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《ⅰ型和新ⅰ型鴨肝炎病毒分離鑒定及實時熒光定量rt-pcr方法建立論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、目錄中文摘要????????????????????????????????I英文摘要???????????????????????????????III1前言????????????????????????????????．．11．1I型鴨肝炎病毒的分類地位??????????????????????11．2I型鴨肝炎病毒的基因組結(jié)構(gòu)特點???????????????????21．2．1全基因組的結(jié)構(gòu)特點??????????????????????．21．2．25'UTR與3'UTR的結(jié)構(gòu)特點???????????????????一21．3I型
2、鴨肝炎病毒的診斷進展??????????????????????31．3．1中和試驗???????????????????????????．．31．3．2瓊脂擴散試驗?????????????????????????．41．3．3酶聯(lián)免疫吸附實驗???????????????????????．41．3．4膠體金法???????????????????????????61．3．5血凝試驗???????????????????????????．61．3．6分子生物學(xué)診斷技術(shù)??????????????????????．71．3．7熒光抗體檢測????
3、?????????????????????．71．4I型鴨肝炎病毒的防治????????????????????????81．5實時熒光定量PCR簡介???????????????????????81．5．1實時熒光定量PCR技術(shù)的原理??????????????????．81．5．2實時熒光定量PCR技術(shù)的種類???????????????????91．6本研究的目的和意義???????????????????????．．102材料和方法?????????????????????????????ll2．1材料??????????????????
4、??????????????????????．112．1．1毒株和病料來源????????????????????????1l2．1．2實驗動物??????????????????????????。1l2．1．3載體與菌株??????????????????????????1l2．1．4主要試劑???????????。???????????????．．1l2．1．5主要儀器???????????????????????????ll2．1。6有關(guān)培養(yǎng)基和溶液的配制????????????????????122．2I型與新I型鴨肝炎病毒一管RT-PC
5、R鑒別診斷方法的建立????????．122．2．1引物設(shè)計與合成????????????????????????122．2．2核酸的提取和PCR反應(yīng)????????????????????．．132．2．3目的基因的克隆及序列分析???????????????????142．2．4反應(yīng)條件優(yōu)化?????????????????????????162．2．5特異性試驗??????????????????????????17I東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文2．2．6靈敏性試驗??????????????????????????172．3浙江株病毒的分
6、離???????????????????????????．．182．3．1接種病料處理?????????????????????????182．3．2病毒增殖及鴨胚接種試驗????????????????????182．3．3病毒的鑒定???????????????????????????．182．4I型與新I型鴨肝炎病毒實時熒光定量RT-PCR檢測方法的建立??????．192．4．1引物的設(shè)計與合成???????????????????????192．4．2標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)粒制備????????????????????????202．4．3熒光定量R
7、T-PCR反應(yīng)體系相關(guān)參數(shù)的優(yōu)化????????????．．202．4．4熒光定量RT-PCR擴增與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立?????????????．．2l2．4．5特異性試驗??????????????????????????212．4．6重復(fù)性試驗??????????????????????????2l2．4．7敏感性試驗??????????????????????????2l2．4．8樣品檢測及與常規(guī)PCR檢測方法的比較??????????????2l3結(jié)果??????????????????????????????????????????．．22
8、3．1I型與新I型鴨肝炎病毒一管RT-PCR鑒別斷診方法的建立????????．223．1．1RT-PCR反應(yīng)條件優(yōu)化的結(jié)果??????
