nrf2和ho-1在腎癌組織中的表達(dá)及臨床意義

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1、目錄中文摘要??????????????????????????l英文摘要??????????????????????????3研究論文NI億和HO.1在腎癌組織中的表達(dá)及臨床意義前言??????????????????????????6刖舌??”?””“”一??””一”一“““”””?““?一””???一”6材料與方法???????..???????????????·8結(jié)果???????????6aQ10oeto60??????????11附圖??????????????????????????13附表??????????????????????????15討論·········?

2、?···?··?······??··一··?···???????···?·16結(jié)論??···?·?··?··?·i·······?···????···??···??···?·18參考文獻(xiàn)????????????????????????19綜述腎癌發(fā)生發(fā)展分子機(jī)制研究進(jìn)展?????????????23致謝???·????????????????????????“33個(gè)人簡(jiǎn)介??????????????????????????34中文摘要Nrf2和I-IO.1在腎癌組織中的表達(dá)及臨床意義摘要目的:腎癌是泌尿系腫瘤中常見的腫瘤,70%.80%為透明細(xì)胞癌,近年發(fā)病有增加趨勢(shì)。尋找腎癌的新靶

3、點(diǎn)對(duì)于腎癌的早期發(fā)現(xiàn)及預(yù)后并制定治療方案有著非常重要的意義。在腫瘤形成和細(xì)胞增殖過(guò)程中,氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)與之密切相關(guān),已成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究熱點(diǎn),與氧化應(yīng)激相關(guān)途徑的有關(guān)基因有可能成為潛在的藥物治療腫瘤的作用靶點(diǎn)。目前研究發(fā)現(xiàn)很多藥物是通過(guò)調(diào)節(jié)Nrf2/HO.1信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮抗氧化及抗炎作用的。為探討Nr£2和HO.1與腎癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組化SABC和RT-PCR法檢測(cè)Nr也和HO.1在腎癌和癌旁正常組織中的表達(dá)情況,探討Nrf2和HO—l在腎癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法:選取河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院外科手術(shù)切除的腎癌組織標(biāo)本5l例。選其中23例患者中的癌旁組織(經(jīng)病理

4、證實(shí)為正常腎組織)為對(duì)照組。所有病例術(shù)前均未進(jìn)行過(guò)放療和(或)化療。所有標(biāo)本分為兩份,一份經(jīng)4%甲醛溶液固定,石蠟塊包埋,另一份保存于液氮之中。免疫組織化學(xué)方法檢測(cè):應(yīng)用免疫組化技術(shù),從蛋白水平檢測(cè)石蠟包埋組織中Nrf2和HO.1的表達(dá),其中腎癌組織標(biāo)本51例,正常腎組織標(biāo)本23例。采用雙評(píng)分半定量法來(lái)進(jìn)行評(píng)分,綜合統(tǒng)計(jì)染色陽(yáng)性率及染色強(qiáng)度,運(yùn)用SPSSl7.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù),比較腎癌組織和正常腎組織中Nrf2及HO.1的陽(yáng)性表達(dá)率之間的差異。采用#檢驗(yàn),把具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著性差異的臨界值定為P<0.05。Nrf2與HO.1關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析。RT-PCR方法檢測(cè):根據(jù)

5、Trizol試劑盒說(shuō)明提取冰凍組織中的總RNA,加入RT反應(yīng)體系管,進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA,設(shè)立]3-actin基因片段為NrQ和HO.1基因表達(dá)的內(nèi)參照,在RT-PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增,取每個(gè)標(biāo)本的擴(kuò)增產(chǎn)物行瓊脂糖凝膠電泳,以DNAMarker(DL2000)作為標(biāo)準(zhǔn)片段標(biāo)記,電泳后用紫外透射儀觀察,應(yīng)用QuantityOne凝膠圖象分析軟件對(duì)目的電泳條帶進(jìn)行分析,以13-aetin電泳條帶作為參照,結(jié)果以兩者吸光度的比值表示。兩組間吸光度比值采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P<0.05中文摘要認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1免疫組織化學(xué)染色示:Nrf2主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞漿中,在腎癌組

6、織中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.4%,在癌旁正常組織中表達(dá)的陽(yáng)性率為34.8‰兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=-0.00,P<0.05)。HO.1主要位于腫瘤細(xì)胞的胞漿中,其在腎癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為76.5%,在癌旁正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為39.1%,二者陽(yáng)性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=-0.02,P<0.05)。Nrf2和HO.1蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(FO.515P<0.05)。2RT-PCR結(jié)果顯示:Nrf2在腎癌和癌旁正常組織的表達(dá)量分別為0.747+0.101和0.374+0.071,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸

7、.410+0.085,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(氏O.05)。.結(jié)論:1Nrf2和HO.1蛋白在腎癌組織中的表達(dá)高于癌旁正常組織中的表達(dá)。.2Nr位、HO.1蛋白在腎癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)。3Nr也、HO.1蛋白可能參與了腎癌的發(fā)生、發(fā)展,并在演變過(guò)程中起到了重要作用。關(guān)鍵詞:腎癌;Nrf2;HO.1;免疫組化;RT-PCR研究論文———————————————————————————————————————————————————————一一一Theexpr

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