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《蛙心灌流模擬實驗》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、探究不同濃度酒精對離體蛙心臟收縮的影響【目的】學(xué)習(xí)Straub氏法灌流蟾賒離體心臟方法；了解心肌的生理特性；并觀察不同濃度酒精對心臟活動的影響?！驹怼孔鳛橥苄钠鸩c的靜脈竇能按一定節(jié)律自動產(chǎn)生興奮，因此，只要將離體的蛙心保持在適宜的環(huán)境屮，在一定時間內(nèi)仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮活動。心臟正常的節(jié)律性活動需要一個適宜的理化環(huán)境，離體心臟也是如此，離體心臟脫離了機體的神經(jīng)支配和全身體液因素的直接影響，可以通過改變灌流液的濃度，觀察其對心臟活動的作用?！静牧稀颗Ｍ?；RM6240BD微機牛物信號處理系統(tǒng)，張力換能器；蛙心套管(straub),常
2、用手術(shù)器械，蛙板或蠟盤，蛙心夾，滴管，培養(yǎng)皿或小燒杯，污物缸，紗布，橡皮泥，任氏液，5%、25%、75%的酒精溶液【方法】1.儀器連接和參數(shù)設(shè)置張力換能器輸出線接微機生物信號處理系統(tǒng)第1通道(亦可選擇其它通道)，微機生物信號處理系統(tǒng)參數(shù)設(shè)置：RM6240系統(tǒng)：點擊“實驗”菜單，選擇“牛理科學(xué)實驗中”的“蛙心灌流”項目o系統(tǒng)進(jìn)入該實驗信號記錄狀態(tài)。儀器參數(shù)：通道時間常數(shù)為直流，濾波頻率10Hz,靈敏度3g,采樣頻率400Hz,掃描速度ls/divo2.離體蛙心制備(1)取蟾賒一只，破壞腦和脊髓后，仰臥固定在蛙板上，從劍突下將胸部皮膚向上剪
3、開，然后剪掉胸骨，打開心包，暴露心臟，分離左、右主動脈。（2）在左主動脈下方穿1根線，靠頭端結(jié)扎作插管時牽引用，在主動脈干下方穿1根線，在動脈圓錐上方系一松結(jié)用于結(jié)扎固定蛙心插管。（3）左手持左主動脈上方的結(jié)扎線，用眼科剪在松結(jié)上方左主動脈根部剪一小斜口,右手將盛有少許任氏液的大小適宜的蛙心插管由此切口處插入動脈圓錐。當(dāng)插管頭到達(dá)動脈圓錐時，用躡子夾住動脈圓錐少許，將插管稍稍后退，并轉(zhuǎn)向心室中央方向，銀子向插管的平行方向提拉，心室收縮期時將插管插入心室（如圖1）。蛙心插管進(jìn)入心室后管內(nèi)的任氏液的液面會隨心室的舒縮而上下波動。蛙心插管進(jìn)入
4、心室后，用預(yù)先準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊，扎線套在蛙心插管的側(cè)鉤上打結(jié)并固定。剪斷主動脈左右分支。好的松結(jié)扎緊，扎線套在蛙心插管的側(cè)鉤上打結(jié)并固定。剪斷主動脈左右分支。蛙心插管示意圖（4）輕輕提起蛙心插管以抬高心臟,用一線在靜脈竇與腔靜脈交界處作一結(jié)扎，結(jié)扎線應(yīng)盡量下壓，以免傷及靜脈竇，在結(jié)扎線外側(cè)剪斷所有組織，將蛙心游離出來。（5）用新鮮任氏液反復(fù)換洗蛙心插管內(nèi)含血的任氏液，直至蛙心插管內(nèi)無血液殘留為止。此時離體蛙心已制備成功，可供實驗。（6）將蛙心插管固定在鐵支架上，用蛙心夾在心室舒張期夾住心尖，并將蛙心夾的線頭通過滑輪連至張力換能器的應(yīng)變梁
5、上，調(diào)節(jié)此線張力至lg,插管內(nèi)加灌流約1-1.5ml,并在插管上標(biāo)記灌流的高度，在此后的實驗過程中，灌流液恒定于該高度?！居^察項目】1.描記正常的蛙心搏動曲線，注意觀察心跳頻率、心室的收縮和舒張程度。2.把蛙心插管內(nèi)的任氏液全部更換為5%的酒精溶液，做好標(biāo)記，觀察心博變化。待曲線出現(xiàn)明顯變化時，立即吸取套管中的灌流液，同時做好標(biāo)記；并用新鮮任氏液清洗2-3次，待心搏恢復(fù)正常。注意：換液時切勿碰套管，以免影響描記曲線基線,同時保持液面的高度一致。3.向套管內(nèi)加入25%的酒精溶液，做好標(biāo)記，觀察心博曲線的頻率與振幅變化。當(dāng)曲線明顯變化時，立
6、即吸取套管中的灌流液，并做好標(biāo)記，迅速用壬氏液清洗2-3次，待心博恢復(fù)正常。4.同法向套管滴加75%的酒精溶液，觀察并記錄心搏變化?！咀⒁馐马棥?1)以蛙心夾連接心臟和換能器，連線張力改變會影響蛙心收縮幅度。(2)注意在實驗過程屮，保持插管內(nèi)液面的前后一致，避免前負(fù)荷變化而影響結(jié)果?！緦嶒烆A(yù)期結(jié)果】隨著酒精濃度的增加，心臟收縮率逐漸降低【討論】為什么酒精會影響心臟的收縮異常？【參考文獻(xiàn)】(1)酒精濫用者的左心室收縮與舒張功能減低同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院(2)不同濃度酒精對離體大鼠心臟收縮的影響江蘇大學(xué)(3)酒精對離體蟾賒和人鼠心臟收縮的影響
7、-《河北醫(yī)科人學(xué)學(xué)報》
