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《pi3kakt通路在硫化氫后處理保護(hù)心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的作用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、PI3K/Akt通路在硫化氫后處理保護(hù)心肌細(xì)胞缺氧-復(fù)氧損傷中的作用李鋼，楊雙強(qiáng)(400016重慶，重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胸心外科)[摘要]目的探討硫化氫后處理對(duì)原代培養(yǎng)的新生大鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制。方法以硫氫化鈉(NaHS)作為外源性硫化氫供體。原代培養(yǎng)新生大鼠的心肌細(xì)胞隨機(jī)分為5組：①正常對(duì)照組(CON組)，②缺氧-復(fù)氧組(Hypoxia-reoxygenation，HR組)，③二甲基亞砜組(Dimethylsulfoxide，DMSO組)，④硫化氫后處理組(Hydrogensulfid
2、e，H2S組)，⑤LY294002+H2S后處理組(LY+H2S組)(n=6)。分別于缺氧前和復(fù)氧2h檢測(cè)各組的心肌細(xì)胞存活率、培養(yǎng)液中CK和LDH的活性；復(fù)氧末，用流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡情況；Westernblot檢測(cè)HIF-1α、p-Akt與Akt蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果通過比較缺氧前與復(fù)氧2h差值可知，復(fù)氧2h時(shí)，H2S組心肌細(xì)胞存活率較HR組升高顯著[(27.37±2.11)vs(36.42±2.3)，P＜0.01]，CK、LDH活性以及心肌細(xì)胞凋亡率明顯降低[(98.45±24.59)vs(193
3、.55±46.98)，(144.52±20.10)vs(201.66±21.37)，(10.37±1.51)vs(17.38±2.04)，均為P＜0.01]；同時(shí)，HIF-1α和p-Akt蛋白表達(dá)水平明顯升高[(63.93±4.64)vs(41.82±6.14)，(62.59±2.11)vs(41.04±4.01)，均為P＜0.01]。然而，在H2S后處理同時(shí)加入PI3K/Akt信號(hào)通路特異性抑制劑LY294002后，與H2S組相比，心肌細(xì)胞存活率降低明顯(34.45±3.34)，CK、LDH活性以及心肌細(xì)胞凋亡率
4、升高顯著[(173.69±30.34，(197.38±18.21)，(15.17±1.56)均為P＜0.01]，并且，HIF-1α和p-Akt蛋白表達(dá)水平亦降低明顯[(51.79±4.27)，(47.42±3.15)，分別為P＜0.05和P＜0.01]。結(jié)論H2S后處理可通過PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)HIF-1α表達(dá)，從而拮抗心肌細(xì)胞的缺氧復(fù)氧損傷。[關(guān)鍵詞]硫化氫；心肌缺血再灌注損傷；缺氧誘導(dǎo)因子1α；凋亡；PI3K/AktHydrogensulfidepostconditioningprotectscardi
5、omyocytesagainsthypoxia-reoxygenationinjuryviaPI3K/AktpathwayLiGang，YangShuangqiang(DepartmentofCardiothoracicSurgery，theFirstAffiliatedHospital，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing，400016China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectandpossiblemech
6、anismofhydrogensulfidepostconditioningonprimaryculturedcardiomyocytesofneonatalratsinjuredbyhypoxia-reoxygenation.MethodsSodiumhydrosulfidewasusedasanexogenousdonorofhydrogensulfide.Primaryculturedcardiomyocytesofneonatalratswererandomlydividedintofivegroups：(
7、1)controlgroup，(2)hypoxia-reoxygenationgroup，(3)dimethylsulfoxidegroup，(4)hydrogensulfidepostconditioninggroup，(5)LY294002+hydrogensulfidepostconditioninggroup(n=6).Cardiomyocytesviabilityandcreatinekinase，lactatedehydrogenaseinthemediumofculturedcardiomyocyte
8、sweremeasuredrespectivelyineachgroupatthepointofbeforehypoxia，hypoxiaandreoxygenation2h.ApoptosisofcardiomyocytesweredetectedbyflowcytometryandtheexpressionofHIF-1α，p-AktandAktprot
