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《體外培養(yǎng)樹突狀細胞的實驗研究論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要論文題目：體外外周血培養(yǎng)樹突狀細胞的實驗研究專業(yè)：腫瘤學研究生：郭輝指導教師：趙勇剛教授摘要目的提取神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者外周血分離出單核細胞，進行體外培養(yǎng)、誘導產(chǎn)生樹突狀細胞，并探討細胞因子對樹突狀細胞誘導、分化成熟的影響，為最終臨床應用樹突狀細胞免疫治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤打下基礎(chǔ)。方法臨床收集確診為神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者靜脈血共20份，每份20ml，經(jīng)淋巴細胞分離液梯度分離出單個核細胞（PBMC），貼壁法獲得單核細胞后，每個樣本均分為兩份，共兩組，分別加入GM-CSF+IL-4和GM-CSF+IL-4+Flt3-L進行誘導，在相同條件下進行體外培
2、養(yǎng)，隔日半量換液，補充細胞因子，共7天，用倒置顯微鏡觀察其形態(tài)，并進行流式細胞儀檢測其表面標志，對培養(yǎng)結(jié)果在獲得率、純度和細胞表型三方面進行對比。結(jié)果應用GM-CSF+IL-4和GM-CSF+IL-4+Flt3-L兩種培養(yǎng)方法均可誘導產(chǎn)生樹突狀細胞,而且在樹突狀細胞的獲得率和純度方面無統(tǒng)計學差異，經(jīng)流式細胞儀檢測，應用GM-CSF+IL-4組所獲得的樹突狀細胞符合不成熟樹突狀細胞的表型，而GM-CSF+IL-4+Flt3-L組所誘導的樹突狀細胞表達更高比例的成熟標志CD83，趨向于成熟的樹突狀細胞表型。結(jié)論從膠質(zhì)瘤患者外周血中分離出
3、的單核細胞，經(jīng)GM-CSF和IL-4刺激后，可以誘導、擴增出大量的樹突狀細胞，該細胞具有典型的樹突狀細胞的形態(tài)；由GM-CSF和IL-4誘導產(chǎn)生不成熟的樹突狀細胞，存在Flt3-L時可誘導生成成熟的樹突狀細胞。關(guān)鍵詞：樹突狀細胞；Fms樣酪氨酸激酶3配體（Flt3-L）；體外培養(yǎng)；外周血；膠質(zhì)瘤論文類型：應用基礎(chǔ)研究I摘要Subject:TheStudyofInductionOfDendriticCellsFromHumanPeripheralBloodMonocytesInVitroSpecialty:OncologyName:G
4、UOhuiSupervisor:ProfessorZHAOyong-gangABSTRACTObjectiveWeseparatethemonocytes(MNC)fromtheperipheralbloodofpatientswithmalignantglioma.Thenthemonocytes(MNC)areaddeddifferentcombinedcytokinestoinducethegenerationofdendriticCells(DCs)invitro.Theaimofthestudyistoinvestigat
5、etheeffectofcytokinesonthegenerationofDCs.ItwillprovidetheexperimentalfoundationforclinicalgliomaimmunotherapyofDCs.MethodsWegatheredtheperipheralblood20mlfrom20patientswithmalignantglioma,theperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)wereseparatedfromthebloodbycentrifugalin
6、densitygradient.Theperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)wereculturedinbottles,thentheadhesioncellscollectedfromtheperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)fromeachpatientwhichweredividedintotwoparts,thendividedintotwogroups.OnegroupwasaddedcombinedcytokinesGM-CSF+IL-4,theo
7、therwasaddedcombinedcytokinesGM-CSF+IL-4+Flt3-L.Afterculturedforsevendaysinthesamecondition,collectadherentcells,observetheirmorphologybyinvertedmicroscopeanddetectimmunefactorswithflowcytometry.Wecomparedthetwogroupsintermsofpick-uprate、purityandphenotypeofcells.Resul
8、tsThedendriticCells(DCs)canbeinducedfromthemonocytes(MNC)culturedwithcombinedcytokineseitherGM-CSF+IL-4orGM-CSF+IL-4+
