魚藤酮致帕金森大鼠腦內mglur1a和glt-1表達的改變

《魚藤酮致帕金森大鼠腦內mglur1a和glt-1表達的改變》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文魚藤酮致帕金森大鼠腦內mGluR1a和GLT--1表達的改變姓名：尹彥芳申請學位級別：碩士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學指導教師：樊平201203中文摘要魚藤酮致帕金森大鼠腦內mGluRla和GLT-1表達的改變摘要帕金森病(Parkinson’Sdisease，PD)又名震顫麻痹(Paralysisagitans)，是一種主要發(fā)生于中年以上人群的神經(jīng)退行性疾病。其主要病理特點為選擇性的黑質多巴胺能神經(jīng)元退行性變、腦內多巴胺含量減少及胞體內出現(xiàn)Lewy小體等。近年有研究發(fā)現(xiàn)，PD患者紋狀體中多巴胺遞質缺乏將會導致基底神經(jīng)節(jié)回路中谷氨酸能神經(jīng)元活動的紊亂，同時谷氨酸能神經(jīng)通

2、路的過度激活在PD的癥狀產(chǎn)生過程中有重要作用。谷氨酸(glutamate，Glu)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內一種重要的興奮性神經(jīng)遞質，當它被釋放到突觸間隙后，通過與代謝型谷氨酸受體(mGluRs)結合調節(jié)突觸傳遞和神經(jīng)元的興奮性過程。谷氨酸轉運體．1(glutamatetransporters．1，GLT．1)是谷氨酸轉運體(glutamateransporterEAAn)的一個亞型，它能逆濃度梯度從胞外向胞內攝取谷氨酸，使胞外谷氨酸濃度保持在較低水平，EAATs的功能一旦受損，突觸間隙內的Glu濃度升高，繼而使突觸后膜神經(jīng)元興奮，甚至產(chǎn)生興奮性神經(jīng)毒性作用。目前對帕金森病的治療尚缺乏理想的治療藥物，

3、因此，本研究通過觀察分析mGluRla和GLT-1在PD模型腦內的表達改變，探討mGluRla和GLT-1在PD發(fā)生發(fā)展過程中所起的作用，為尋找PD治療的新靶點提供形態(tài)學依據(jù)。流行病學顯示PD的誘因多樣而復雜，環(huán)境因素一直受到人們的關注。魚藤酮是一種被廣泛使用的殺蟲劑，為高脂溶性，極易透過生物膜和血腦屏障。能特異性的抑制線粒體復合體I，造成細胞氧利用障礙。同時魚藤酮還能夠通過微管解聚機制，產(chǎn)生大量自由基，破壞神經(jīng)元的功能。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)給予魚藤酮后大鼠出現(xiàn)的癥狀和發(fā)生的病理改變，很好的模擬了人類帕金森病的特征改變。因此本實驗選擇了帕金森病的魚藤酮大鼠模型作為研究對象。目的：本研究采用魚藤

4、酮皮下注射方法制備PD大鼠模型，觀察分析魚藤酮制備的PD大鼠腦內mGluRla牙NGLT-1的表達改變，從而為PD的研究及其治療提供新的形態(tài)學依據(jù)。中文摘要方法：選用3009左右雄性SD大鼠，隨機分為對照組，3天組，28天組，實驗組背部皮下注射魚藤酮分別為3天和28天(1．5mg／Kg)，對照組大鼠背部皮下注射相同劑量葵花油。以免疫印跡技術檢測大鼠黑質酪氨酸羥化酶(Tyrosinehydroxylase，TH)的含量的改變，確定PD大鼠模型成功與否：以免疫組織化學技術檢測大鼠腦內尾殼核(CPucorpusstriatum)和伏核(Acbaccumbens)區(qū)域GLT-1和mGluRla的表達

5、情況。結果：1．魚藤酮的毒性作用：自注射魚藤酮第三天開始大鼠逐漸出現(xiàn)理毛動作減少致使毛色又臟又黃、并有呸毛現(xiàn)象；同時還伴有精神萎靡、自由活動減少、弓背姿勢、肢體震顫、嚴重者可有四肢行動不能尤以下肢為重；嗅覺和覓食動作減少、體重逐漸減輕等；部分大鼠還會出現(xiàn)腹瀉及口腔出血等現(xiàn)象。此階段為大鼠死亡的高發(fā)期，整個模型制備過程大鼠的死亡率為31．58％。但隨著給要時間的增長大鼠PD癥狀出現(xiàn)好轉，具體原因有待以后實驗的進一步研究。2．Westernblot結果：與對照組相比魚藤酮組TH與p．a(chǎn)ctin條帶相對光密度比值明顯降低。魚藤酮組TH與p．a(chǎn)ctin條帶相對光密度值的比值在黑質為0．189士0．0

6、26，比對照組減少T66．5％(尸O．05)。(2)GLT．1免疫組化結果：1)魚藤酮3天組：通過光密度值分析發(fā)現(xiàn)，魚藤酮3天組DM部位GLT-1的平均光密度值比對照組降低了0．8％，VM、VL

7、、DL部位的GLT-1平均光密度值比對照組分別升高了5．9％、16．8％和14％，其中只有VL部位的差異有統(tǒng)計學意義(PO．05)。2)魚藤酮28天組：通過光密度值分析發(fā)現(xiàn)，魚藤酮28天組CPu的DM、中文摘要VM、VL、DL部位的GLT-1平均光密度值比對照組分別升高了24．39％