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《鹽酸氨溴索對(duì)百草枯中毒大鼠肺sp—d表達(dá)和肺損傷保護(hù)作用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、鹽酸氨澳索對(duì)百草枯中毒大鼠肺SP—D表達(dá)和肺損傷保護(hù)作用【摘要】目的觀察鹽酸氨澳索對(duì)百草枯中毒致急性肺損傷大鼠肺表面活性物質(zhì)蛋白-D（alveolarsurfaceactivesubstance-D,SP-D）及各相關(guān)指標(biāo)的影響，并評(píng)價(jià)鹽酸氨澳索對(duì)百草枯中毒治療作用。方法將120只雄性大鼠，隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字法）分為3組：生理鹽水組（NS組），百草枯中毒組（PQ組），鹽酸氨澳索治療組（AT組）；再分別將每組按時(shí)間點(diǎn)（第1、3、5、7天）隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字法）分為4組。各組以Westernblot法檢測(cè)肺組織S
2、P-D蛋白含量，以HE染色觀察大鼠肺組織形態(tài)學(xué)變化，并同時(shí)檢測(cè)各組大鼠的白細(xì)胞計(jì)數(shù)（whitebloodcount,WBC）和中性粒細(xì)胞（po1ymorphonuc1ear,PMN）百分比及動(dòng)脈血氧分壓（arterialoxygenpressure,Pa02）o結(jié)果AT組第3、5、7天WBC計(jì)數(shù)均低于PQ組，高于NS組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P[Keywords]Paraquat；Acutelunginjury/acuterespiratorydistresssyndrome；Alveolar
3、surfaceactivesubstance-D；Ambroxolhydrochloride百草枯（paraquat,PQ）為中等毒性速效季胺鹽類除草劑，在我國(guó)農(nóng)村廣泛使用，但其對(duì)人體毒性極大，且無(wú)特效解毒藥，病死率高達(dá)60.0%?81.6%[1-2]。百草枯可經(jīng)皮膚、呼吸道、消化道吸收，口服后吸收快，吸收后通過血液循環(huán)幾乎分布于所有的組織器官，但主要蓄積在肺，導(dǎo)致急性肺損傷，晚期可發(fā)生肺泡內(nèi)和肺間質(zhì)纖維化，會(huì)導(dǎo)致難以治療的呼吸衰竭，繼而發(fā)生多器官功能障礙綜合征及多器官衰竭而致患者死亡。因此，在百草枯
4、中毒的早期是否能有效的治療和逆轉(zhuǎn)急性肺損傷(Acutelunginjury,ALI),是搶救的關(guān)鍵。鹽酸氨澳索(ambroxolhydrochloride)是漠乙新的代謝產(chǎn)物，因具有祛痰并抑制支氣管炎癥作用3而成為一種新型治療呼吸系統(tǒng)疾病的新型藥物。本課題組研究發(fā)現(xiàn)給予百草枯中毒所致急性肺損傷大鼠大劑量鹽酸氨漠索后，大鼠肺損傷減輕，這可能與鹽酸氨澳索促進(jìn)SP-A分泌有關(guān)4。研究發(fā)現(xiàn)肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-D(alveolarsurfaceactivesubstance-D,SP-D)在急性肺損傷中起著
5、極為重要作用。因此，筆者擬通過腹腔注射百草枯，建立急性肺損傷大鼠模型，進(jìn)而觀察鹽酸氨漠索對(duì)百草枯中毒致急性肺損傷SP-D的影響，并評(píng)價(jià)鹽酸氨澳索對(duì)百草枯中毒治療作用，為今后臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1主要試劑與藥品20%百草枯，先正達(dá)生物科技(中國(guó))有限公司；鹽酸氨澳索注射液，德國(guó)勃林格殷格翰公司；Ghrelin一抗(山羊來源多抗)SantaCruz,美國(guó)；二抗(兔抗山羊)，北京中山金橋生物技術(shù)有限公司，中國(guó)。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與處理清潔級(jí)健康成年雄性SD大鼠120只，體質(zhì)量200?250
6、g,購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證明書編號(hào)為：1203095c將SD大鼠飼養(yǎng)于SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室，一周后將120只SD大鼠隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字法）分為三個(gè)實(shí)驗(yàn)組：（1）生理鹽水組（NS組，n=24）,每日腹腔注射6ml/kg0.9%生理鹽水；（2）百草枯中毒組（PQ組，n=48）,以30mg/kg腹腔注射0.5%百草枯稀釋液（抽取20%百草枯1ml,用0.9%生理鹽水稀釋為40ml,即為0.5%百草枯稀釋液，每毫升稀釋液含百草枯5mg）,建立大鼠百草枯中毒模型；（3）鹽酸氨漠索治療組（AT組，n=
7、48）,百草枯注射后每日腹腔注射含鹽酸氨漠索（35mg/kg）等容量生理鹽水。三組再分別按時(shí)間點(diǎn)（第1、3、5、7天）隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字法）分為4個(gè)小組,PQ組、AT組每小組均為12只，NS組每小組為6只。1.3血液標(biāo)本的采集以3%戊巴比妥鈉（40mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠，麻醉成功后，將其置于手術(shù)臺(tái)上（仰臥位），并固定。用碘伏消毒腹部皮膚，沿腹部正中線剪開腹壁，暴露腹腔，分離股動(dòng)、靜脈。無(wú)菌注射器抽取股靜脈血2ml,注入抗凝血采血管1ml并充分搖勻，同時(shí)以毛細(xì)采血管采血20u1,以檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)（wh
8、itebloodcount,WBC）和中性粒細(xì)胞(polymorphonuclear,PMN)百分比。無(wú)菌血?dú)忉槼槿」蓜?dòng)脈血lml,并迅速將針尖插入橡皮塞內(nèi)達(dá)密封狀態(tài)，充分搖勻后測(cè)定動(dòng)脈血氧分壓(arterialoxygenpressure,Pa02)o1.4肺組織標(biāo)本采集血液標(biāo)本采集的同時(shí)，取出左、右肺組織，并用4°C生理鹽水沖洗，左肺置于4%多聚甲醛固定液中固定24h后，制備石蠟切片，行HE染色觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化。右肺置于-80°C冰箱冰凍保存，通
