幾種草莓優(yōu)良品種組培快繁與脫毒苗生產(chǎn)技術(shù)探究

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1、幾種草莓優(yōu)良品種組培快繁與脫毒苗生產(chǎn)技術(shù)探究摘要：以7個草莓優(yōu)良栽培品種的匍匐莖為起始材料，試驗出以MS為基本培養(yǎng)基附加BA0.5mg/L誘導(dǎo)草莓匍匐莖芽和莖尖植株再生、增殖、生根的培養(yǎng)基，確立了草莓組培快繁技術(shù)方法，同時探討低成本下草莓試管苗的快繁技術(shù)，不僅能快速培養(yǎng)出大量脫毒苗，而且能取得較好的社會和經(jīng)濟效益。關(guān)鍵詞：草莓；組培快繁；莖尖脫毒；生產(chǎn)應(yīng)用草莓(FragariaananassaD.)是薔薇科草莓屬多年生常綠草本植物，其果品富含蛋白質(zhì)、有機酸、維生素以及磷、鈣、鐵、鋅等礦物質(zhì)，是營養(yǎng)豐富、經(jīng)濟價值很高的上等果品。除了鮮食，草莓也是加工果醬、果酒等的重要原料，在世界

2、漿果類水果生產(chǎn)中，其栽培面積和產(chǎn)量僅次于葡萄［1］。我國草莓生產(chǎn)發(fā)展迅速，近幾年來栽培面積迅速擴大，已經(jīng)成為栽培草莓最多的國家之一。草莓的種苗生產(chǎn)傳統(tǒng)上采用匍匐莖繁殖和分株繁殖，而長期使用無性繁殖方法會使草莓品種退化，病毒感染嚴(yán)重［2］。利用草莓莖尖培養(yǎng)快繁技術(shù)可部分或全部脫除病毒，保持草莓品種的優(yōu)良性狀，提高產(chǎn)量；繁殖快，對新品種的推廣有利，快速繁殖不受季節(jié)影響，一年四季均可進行。在人工控制的條件下，可工廠化育苗，根據(jù)生產(chǎn)需要為生產(chǎn)提供種苗。近些年，我們進行了大量的研究，以期能快速繁殖并培育出優(yōu)良草莓品種，同時探討低成本下草莓試管苗的快繁技術(shù)。1材料與方法1.1材料選取的材料

3、C1-C7全部為當(dāng)前草莓優(yōu)良栽培品種，市場應(yīng)用推廣價值高，由新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團阿拉爾現(xiàn)代農(nóng)業(yè)示范區(qū)核心區(qū)十團苗木基地提供。1.2方法1.2.1培養(yǎng)基的配制。用于草莓匍匐莖芽和莖尖培養(yǎng)誘導(dǎo)芽分化的基本培養(yǎng)基為MS附加6-BAO.5mg/L,蔗糖30g/L,瓊脂粉5.Og/L,pH值調(diào)至5.8。在草莓?dāng)U繁階段，采用MS培養(yǎng)基附加6-BA0.5mg/L.NAA0.Olmg/L,所用培養(yǎng)基中以3%食用白砂糖代替蔗糖，加瓊脂粉0.5%,以自來水代替蒸館水，pH值在高壓滅菌前調(diào)至5.8。1.2.2材料的消毒與處理。選取健壯草莓母株上生長充實而小葉尚未展開的匍匐莖頂端約3?4cm長的芽，用自來

4、水沖洗2?3h后，在超凈臺上進行滅菌處理。先用小躡子將匍匐莖的外部大葉摘除，再用75%酒精處理30s,然后置于0.2%的升汞中消毒3?6m,再用無菌水沖洗3?4遍。1.2.3誘導(dǎo)分化與增殖。（1）以草莓匍匐莖芽為試材，以附加BA0.5mg/L的MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)和增殖草莓小苗，每瓶接種3個材料。（2）在雙筒解剖鏡下由外向內(nèi)逐層剝?nèi)ビ兹~,直至半圓球的頂端分生組織充分暴露出來,切取0.5mm左右大小莖尖接種于附加BAO.5mg/L的MS培養(yǎng)基上誘導(dǎo)培養(yǎng),每瓶接種1個材料。接種后移至培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為光照1500?2500lx,14h/d,溫度（25±1）°Co把誘導(dǎo)分化出的草莓小

5、苗轉(zhuǎn)接入繼代增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)基成分同誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)接時把芽團分細小些，約5株/瓶，30d左右繼代1次，記錄組培苗的增殖情況。1.2.4擴大繁殖。將叢生苗分塊即每5?7株切成一塊,轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基。在轉(zhuǎn)苗過程中，去掉原生葉片有利于新苗分化，在擴大繁殖中隨時清除愈傷組織，有利于新苗增殖和生長。1.2.5生根與移栽。將生長健壯，苗高2?3cm的試管苗移到生根培養(yǎng)基（1/2MS+IBAO.lmg/L）上生根，30d后移栽。2結(jié)果與分析2.1不同消毒時間，不同接種部位對草莓出芽率誘導(dǎo)分化的影響由表1可知，所選取的7種草莓優(yōu)良品種匍匐莖不同部位經(jīng)清洗消毒后接種均能獲得無菌試管苗，結(jié)果表明

6、，匍匐莖出芽率上段〉中段〉下段，這與頂端分生組織生長旺盛有關(guān)。"Cl,C2,C3,C4,C5”5個品種通過切取莖尖技術(shù)培育草莓無菌試管苗均獲得無菌試管苗，不同品種的芽誘導(dǎo)率不同，莖尖出芽率C3>C5>C2〉C4〉C1,C3最高70%,C1最低30%o在同一培養(yǎng)基上，15d后觀察以0.2%升汞處理4m較為適宜，成活率較高。2.2匍匐莖芽和莖尖誘導(dǎo)分化培養(yǎng)觀察將匍匐莖芽接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，2?3d芽變綠，開始生長，7?10d后伸長至lcm左右，將芽切下轉(zhuǎn)移至增殖培養(yǎng)基（同誘導(dǎo)培養(yǎng)基）培養(yǎng)，20d后即可看到葉原基形成可見的小葉，30?40d后可長成具有數(shù)片真葉的幼苗。將莖尖接種到誘導(dǎo)

7、分化培養(yǎng)基上，14d后顏色逐漸變綠，基部逐漸膨大。30d后，即可看到明顯伸長的小莖，葉原基也形成可見的小葉，50d后可長成具有數(shù)片真葉的幼苗。2.3增殖培養(yǎng)觀察將誘導(dǎo)分化出的草莓小芽接種于增殖培養(yǎng)基上（同誘導(dǎo)培養(yǎng)基），小苗株基部的腋芽2周內(nèi)就能萌發(fā)，4?5周內(nèi)就可增殖形成叢生芽叢，芽叢直徑可達4?5cm,有15?25個芽，每芽有2?3片葉。每隔4?5周將芽叢分割，轉(zhuǎn)接到擴繁培養(yǎng)基上繼代。2.4生根培養(yǎng)草莓比較容易在培養(yǎng)基上生根，1/2MS就可達到最好的生根效果。以1/2MS+IBA0.lmg