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《腸粘膜屏障損傷在iga腎病發(fā)病中作用論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要第一部分IgA腎病大鼠模型的構(gòu)建及鑒定目的：用口服免疫致IgA腎病大鼠模型，并觀察其腎臟病理變化，為之后IgA腎病發(fā)病機(jī)制的研究及探討IgA。腎病的防治提供基礎(chǔ)。方法：20只spraguedawley(SD)雌性大鼠隨機(jī)分成2組，即正常對(duì)照組和IgA腎病模型組(n=lO)。利用牛血清白蛋白(BSA)+脂多糖(LPS)+四氯化碳(CCl4)聯(lián)合構(gòu)建IgA腎病大鼠模型。具體實(shí)施方案如下：BSA(400mg／kg，隔日灌胃)×6周+LPS(每只0．05mg／次，第6、8周尾靜脈注射各1次)+CCl4(蓖麻油每
2、只0．5ml／次+CCh每只O．1ml／次，每周皮下注射1次)×9周。10周末處死動(dòng)物，用免疫熒光法檢測(cè)腎小球IgA的沉積，蘇木素一伊紅(HE)染色法觀察各組大鼠腎臟的病理變化，動(dòng)物處死前1天收集24小時(shí)尿液做尿沉渣紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和24小時(shí)尿蛋白量的檢測(cè)。結(jié)果：正常對(duì)照組大鼠腎臟未見(jiàn)IgA免疫熒光；組織切片顯示，腎小體大小正常，系膜區(qū)無(wú)明顯增生，毛細(xì)血管袢開(kāi)放良好，腎小管、腎間質(zhì)均未見(jiàn)明顯變化；尿液檢測(cè)未見(jiàn)鏡下血尿，24小時(shí)尿蛋白量正常。而IgA腎病模型組在腎小球系膜區(qū)可見(jiàn)亮綠色顆粒狀I(lǐng)gA沉積熒光；腎臟組織病
3、理學(xué)顯示，腎小體增大，1腎小囊擴(kuò)張，腎小球變小，腎小球血管稀疏，球內(nèi)系膜增生，纖維化明顯，腎小管腫脹阻塞；尿液檢測(cè)可見(jiàn)鏡下血尿，24小時(shí)尿蛋白量增加。結(jié)論；利用BSA+LPS+CCl4能成功構(gòu)建IgA腎病大鼠模型。模型構(gòu)建的成功提示IgA腎病的發(fā)病可能與腸粘膜屏障功能破壞及粘膜免疫功能紊亂有關(guān)。關(guān)鍵詞：IgA腎??；牛血清白蛋白；腎小體；大鼠第二部分IgA腎病模型大鼠腸粘膜屏障損傷及其與IgA腎病發(fā)病的關(guān)系目的：觀察IgA腎病模型大鼠腸粘膜屏障的病理變化，并探討其與IgA腎病發(fā)病的關(guān)系。方法：將14只SD雌性
4、大鼠隨機(jī)分成2組，即正常對(duì)照組和IgA腎病模型Il摘要組(n=7)。用HE染色觀察腸粘膜的一般組織病理變化，并用圖像分析系統(tǒng)測(cè)量?jī)山M大鼠腸絨毛高度、腸隱窩深度及兩者比值、腸絨毛中央乳糜管體密度及其直徑；利用透射電鏡觀察兩組大鼠小腸上皮緊密連接的變化：激光共聚焦顯微鏡觀察小腸上皮緊密連接蛋白ZO-1和oceludin的表達(dá)；RT—PCR和Westernblot技術(shù)測(cè)其mRNA和蛋白表達(dá)的變化：用高效液相色譜法測(cè)量尿中乳果糖／甘露醇的比值以反映腸粘膜通透性的變化；用免疫熒光法檢測(cè)腎小球IgA的沉積。結(jié)果：與正常
5、對(duì)照組相比，IzA腎病模型鼠出現(xiàn)腸上皮脫落、腸絨毛變矮并不規(guī)整，腸絨毛數(shù)量減少并間距增寬，固有層充血、乳糜管擴(kuò)張和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。圖像分析結(jié)果顯示，腸絨毛變短，腸隱窩加深，兩者比值減小，腸絨毛中央乳糜管體密度增大，直徑增大；腸上皮細(xì)胞緊密連接結(jié)構(gòu)受到破壞，電子密度降低；小腸上皮緊密連接蛋白ZO～1和occludin的mRNA及蛋白的表達(dá)均下降；尿中乳果糖／甘露醇的比值升高；腎小球系膜區(qū)有亮綠色顆粒狀I(lǐng)gA沉積；腎小球IgA的平均光密度與其尿乳果糖／甘露醇的比值呈正相關(guān)。結(jié)論：IgA腎病模型組大鼠的腸粘膜屏障受
6、損，腸粘膜通透性增加；腎小球IgA的相對(duì)表達(dá)量與腸粘膜的通透性呈正相關(guān)，提示腸粘膜屏障的受損與IgA腎病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。關(guān)鍵詞：IZA腎??；腸粘膜屏障；發(fā)病機(jī)制；大鼠第三部分大黃酸對(duì)IgA腎病大鼠腸粘膜屏障損傷的防治作用目的：觀察大黃酸(RH)對(duì)IgA腎病大鼠腸粘膜屏障損傷的防治作用。方法：將28只sD雌性大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組、IgA腎病模型組、RH治療組和RH預(yù)防組(n_7)。用HE染色和圖像分析系統(tǒng)測(cè)量各組大鼠腸絨毛高度、腸隱窩深度、腸絨毛中央乳糜管體密度及其直徑；利用透射電鏡觀察各組大鼠小腸上
7、皮緊密連接的變化；激光共聚焦顯微鏡觀察小腸上皮緊密連接蛋白zo一1和occludin的表達(dá)；RT～PCR和Westernblot技術(shù)測(cè)其mRNA和蛋白表達(dá)的變化；用高效液相色譜法測(cè)量尿中乳果糖／甘露醇的比值來(lái)反映腸粘膜通透性的變化。結(jié)果：正常對(duì)照組腸絨毛排列整齊，上皮細(xì)胞間的緊密連接位于細(xì)胞膜外側(cè)面的頂端，呈致密的條帶狀結(jié)構(gòu)，相鄰細(xì)胞之問(wèn)貼合緊密，無(wú)明顯縫隙，緊密連接蛋白ZO一1和oceludin均勻一致的分布在小腸上皮細(xì)胞連接處的頂端。與Ill摘要正常對(duì)照組相比，IgA腎病模型組腸絨毛排列不規(guī)整，絨毛高度
8、縮短，腸隱窩深度加深，兩者比值下降，中央乳糜管體密度和直徑均增加，腸上皮細(xì)胞之間的緊密連接結(jié)構(gòu)受到破壞，電子密度降低、模糊，腸絨毛近腔面上皮細(xì)胞之問(wèn)的ZO．1和occludin分布減少，不均，熒光強(qiáng)度變?nèi)?，其mRNA和蛋白的表達(dá)水平均降低，尿乳果糖／甘露醇的比值增高。與IgA腎病模型組相比，RH預(yù)防組和RH治療組大鼠腸粘膜病理改變明顯減輕，腸絨毛高度增加，腸隱窩深度變淺，兩者比值升高，中央乳糜管體密度和直徑均下降
