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《香菇多糖提取、純化、結(jié)構(gòu)表征及生物活性的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要本文以香菇(Lentinusedodes)為原料，系統(tǒng)研究了香菇多糖(1entinan)的提取、分離、純化、純度鑒定、理化性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)，并對不同分子量香菇多糖的體外抗乙型肝炎病毒活性進行了測定?，F(xiàn)有制備高純香菇多糖的技術(shù)比較復(fù)雜，產(chǎn)品價格非常高，針對香菇多糖的應(yīng)用前景和開發(fā)現(xiàn)狀，本論文將開發(fā)從香菇中分離純化高純香菇多糖的工業(yè)技術(shù)作為研究重點，旨在得到易于工業(yè)化的流程短、工藝簡單、經(jīng)濟、高回收率和高純香菇多糖的工藝路線。主要研究內(nèi)容與結(jié)論如下：1．對香菇多糖的提取方法進行了系統(tǒng)的研究，分別考察了熱水浸提、超聲波輔助熱水浸提、微波提取、酶法
2、輔助熱水浸提四種提取方法，優(yōu)化了提取工藝。研究證明：熱水浸提得到的香菇多糖提取得率為4．53％，產(chǎn)品純度23．2％；超聲波輔助熱水浸提方法多糖提取得率為4．48％，產(chǎn)品純度21．5％；微波提取多糖提取得率4．44％，多糖純度24．2％；酶法輔助提取多糖提取得率為6．63％，多糖純度32．1％。和熱水浸提法相比，超聲波輔助熱水浸提法提取溫度低，提取時間短，微波提取能大大縮短提取時間，酶法輔助熱水提取能顯著提高多糖提取率，所得粗產(chǎn)品純度高。酶法提取是一種較理想的多糖提取方法。2．采用殼聚糖對多糖提取液進行沉降，除去溶液中懸浮顆粒、膠狀物質(zhì)，部分色
3、素和蛋白質(zhì)雜質(zhì)，提高溶液的澄清度，降低溶液的粘度。實驗優(yōu)化了殼聚糖沉降提取液的工藝條件。多糖溶液中色素降低26％，蛋白質(zhì)濃度降低35％，溶液粘度降低15％。3．采用超濾方法對香菇多糖提取液進行分離與分級，選用兩種不同截留分子量的陶瓷膜(50kDa，300kDa)超濾分離，得到三種不同分子量的香菇多糖Lel、Le2和Le3，Lel、Le2和Le3的純度分別為70．5％，52．3％，26．3％。Lel為基本不含蛋白質(zhì)的低分子量多糖，Le2為含少量蛋白質(zhì)的中等分子量多糖，Le3為含大量蛋白質(zhì)的大分子量多糖。超濾分離最佳操作壓力為O．15MPa，溫度
4、35℃，pH7．0。對膜污染機理和膜清洗方法進行了探討，通過凝膠極化模型對超濾分離香菇多糖的膜阻力進行分析，阻力模型很好的擬合凝膠極化模型。4．首次采用八種離子交換樹脂和大孔吸附樹脂對香菇多糖溶液脫色，發(fā)現(xiàn)大孔吸附樹脂DA201．C具有最好的脫色效果，同時對蛋白質(zhì)也有一定的分離效果，對DA201．C大孔樹脂分離香菇多糖中的色素工藝進行了優(yōu)化，多糖溶液的脫色率為87．7％，蛋白質(zhì)的去除率為42．O％，多糖的損失率為15．O％。經(jīng)樹脂脫色后，三種多糖Lel、Le2和Le3的純度分別為85．3％、72．9％、49．6％。5．首次采用陰離子交換樹脂分
5、離香菇多糖中的蛋白質(zhì)，優(yōu)化了717型陰離子交換樹脂除蛋白的工藝條件，酸度足影響蛋白質(zhì)吸附效果的最關(guān)鍵因素，最佳吸附酸度為8．8—9．2。樹脂叮用O．5mol／L的HCI溶液再生，經(jīng)過再生后，樹脂的吸附率可恢復(fù)90％。分離蛋白質(zhì)雜質(zhì)之前，多糖Lel、Le2和Le3的蛋白質(zhì)含量分別為：5。4％，15．3％和38．7％，分離蛋白后，蛋白質(zhì)含量分別降為O．5％，1．6％和6．4％，多糖純度分別為95．1％、89．5％、86．4％。6．對蛋白質(zhì)吸附動力學(xué)研究表明，717型陰離子交換樹脂分離多糖提取液中的蛋白質(zhì)的吸附過程是單分子層的離子交換過程，是放熱的
6、吸附過程，低溫有利于吸附。膜擴散速率是離子交換樹脂吸附過程的控速步驟，蛋白質(zhì)的吸附等溫線可用Langmuir方程來模擬。7．研究了Lel、Le2和Le3的理化性質(zhì)。經(jīng)SephadexG．200柱層析、瓊脂糖凝膠電泳分析表明：Lel、Le2和Le3均為單一多糖，三種多糖純度分別為99．2％，97．8％和96．5％。單糖組成分析表明：Lel、Le2和Le3均由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖五種單糖組成，其中葡萄糖為主要組分，Lel、Le2和Le3中阿拉伯糖，木糖，甘露糖，半乳糖，葡萄糖的摩爾比分別為O．15：0．52：1．00：1．20：
7、7．20：O．21：0．68：1．00：1．02：11．56；0．29：0．42：1．00：0．85：16．20。采用凝膠柱層析測定多糖分子量表明，Lel、Le2和Le3的平均分子量分別為4．02x104、2．16x103、8．93x10。。紅外光譜和核磁共振光譜表明：Lel主要是含a糖甙鍵的葡聚糖，Le3主要是含p糖甙鍵的葡聚糖，而Le2是既含有a糖甙鍵，又含p糖甙鍵的葡聚糖。8．測定了三種香菇多糖Lel、Le2和Le3的體外抗乙型肝炎病毒活性，結(jié)果表明三種香菇多糖都有一定的抗病毒活性，其中Le3活性最強，Le2活性次之。表明香菇多糖的生物
8、活性與多糖的分子量大小有一定關(guān)系。關(guān)鍵詞：香菇多糖，提取，純化，脫色，脫蛋白，超濾，活性ⅡAbstractInthisdissertation，researchof
