基因ⅰ型乙腦病毒分離鑒定及熒光定量pcr診斷方法建立

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1、學校巧號１０１９９學＾２０１２５１２６０９０＾系秦Ｈ據：＾Ｗ碩±學位論文基因Ｉ型乙腦病毒分離鑒定及焚光定量ＰＣ民診斬方法建立Ｉｓｏｌａｔｉｏｎｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ，－ｏｆＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲａｓｓａｆｏｒＪａａｎｅｓｅｙｐｅｎｃｅｈａｌｉｔｉｓｖｉｒｕｓｅ打ｏｔｅＩｐｇｙｐ學位申請人張輝導師姓名職稱朱光澤教授郭炭教授專業(yè)名稱中西醫(yī)結合臨床研巧方向現代醫(yī)技與中醫(yī)藥研究檢驗培養(yǎng)方式全曰制申請學位類型專業(yè)學位

2、論文提交日期２０１５年３月分類號密級ＵＤＣ編號碩±學位論文基因Ｉ型乙臘病毒分離鑒定及焚光定量ＰＣＲ診斷方法建立Ｉｓｏｌａｔｉｏｎｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ，－ｔｏｆＲｅａｌｉｍｅＰＣＲａｓｓａ）ｒＪａａｎｅｓｅｙｆｔｐｅｎｃｅｈａｌｉｔｉｓｖｉｒｕｓｅｎｏｔｅＩｐｇｙｐ轉指導教師姓名：朱光譯教授郭疏教授（長春中醫(yī)藥大學）申請學位級別：碩±專業(yè)名稱：中西醫(yī)結合臨床硏究方向：現代醫(yī)技與中醫(yī)藥硏究檢驗論文提交日

3、期：２０１５年３月論文答辯日期：２０１５年６月學位授予單位：長春中醫(yī)藥大學提交確認；作者簽＾簽名；＾長春中醫(yī)藥大學學位論文原創(chuàng)性聲明，本人鄭重聲明：所呈交的學位論文是個人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經特別加Ｗ注明引用的內容夕本論文不含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中Ｗ明確方式標明并致謝。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名＾如ｉ年／月分／＞關于學位論文知識產權歸屬的聲明本人鄭重聲明：所呈交

4、的學位論文，是本人在導師指導下自選課題或導師承擔的國家立項資助一的計劃課題的部分人在導師指導和資助下獨立進行研究工作所取得的成果，知識產權歸屬，系本一權為長春中區(qū)藥大學和本人導師所有。特此聲明－，本聲明的切法律責任由本人承扭。論文作者簽名教師簽《關于學位論文使用授權的聲明本人完全了解長春中醫(yī)藥大學有關保留使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向有關機構送交論文的復印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權長春中醫(yī)藥大學可＾將本學位論文的全部或＾１＾采用影印部分內容編人有關數據庫進行檢索、縮印或其他復印手段保存和匯編本學

5、位論文。，可（保密論文在解密后應遵守此規(guī)定）論文作者簽名＾教師簽名?。墸牐桑崳娨麓褐嗅t(yī)藥大學２０１２屆碩壬學位論文目錄目錄中：＾摘要１英文摘要２英文縮略語３刖胃４娜綜述５１己型腦炎病毒的研究進展５１．１乙腦的基因結構６１．２乙型腦炎病毒的基因型及進化６１．３乙型腦炎病毒的流行病學６４１．傳播媒介７１．５影響ＪＥＶ流行病學主耍因素９１６１１．發(fā)病機制１．７免疫１１２總結與展望１３一第章乙腦基因１４Ｉ型的分離和鑒定１４１

6、材料與方法２賊１６３小結２０２第二章蟲媒病毒的分子流巧病學調查１１材料與方法２１２結果２２３?。牐樱玻矗崳姷冢日拢墸剩牛只颍尚鸵墓舛浚校妹穹椒ǖ慕ⅲ玻担崳姡墸保壊牧吓c方法２５２鄉(xiāng)２６３?。樱常保崳姡墸椋簦壵摚常玻崳姡壗Yｉｆ３５長春中醫(yī)藥大學２０１２廟巧壬學位論文ａ錄致謝３６參考文獻３７長春中醫(yī)藥大學２０１２屆碩去學位Ａ文中文摘要中文摘要目的：流行性乙型腦炎是危害人類健康比較嚴重的蟲媒病毒。盡管目前乙腦的發(fā)?。崳娐视兴陆担l(fā)病區(qū)域仍呈現不斷擴大

7、的趨勢，。加強己腦的監(jiān)測就可Ｗ評估該地區(qū)乙腦的流行狀況。蚊子是ＪＥＶ的主要傳播媒介，對蚊子的流行性乙型腦炎病毒和蟲媒?。崳姸具M行分子流行病學監(jiān)測，對疾病預防具有防范意義。－方法：首先將云南省景洪縣采集１５份蚊蟲樣品研磨接種ＢＨＫ２１和Ｃ６／３６單層細胞，待出現細胞病變。提取病毒ＲＮＡ，并反轉錄ｃＤＮＡ進行ＰＣＲ鑒定將目的基因克?。崳姡停模剑保福浴＃休d體，送上海生工測序同時進行蓋塔病毒、辛德畢斯、基孔肯雅病毒的ＰＣ民鑒定，回收并測序。在此基礎上構建了乙腦基因Ｉ型標準質粒，建立了基于ＳＹＢ民ｒｅｅｅａ－ｍｅＧｎＩ染料的Ｒ，

8、。ｌｔｉＰＣ民檢測方法選?。阎抵谱鳂藴是€結果：乙腦ＰＣＲ擴増目的基因經測序驗證為己腦基因Ｉ型，然后構建應用巧光定量ＰＣ民標準質粒。研巧建立的標準曲線能夠