il-17d基因?qū)θ寺殉舶┞闶笠浦擦錾L的影響

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1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果,其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué),試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科犬學(xué)所有。否則,承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。-’≯...’■’。/‘i.,、..--{\’,研究生簽名黼師簽章:≮氣:缸二級學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)毒≤:二一:≥~.譬.:蔓矽l咿。通且期?!酆颖贬t(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲

2、明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責(zé)自負。研究生簽名:弓越且鈉導(dǎo)師簽章-亍誘≯l忙弓月衫日目錄中文摘要???????????????????????????1英文摘要???????????????????????????3研究論文IL-17D對人卵巢癌裸鼠移植瘤的生長的影響前言???????????????????????????6日U舌??????????????????????

3、?????材料與方法????????????????????????6結(jié)果?????????:?????????????????.13附圖??????????????????????????..15附表??????????????????????????..21td‘‘淪??????????????????????????..22結(jié)論?????????????????????..:????.,25參考文獻????????????????????????..26綜述細胞因子與腫瘤免疫逃逸的研究現(xiàn)狀????????????30致

4、謝????????????????????????????..42個人簡歷??????????????????????????..43中文摘要IL一17D基因?qū)θ寺殉舶┞闶笠浦擦錾L的影響摘要目的:將轉(zhuǎn)染IL-17D基因的人上皮性卵巢癌細胞株種植于裸鼠皮下,觀測IL一17D對裸鼠皮下移植瘤生長的影響;通過檢測裸鼠體內(nèi)MHCI類鏈相關(guān)蛋白A(MHCclassI-relatedproteinA,MICA)分子表達的變化,初步探討IL一17D促痛作』1j的相關(guān)因素,為研究上皮性卵巢癌的免疫逃逸、耐藥及診療提供新的線索。方法:l體外

5、培養(yǎng)轉(zhuǎn)染IL.17D的人上皮性卵巢癌細胞SKOV3細胞(SKOV3/17D)、OVCAR3細胞(OVCAR3/17D),各自對應(yīng)的空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的SKOV3/neo細胞、OVCAR3/neo細胞(Fig.1),37。C,5%C02的恒溫培養(yǎng)箱中連續(xù)傳代培養(yǎng)并凍存。2建立32只人上皮性卵巢癌細胞株裸鼠皮下移植瘤膜型,隨機分成4紺:(1)SKOV3/17D組:將轉(zhuǎn)染IL.17D的SKOV3細胞株種植于裸鼠皮l、.,(2)SKOV3/neo組:將轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的SKOV3細胞株等量種植于裸鼠皮I、.,(3)OVCAR3/17D組:將轉(zhuǎn)染I

6、L.17D的OVCAR3細胞株種植于裸鼠皮下,(4)OVCAR3/neo組:將轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的OVCAR3細胞株等量種植于裸鼠皮下。3觀察裸鼠的成瘤率、腫瘤生長情況,用游標卡尺定期測量裸鼠皮下移植瘤的大小,繪制腫瘤生長曲線。4采用qRT-PCR法檢測各組裸鼠皮下移植瘤組織中IL.17D在RNA水土I£的表達量;ELISA法檢測各組荷瘤裸鼠血清中MICA的可溶性形式(solubleMICA,sMICA)的表達水平;流式細胞術(shù)(FCM)檢測腫瘤組織中MICA的膜性形式(membraneMICA,mMICA)表達水平。應(yīng)用SPSS13

7、.0統(tǒng)訃分析軟件分析實驗數(shù)據(jù),以P<0.01為差異有坦著統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1皮下接種4種細胞后,裸鼠成瘤率均為100%。接種SKOV3/17D細胞的裸鼠皮下移植瘤生長速度明顯快于SKOV3/neo組,OVCAR3/17D中文摘要組明顯快于OVCAR3/neo組(尸

8、其含量以平均熒光強度(MeanFluorescenceIntensity,MFI)表示(一X士S):3.1SKOV3/17D組中MICA蛋白的MFI值為203.02+3.03,SKOV3/neo組為285.90士1.76,可見SKOV3/17D組MICA蛋白的表達量明顯低于SKOV3/ne

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