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1、失血性休克高張鹽復(fù)蘇對(duì)急性肺損傷及腸淋巴液致炎作用影響［摘要］目的觀察并比較高張鹽和乳酸林格液復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠急性肺損傷和腸淋巴液的影響。方法將雄性SD大鼠40只分成4組(n=10),分別為假休克組(組I)、休克組(組II)、乳酸林格氏液組(組III)和高張鹽溶液組(組IV)。復(fù)蘇后比較肺干濕重比和肺組織學(xué)變化，收集并測(cè)定腸淋巴液腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白介素-IB(IL-10)、白介素-6(IL-6)含量，觀察腸淋巴液對(duì)肺巨噬細(xì)胞的刺激作用。結(jié)果組II和組III肺干濕重比和組織中白細(xì)胞浸潤(rùn)程度顯著高于組I和組IV,
2、組II和組III大鼠在休克期及復(fù)蘇后的腸淋巴液TNF-a、IL-IB.IL-6含量及對(duì)肺巨噬細(xì)胞刺激作用均顯著高于組I、組IV。結(jié)論高張鹽溶液復(fù)蘇可降低失血性休克大鼠腸淋巴液促炎作用，減輕失血性休克后的急性肺損傷。［關(guān)鍵詞］失血性休克；高張鹽；復(fù)蘇；細(xì)胞因子；急性肺損傷［中圖分類(lèi)號(hào)］R605.971［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A［文章編號(hào)］1674-4721(2012)12(a)-0009-03失血性休克(HS)患者救治后并發(fā)的多臟器功能障礙(MODS)是失血性休克患者后期的主要死亡原因［1］。急性肺損傷(ALI)是失血性休克后首發(fā)的臟器功能
3、障礙。休克后機(jī)體腸淋巴液內(nèi)腫瘤壞死因子-a(tumornecrosisfactor-a,TNF-a)、白介素TB(interlukinIB,ILTB)、白介素-6(interlukin-6,IL-6)等促炎因子升高與ALI發(fā)生有密切關(guān)系［2］。近年來(lái)用7.5%高張鹽溶液(HTS)治療失血性休克具有較好的減輕ALI的作用，體外實(shí)驗(yàn)提示HTS還具有免疫調(diào)節(jié)作用［3］。本文觀察乳酸林格氏液(RL)和HTS復(fù)蘇對(duì)失血性休克后ALI和腸淋巴液的影響。1材料與方法1.1材料健康雄性SD大鼠40只，體重(300±50)go1.2方法1.2.1
4、造模方法2.5%戊巴比妥鈉50mg/kg腹腔注射麻醉后，取腹正中切口，分離腸系膜淋巴管并置入腸淋巴引流管，作右頸動(dòng)脈和左頸靜脈插管，監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓(MAP)o上述操作完成并穩(wěn)定60min后，經(jīng)右頸總動(dòng)脈放血，在10min內(nèi)使平均動(dòng)脈壓降低至40mmHg,維持1h建立大鼠失血性休克模型，取出的血液肝素化保存［4］。大鼠分為4組，每組10只，組I為假休克組，不做放血處理;組II為單純休克組，休克后不予復(fù)蘇；組III為乳酸林格氏液復(fù)蘇組，大鼠HS后30min內(nèi)輸入2倍失血量RL和1/2的放血量；組IV為HTS復(fù)蘇組，大鼠HS后30mi
5、n內(nèi)輸入7.5%高滲氯化鈉4mL/kg和1/2的放血量。1.2.2肺組織標(biāo)本和肺巨噬細(xì)胞提取各組大鼠分別收集休克前、休克時(shí)、復(fù)蘇后2h腸淋巴液。復(fù)蘇后120min靜注戊巴比妥處死大鼠，測(cè)定肺干濕重比并做肺組織病理學(xué)檢查。肺間質(zhì)白細(xì)胞浸潤(rùn)分級(jí)評(píng)分如下：0,無(wú)浸潤(rùn)；1,輕度；2,中度；3,重度［5］。右肺葉做肺灌洗，收集肺巨噬細(xì)胞以RPMI1640營(yíng)養(yǎng)液保存oWright-Giemsa染色細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)定巨噬細(xì)胞比例90%以上，苔盼藍(lán)拒染試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞活力90%以上⑹。1.2.3腸淋巴液與肺巨噬細(xì)胞孵育前后TNF-a、IL-1B、IL-6
6、含量測(cè)定采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測(cè)定上述指標(biāo)。取復(fù)蘇后2h收集的腸淋巴液于JC低溫離心機(jī)內(nèi)10000g離心20min,±清按說(shuō)明書(shū)置入酶標(biāo)板測(cè)定各數(shù)據(jù)。腸淋巴液用0.9%氯化鈉溶液稀釋至原液5%,取100uL與細(xì)胞濃度為lX106/mL的巨噬細(xì)胞RPMI1640培養(yǎng)液10011L混勻，置于37°C.5%CO2培養(yǎng)箱孵育4h。取出培養(yǎng)板于QC低溫離心機(jī)內(nèi)10000g離心20min,按上法測(cè)定孵育后淋巴液內(nèi)TNF-a、IL-1B、IL-6含量⑺。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所得數(shù)據(jù)均以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行
7、處理，多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1肺組織損傷比較組I、II、III、IV的肺干濕重比分別為4.2±1.2、6.8±1.8、&0±1.8、5.1±1.2,組II和組III大鼠肺干濕重比顯著高于組I和組IV(P<0.05)o肺間質(zhì)白細(xì)胞浸潤(rùn)程度評(píng)分組II和組III分別為2.40+0.70.2.90±0.32,顯著高于組I(0.50±0.53)和組IV(1.10±0.74)(P<0.01)。2.2腸淋巴液在復(fù)蘇前后的TNF-a、兒-1B、IL-6變化
8、組I大鼠腸淋巴液中TNF-a、IL-1B、IL-6含量在實(shí)驗(yàn)期間均無(wú)顯著變化，組II、IILIV大鼠休克后TNF-a、IL-IB、IL-6均顯著升高。組III大鼠復(fù)蘇2h后IL-1B、1-6.TNF-a均顯著升高；組IV大鼠復(fù)蘇后TNF-a、IL-1B、IL-6
