魚藤酮對(duì)大鼠中腦神經(jīng)元多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)、儲(chǔ)存和代謝的影響

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1、中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志２００８年６月；２２（３）：２２７－２３２ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００８Ｊｕｎ；２２（３）：２２７－２３２·２２７·魚藤酮對(duì)大鼠中腦神經(jīng)元多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)、儲(chǔ)存和代謝的影響?yīng)迟愌?，吳?qiáng)，李云鵬，葉楓，董兆君（第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院防化醫(yī)學(xué)教研室，重慶４０００３８）摘要：目的探討魚藤酮對(duì)多巴胺（ＤＡ）神經(jīng)元選魚藤酮（ｒｏｔｅｎｏｎｅ）是一種線粒體復(fù)合體Ⅰ抑制擇性毒性作用的可能機(jī)制。方法大鼠背部ｓｃ魚劑，近年來廣泛應(yīng)用于蔬菜、瓜果等病蟲害的防治和－１－１［１］藤酮（１．０或１．５ｍｇ·ｋ

2、ｇ·ｄ）２８ｄ，觀察大鼠的外魚塘清理，其造成的環(huán)境污染及對(duì)人體的危害正觀和行為變化。然后麻醉處死大鼠，取中腦黑質(zhì)組日益引起關(guān)注。大量流行病學(xué)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，魚織。分別用免疫組織化學(xué)法、Ｗｅｓｔｅｒｎ蛋白印跡法和藤酮與帕金森?。ǎ校幔颍耄椋睿螅铮睿洌椋螅澹幔螅?，ＰＤ）發(fā)病有一定ＲＴＰＣＲ法檢測(cè)魚藤酮對(duì)大鼠中腦黑質(zhì)ＤＡ神經(jīng)元的相關(guān)性，魚藤酮可選擇性地使黑質(zhì)／紋狀體多巴胺突觸囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（ＶＭＡＴ２）表達(dá)的影響；以卞胺能神經(jīng)系統(tǒng)變性。但其作用機(jī)制尚不清楚。魚藤酮為底物進(jìn)行比色，檢測(cè)組織單胺氧化酶（ＭＡＯ）的活是否影響神經(jīng)元內(nèi)

3、多巴胺（ｄｏｐａｍｉｎｅ，ＤＡ）的轉(zhuǎn)運(yùn)和性；高效液相色譜熒光檢測(cè)器流速梯度法測(cè)定黑質(zhì)儲(chǔ)存功能造成ＤＡ轉(zhuǎn)運(yùn)障礙，使過多的ＤＡ在細(xì)胞組織內(nèi)ＤＡ及其代謝產(chǎn)物３，４二羥基苯乙酸質(zhì)內(nèi)積聚，激活ＤＡ代謝，從而導(dǎo)致神經(jīng)元的細(xì)胞毒（ＤＯＰＡＣ）和高香草酸（ＨＶＡ）的含量。結(jié)果性效應(yīng)，目前國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道。因此，本研究采用整注射魚藤酮２８ｄ后，大鼠發(fā)生外觀和行為改變，出體動(dòng)物模型，探討魚藤酮對(duì)大鼠中腦ＤＡ神經(jīng)元突現(xiàn)類帕金森病癥候群特征；中腦黑質(zhì)ＤＡ神經(jīng)元觸囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（ｖｅｓｉｃｕｌａｒｍｏｎｏａｍｉｎｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒＶＭＡＴ２

4、蛋白免疫深染的細(xì)胞數(shù)量減少；魚藤酮１．０２，ＶＭＡＴ２）表達(dá)及與ＤＡ代謝密切相關(guān)的單胺氧化－１和１．５ｍｇ·ｋｇ組ＶＭＡＴ２蛋白和基因表達(dá)與正常對(duì)酶（ｍｏｎｏａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅ，ＭＡＯ）活性的影響，以期為照組比較明顯降低，ＭＡＯ活性分別從對(duì)照組的闡明魚藤酮選擇性ＤＡ神經(jīng)元毒性作用機(jī)制提供實(shí)（２３．６±７．６）升高至（３７．８±５．０）和（４０．５±４．３）驗(yàn)依據(jù)。－１－１ｋＵ·ｈ·ｇ蛋白，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組大鼠中腦黑質(zhì)組織內(nèi)ＤＡ及其代謝產(chǎn)物ＤＯＰＡＣ和ＨＶＡ含１材料與方法量明顯減少。結(jié)論魚藤酮可抑制大鼠中腦黑質(zhì)

5、ＤＡ神經(jīng)元ＶＭＡＴ２的表達(dá)，增強(qiáng)ＤＡ代謝相關(guān)酶ＭＡＯ的１．１試劑和儀器活性，進(jìn)而影響ＤＡ的轉(zhuǎn)運(yùn)、儲(chǔ)存和代謝，這可能是魚魚藤酮（美國(guó)Ｓｉｇｍａ）；ＤＡ，３，４二羥基苯乙酸藤酮ＤＡ神經(jīng)元選擇性毒性作用機(jī)制之一。（３，４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄ，ＤＯＰＡＣ）和高香草關(guān)鍵詞：魚藤酮；多巴胺；突觸囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體；酸（ｈｏｍｏｖａｎｉｌｌｉｃａｃｉｄ，ＨＶＡ）標(biāo)準(zhǔn)品（美國(guó)Ｓｉｇｍａ）；單胺氧化酶；神經(jīng)元ＭＡＯ活性測(cè)定試劑盒（中國(guó)南京建成生物工程公司）；Ｔｒｉｓ堿，過硫酸銨，十二烷基磺酸鈉，四甲基乙中圖分類

6、號(hào)：Ｒ９９６二胺，甘氨酸，低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和瓊脂糖等（美文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ＡＴＭ國(guó)Ｓｉｇｍａ）；抗ＶＭＡＴ２抗體，ＳＰ９００２ＨｉｓｔａｉｎＰｌｕｓ文章編號(hào)：１０００３００２（２００８）０３０２２７０６試劑盒和ＤＡＢ顯色試劑盒（美國(guó)ＳａｎｔａＣｒｕｚ）；ＰＣＲＤＯＩ：１０．３８６７／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００３００２．２００８．０３．０１２標(biāo)準(zhǔn)品和焦碳酸二乙脂，ＲＮＡ酶抑制劑，逆轉(zhuǎn)錄酶，５×逆轉(zhuǎn)錄酶緩沖液，脫氧核苷酸，ＴａｑＤＮＡ聚合收稿日期：２００７１０１５接受日期：２００８０１１５酶和寡聚脫氧胸腺嘧啶核苷酸

7、（美國(guó)Ｐｒｏｍｅｇａ）；溴基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（３０４００３４７）化乙啶，考馬斯亮藍(lán)Ｒ２５０，丙烯酰胺和雙甲叉丙烯作者簡(jiǎn)介：賽燕（１９７６－），山東威海人，博士，講師，主要從事環(huán)境毒物神經(jīng)毒理學(xué)研究，Ｔｅｌ：（０２３）酰胺等由華美生物公司采購；甲醇和ＫＨ２ＰＯ４為色６８７５２３５６，Ｅｍａｉｌ：ｓａｉ２０００ｃｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ譜純，其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。紫外可見光分光光度計(jì)（日本島津）；電泳儀及垂直電泳槽（美國(guó)聯(lián)系作者Ｔｅｌ：（０２３）６８７５２２８５·２２８·ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏ

8、ｘｉｃｏｌ２００８Ｊｕｎ；２２（３）ＢｉｏＲａｄ）；石蠟切片機(jī)（英國(guó)）；多功能電子自動(dòng)蠕１．６大鼠中腦黑質(zhì)組織ＭＡＯ活性測(cè)定動(dòng)泵（中國(guó)）。給大鼠ｓｃ魚藤酮２８ｄ后，麻醉，斷頭，取腦于冰１．２動(dòng)物分組上分離中腦黑質(zhì)組織。組織蛋白以芐胺為底物，在健康成年ＳＤ大鼠８０只，合格證號(hào)：ＳＣＸＫ（渝）ＭＡＯ作用下