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1、目錄中文摘要?OOAOO?????0OOIDO?????0OO???l英文摘要???????????????????????????4研究論文Genistein對裸卵巢癌移植瘤的影響????????9前言??????????????????????????9一月Ⅱ舌“?一”?”一””““”一”“一””一““一””一“”一””一””一””一”材料與方法???????????60ODOOIOBO0????lO結(jié)果?????······?????????????????······17附圖·?·························?·······??·········
2、?·??···?·····20附表0O0???????????OOQO0OQO00????26討論DODOO·?··········““”“·““““?”O(jiān)00”“”““··”””00BOO···30結(jié)論gOO”·”””””“““””一””“?“O00”．．””一“一”””·010900”·34參考文獻(xiàn)????????????????????????34綜述genistein對腫瘤microRNA作用的研究進(jìn)展?????????38致謝?···························OOB······?·····················?··········
3、·····49個(gè)人簡歷?OOQOO????O00?O091????????????50中文摘要Genistein對裸鼠卵巢癌移植瘤的影響摘要目的：在婦科惡性腫瘤中死亡率最高的當(dāng)屬卵巢癌。因其發(fā)生發(fā)展具有隱匿性的特點(diǎn)，約70％的患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬于晚期(FIGO分期IIB．IV期)，其五年生存率不到40％0]。腫瘤減滅術(shù)聯(lián)合術(shù)后化療成為卵巢癌治療的標(biāo)準(zhǔn)方案。靜脈化療復(fù)發(fā)率較高，腹腔化療可以延長無瘤生存期并延長總生存率，但其毒副作用較大，其應(yīng)用受到限制，因此，尋找低毒有效抗癌制劑成為當(dāng)前卵巢癌治療研究的重要課題。大豆中天然存在的黃酮類化合物主要有3種，即大豆甙類(daidzin)
4、、染料木甙類(genistin)、黃豆甙類(glycitin)，其中又以染料木黃酮(genistein)含量最多，活性最強(qiáng)，其化學(xué)名為4，5，7．三羥基異黃酮。研究表明genistein具有多種生物學(xué)活性，如雌激素樣作用、抗雌激素樣作用、抗氧化和調(diào)節(jié)細(xì)胞周期等，近年來因其顯著的防癌抗癌效果而倍受關(guān)注。然而genistein水溶性差，口服吸收效率較低。在絕大多數(shù)的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中通常利用二甲基亞砜(DMSO)進(jìn)行溶解，但是DMSO對細(xì)胞的毒副作用不可忽視，不僅影響實(shí)驗(yàn)效果，而且也限制藥物的臨床應(yīng)用。羥丙基．B．環(huán)糊精是一種無毒、刺激性小、可以供靜脈注射的輔料。經(jīng)羥丙基．D．環(huán)糊精
5、包合后的黃酮類化合物，增強(qiáng)了藥物的生物利用度，改善了溶解度及穩(wěn)定性。近年來研究發(fā)現(xiàn)microRNAs是腫瘤形成過程的重要參與者，人類多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展與microRNAs的異常表達(dá)有關(guān)，扮演著癌基因與抑癌基因的角色。本課題以人卵巢上皮性癌裸鼠皮下移植瘤為研究對象，利用羥丙基．D．環(huán)糊精包合的genistein，探討Genistein對人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用及其對PTEN蛋白和microR-21的影響，為Genistein在上皮性卵巢癌的I臨床治療及預(yù)防中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法：l細(xì)胞培養(yǎng)：人卵巢癌細(xì)胞SKOV3細(xì)胞，培養(yǎng)在含10％胎牛血清的RPMI。164
6、0培養(yǎng)基中，培養(yǎng)箱為溫度為37℃，含50％C02。2裸鼠移植瘤模型的建立及實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)動物為BALB／C／nu／nu無中文摘要胸腺裸小鼠，5～6周齡，18．229，雌性，在SPF級環(huán)境下飼養(yǎng)。常規(guī)無菌培養(yǎng)SKOV3細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞長至對數(shù)期時(shí)，用0．25％胰酶對細(xì)胞進(jìn)行消化，離心，配制成2．5×107個(gè)／ml單細(xì)胞懸液，在無菌條件下接種于裸鼠背部近前肢處的皮下，每只裸鼠接種0．2ml(即5×106個(gè)細(xì)胞)單細(xì)胞懸液。觀察移植瘤生長情況，種瘤第7天選出移植瘤接種成功，并且移植瘤直徑在4～7mm的的裸鼠進(jìn)行試驗(yàn)，將選出的裸鼠隨機(jī)分成六組：對照組(輔料組)順鉑組，Genistein
7、包合物低劑量組，順鉑+Genistein包合物低劑量組，Genistein包合物中劑量組，Genistein包合物高劑量組，每組6只。3實(shí)驗(yàn)藥物的制備：Genistein包合物、輔料、順鉑均由O．9％氯化鈉注射液配制成所需濃度，即刻使用。4給藥方法：Genistein包合物含genistein的濃度為6％，用藥中低、中、高劑量分別按含genistein量50mg／kg、150mg／kg、450mg／kg腹腔注射，每天一次，連續(xù)3周；對照組(輔料組)按Genistein包合物低劑量組所含羥丙基13．環(huán)糊精量進(jìn)行腹腔注
