教學(xué)重點：蛋白質(zhì)的分離與純化教學(xué)難點：蛋白質(zhì)的分離與純化，從生物材料中提取芳香油教學(xué)方法：自主、合作、探究學(xué)習(xí)。教具使用：無教學(xué)過程教師主導(dǎo)活動學(xué)生主體活動課前：布置學(xué)習(xí)目標(biāo)和預(yù)習(xí)提綱，要求學(xué)生完成預(yù)習(xí)任務(wù)，下發(fā)及收繳批改導(dǎo)學(xué)案（附導(dǎo)學(xué)案）學(xué)生進(jìn)行預(yù)習(xí)，完成導(dǎo)學(xué)案。課中：對上節(jié)課存在問題
2、進(jìn)行點撥。新授：根據(jù)學(xué)生自學(xué)情況，引導(dǎo)學(xué)生分析主要的問題。強(qiáng)調(diào)以下幾點?！舅季S點撥】1．說明用透析法、離心沉降法和電泳等方法純化蛋白質(zhì)的原理和大致過程。2．影響電泳泳動速度的主要因素有哪些?這些因素是如何影響泳動速度的?3．“血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳”實驗最關(guān)鍵的一步是什么?你能說出這一步的操作要求嗎?4．漂洗后的薄膜上可以看到幾條色帶?分別代表什么?5．植物芳香油提取的常用方法有哪些?這些方法的原理各是什么?【疑難解析】1．蛋白質(zhì)的分離純化：①根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離方法——蛋白質(zhì)的鹽析：中性鹽對蛋白質(zhì)的溶解
3、度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質(zhì)的溶解度增加，此稱鹽溶；當(dāng)鹽濃度繼續(xù)升高時，蛋白質(zhì)的溶解度不同程度下降并先后析出，這種現(xiàn)象稱鹽析，將大量鹽加到蛋白質(zhì)溶液中，高濃度的鹽離子(如硫酸銨的SO：一和NH})有很強(qiáng)的水化力，可奪取蛋白質(zhì)分子的水化層，使之“失永”，于是蛋白質(zhì)膠粒凝結(jié)并沉淀析出。由于各種蛋白質(zhì)分子顆粒大小、親水程度不同，故鹽析所需的鹽濃度也不一樣，因此調(diào)節(jié)混合蛋白質(zhì)溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質(zhì)分段沉淀。②根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小的差別的分離方法——透析：透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋
4、白質(zhì)分開。③根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進(jìn)行分離——電泳法：學(xué)生對上節(jié)存在問題進(jìn)行討論。學(xué)生自學(xué)基礎(chǔ)知識。學(xué)生根據(jù)導(dǎo)學(xué)案內(nèi)容討論并展示個人、小組成果。思考：蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法：抽提方法：純化主要是根據(jù)：常用的方法：醋酸纖維薄膜電泳的實驗的基本步驟：色帶：精彩文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案各種蛋白質(zhì)在同一pH條件下，因分子量和電荷數(shù)量不同而在電場中的遷移率不同從而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳，這是利用一種兩性電解質(zhì)作為載體，電泳時兩性電解質(zhì)形成一個由正極到負(fù)極逐漸增加的pH梯度，當(dāng)帶一定電荷的蛋白質(zhì)在其中泳動時，到達(dá)各
5、自等電點的pH位置就停止，此法可用于分析和制備各種蛋白質(zhì)。2．實驗原理：醋酸纖維薄膜電泳(CAME)是以醋酸纖維薄膜(CAM)作支持物的一種區(qū)帶電泳技術(shù)，將血清樣品點樣于醋纖膜上，在pH為8．6的緩沖液中電泳時，血清蛋白質(zhì)均帶負(fù)電荷移向正極。由于血清中各蛋白組分等電點不同而致表面凈電荷量不等，加之分子大小和形狀各異，因而電泳遷移率不同，彼此得以分離。電泳后，CAM經(jīng)染色和漂洗，可清晰呈現(xiàn)清蛋白、α1一球蛋白、α2一球蛋白、β球蛋白、γ一球蛋白5條區(qū)帶，比色即可計算出血清各蛋白組分的相對百分?jǐn)?shù)。布置學(xué)生課堂檢測，并
6、重點提示。學(xué)生完成課堂檢測課后：布置課外作業(yè)及下一節(jié)預(yù)習(xí)提綱。（見導(dǎo)學(xué)案）學(xué)生完成課外作業(yè)及下一節(jié)預(yù)習(xí)。板書設(shè)計生物成分的分離與測定技術(shù)蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法：抽提方法：純化主要是根據(jù)：常用的方法：醋酸纖維薄膜電泳的實驗的基本步驟：色帶：教學(xué)札記三、其他補充教學(xué)資料精彩文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案生物成分的分離與測定技術(shù)導(dǎo)學(xué)案一、學(xué)習(xí)目標(biāo)：二、知道蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法，蛋白質(zhì)抽提方法，掌握蛋白質(zhì)的分離與純化方法。二、知識構(gòu)成：1．蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法有：根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性，分別可選擇哪些抽
7、提方法？、、蛋白質(zhì)的純化主要是根據(jù)之間以及之間在、、、等方面存在的差異進(jìn)行的。常用的方法包括、、等。2．用電泳分離純化蛋白質(zhì)時，泳動速度主要取決于，即。此外，、等因素對泳動速度也有影響。3．血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳的實驗的基本步驟包括：、、、、、、、、、。4．浸泡醋酸纖維薄膜前，用筆做記號是在(填“光澤面”或“非光澤面”)；點樣是在(填“光澤面”或“非光澤面”)；平懸薄膜時，(填“光澤面”或“非光澤面”)朝上。5．經(jīng)電泳后，可以在薄膜上看到條色帶，它們分別是、、、、。'6．植物芳香油的提取方法有和等。三、學(xué)法和自
8、檢：本節(jié)內(nèi)容主要通過看書、分析蛋白質(zhì)的提取、分離、純化的不同方法。動手試一試：[1]鹽析法分離蛋白質(zhì)的原理是()A．破壞蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)B．破壞蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)C．破壞蛋白質(zhì)水化膜而改變?nèi)芙舛菵．使蛋白質(zhì)發(fā)生變性沉淀[2]利用透析法將蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)分離的原理是()A.利用蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性B．利用蛋白質(zhì)分子的水溶性C．利用蛋白質(zhì)分子的膠體性D．利用蛋白
