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《gapdh內(nèi)參抗體》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、GAPDH抗體推薦—高性價比GAPDH內(nèi)參抗體的選擇在WesternBloting實驗中,可能存在總蛋白濃度測定不準(zhǔn)確,或者蛋白質(zhì)樣品在電泳前上樣時產(chǎn)生的樣品間的操作誤差;這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉(zhuǎn)到膜上的內(nèi)參,比如內(nèi)參GAPDH的含量來進(jìn)行校正。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)是參與糖酵解的一種關(guān)鍵酶,由4個30-40kDa的亞基組成,分子量146kDa,檢測條帶大約在36kDa。GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達(dá),廣泛用作Westernblot蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)參。如何選擇合適的GAPDH抗體?內(nèi)參抗體雖然選擇較多,但是也需要遵循一定
2、的原則,并契合實際的應(yīng)用要求。首先,我們需要考慮目的蛋白的大小,我們推薦內(nèi)參要與檢測的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根據(jù)你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內(nèi)參,由于GAPDH的檢測分子量大約在36kD,因此該內(nèi)參抗體不是很適合用于檢測30kD-40kD大小目標(biāo)蛋白的WB實驗中。另外,不同的組織來源的樣本在選擇內(nèi)參時還有一定的區(qū)別。比如某些細(xì)胞中,由于組織缺氧、糖尿病等因素會導(dǎo)致GAPDH的表達(dá)增高,不適合做內(nèi)參。因為檢測的目的蛋白分子量在50kD左右,之前的β-Tubulin不是很適合,就購買了一支Abbkine的GAPDH抗體做內(nèi)參,效價確
3、實有點驚訝,我用1:1000倍起始稀釋覺得條帶很濃,后來一直到1:8000稀釋,同時減少了曝光時間,條帶仍然很清晰?!錆h大學(xué)生命科學(xué)院一客戶產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明Anti-GAPDHMonoclonalAntibody(2B5)AbbkineA01020詳情HRPConjugated?Anti-GAPDHMonoclonalAntibody(2B5)AbbkineA01025詳情?一般來說,內(nèi)參抗體可檢測的種屬類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大;而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。另外,抗體的效價也是考察該抗體
4、性價比的重要方面,也即相當(dāng)于實際應(yīng)用時的稀釋比率。一個效價高的100μlGAPDH抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,最終使用液相當(dāng)于500ml),要比效價低的1ml的GAPDH抗體(假如WB檢測的稀釋比率是1:200,最終使用液相當(dāng)于2ml)性價比更高。因此在選擇抗體的時候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價,即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。為什么選擇推薦Abbkine品牌的GAPDH抗體?供應(yīng)GAPDH抗體的進(jìn)口品牌有很多,像Abcam、SantaCruz、CellSignaling(CST)、Millipore等都有相關(guān)GAPDH抗體提供。
5、但是由于不是專門的標(biāo)簽和內(nèi)參抗體供應(yīng)商,因此在性價比上不是最優(yōu)的選擇,以Abcam為例,其一支100μlGAPDH抗體的RMB報價為¥4418;CST的一支100μlGAPDH抗體的報價是¥2997。?另外,一些國內(nèi)的供貨商也能提供分裝的GAPDH抗體,但是在品牌和質(zhì)量保障上都有不足。國產(chǎn)分裝的GAPDH體在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足,并且經(jīng)過分裝以后,其效價也有損失。而原產(chǎn)于國內(nèi)實驗室的GAPDH抗體有些具有較好的檢測活性,但是在應(yīng)用類型上有差距,并且在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制,而國內(nèi)僅有的少量原產(chǎn)抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高,同時也是原裝進(jìn)口
6、品牌的GAPDH內(nèi)參抗體,那Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的GAPHD單克隆內(nèi)參抗體Anti-GAPDHMonoclonalAntibody(2B5)(貨號A01020)。產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明Anti-GAPDHMonoclonalAntibody(2B5)AbbkineA01020詳情HRPConjugated?Anti-GAPDHMonoclonalAntibody(2B5)AbbkineA01025詳情?該抗體單克隆抗體,克隆號為2B5。其抗原為同時具有蛋白特異性和種屬通用性的GAPDH蛋白部分序列
7、,其檢測種屬非常的廣泛,可識別人、小鼠、兔、大鼠、猴、狗、雞、豬和綿羊的GAPDH蛋白,也算是一個真正保守的內(nèi)參抗體。另外,該抗體的效價非常高,WB實驗推薦稀釋比率為1:1000-1:10,000,甚至有客戶報告更高的稀釋比率。幻燈顯示點擊圖片查看AbbkineGAPDH內(nèi)參抗體更詳細(xì)信息?Abbkine還提供大包裝1ml的GAPDH內(nèi)參抗體,非常適合經(jīng)常進(jìn)行內(nèi)參驗證或校準(zhǔn),或者進(jìn)行細(xì)胞骨架熒光定位的免疫學(xué)實驗需求。為方便客戶的使用,上述產(chǎn)品,Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場,提供全球化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障,如果您在使用
8、過程中有任何問題,請直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢?/p>