asc基因異常甲基化與胃癌相關(guān)性的研究

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1、《中國圖書資料分類法》單位代碼:10660分類號(hào):R735學(xué)號(hào):10660S090071貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士學(xué)位論文ASC基因異常甲基化與胃癌相關(guān)性的研究研究生姓名:李文翠導(dǎo)師:陶建蜀教授張吉才教授年級(jí):2009級(jí)專業(yè):臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)2012年5月9日貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生論文目錄摘要………………………………………………………………2前言……………………………………………………………4材料與方法1……………………………………………………8材料與方法2……………………………………………………26結(jié)果1…………………………

2、………………………………19討論1…………………………………………………………22結(jié)果2…………………………………………………………32討論2………………………………………………………34參考文獻(xiàn)………………………………………………………38英文摘要………………………………………………………43致謝…………………………………………………………45略縮詞表…………………………………………………………46論文原創(chuàng)性聲明…………………………………………………47附:綜述………………………………………………………48-1-貴陽醫(yī)學(xué)院201

3、2屆碩士研究生論文ASC基因異常甲基化與胃癌相關(guān)性的研究臨床檢驗(yàn)診斷專業(yè)研究生:李文翠導(dǎo)師:陶建蜀教授張吉才教授摘要目的:通過檢測ASC基因在胃組織中的甲基化狀態(tài)及其mRNA的表達(dá)情況,分析兩者與胃癌臨床病理特征之間的關(guān)系及兩者表達(dá)的相關(guān)性;通過去甲基化藥物處理胃癌細(xì)胞SGC7901,探討ASC基因甲基化狀態(tài)與其mRNA表達(dá)的相關(guān)性,闡明ASC基因在胃癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中的作用和可能的機(jī)制,為腫瘤的防治尋找一個(gè)新的可能的靶點(diǎn)。。方法:1、通過甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)對組織中ASC啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)進(jìn)行檢測;2、運(yùn)

4、用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)對組織中ASC基因mRNA的表達(dá)情況進(jìn)行檢測;3、用MSP和RT-PCR分別對5-aza-CdR處理前后胃癌細(xì)胞中ASC基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化狀態(tài)和mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測。將該基因的甲基化水平與mRNA表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果:1、50例胃癌組織中有16例檢測到甲基化,甲基化率為32%,100例非腫瘤胃組織12例出現(xiàn)了甲基化,甲基化率為12%。癌組織與非腫瘤胃組織的甲基化率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);2、胃癌組織中ASC基因甲基化狀態(tài)與患者年齡、性別、腫瘤大小、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、胃癌組織分型無

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);3、胃癌組織的ASC基因mRNA表達(dá)為0.893±0.361,而非腫瘤胃組織中ASC基因mRNA表達(dá)為(1.000±0.002),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.041);4、胃癌組織中ASC基因mRNA定量表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、胃癌組織分型無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);5、用Pfaffi法計(jì)算所得的數(shù)值大于l為基因表達(dá)陽性,小于1為基因表達(dá)陰性。算得胃癌組織中ASC基因表達(dá)陽性的有5例,其中未發(fā)生甲基化2例,發(fā)-2-貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生論文生部分甲基化2例,完全甲基化的1

6、例;表達(dá)陰性的有45例,其中未發(fā)生甲基化32例,發(fā)生部分甲基化4例,完全甲基化的9例。ASCmRNA表達(dá)不同的組織中ASC基因的甲基化水平有差(P<0.05);6、未經(jīng)5-aza-CdR處理的胃癌細(xì)胞株SGC7901內(nèi),ASC基因啟動(dòng)子區(qū)域檢測為甲基化狀態(tài);經(jīng)過5-aza-CdR藥物處理后的SGC7901細(xì)胞內(nèi),ASC基因啟動(dòng)子區(qū)檢測為非甲基化狀態(tài);未經(jīng)5-aza-CdR處理的胃癌細(xì)胞株SGC7901內(nèi)未檢測到ASCmRNA的表達(dá),經(jīng)過5-aza-CdR藥物處理后的SGC7901細(xì)胞內(nèi)ASCmRNA重新得到表達(dá)。結(jié)論:1、胃癌組織

7、中ASC基因存在甲基化;2、胃癌組織中ASC基因表達(dá)缺失或低下;3、ASC基因的甲基化水平與mRNA表達(dá)水平相關(guān),該基因發(fā)生甲基化可能與胃癌發(fā)生有關(guān);4、ASC基因發(fā)生甲基化和表達(dá)缺失可能發(fā)生在胃癌早期;5、5-aza-CdR對胃癌細(xì)胞株SGC7901進(jìn)行處理細(xì)胞后ASC基因mRNA重新得到表達(dá),提示ASC基因啟動(dòng)子甲基化是該基因失活的一個(gè)重要原因,去甲基化治療可能為臨床治療胃癌提供一種新的靶點(diǎn)和思路。關(guān)鍵詞:胃癌;ASC基因;甲基化;甲基化特異性PCR;-3-貴陽醫(yī)學(xué)院2012屆碩士研究生論文前言胃癌是來源于胃粘膜上皮和腺上皮的

8、惡性腫瘤,是嚴(yán)重危害國人健康的常見惡性腫瘤,我國胃癌患者約占全球的40%以上,其發(fā)病率、死亡率一直高居我國[6]惡性腫瘤前三位。胃癌的發(fā)病率在人類的性別、年齡、地區(qū)、種族存在著差別,其分布也呈現(xiàn)全球性的特點(diǎn)。其男性患者多于女性患者,中老年患者多于青

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