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《印度芥菜bjcrp1基因的啟動(dòng)子克隆及其功能分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)分類號(hào)：$512．1單位代碼：10086學(xué)號(hào)：圣Q!!窒!圣印度芥菜BjCRPl基因的啟動(dòng)子克隆及其功能分析CloningandFunctionalCharacterizationofBjCRPlanditsPromoterfromBrassicajunceaL．學(xué)位申請(qǐng)人：郭璐指導(dǎo)教師：劉桂茹教授郎明林副研究員學(xué)科專業(yè)：遺傳學(xué)學(xué)位類別：理學(xué)碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二。一四年五月二十五日萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也
2、不包含為獲得塑蘭墾盔些苤堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字同期：≯7V年占月)同學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解塑皇堡盔些盤堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)塑蘭墾壅些盤堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：為l夠年6月2同學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單
3、位：通訊地址：導(dǎo)師簽名：毒一7矽多∥易簽字日期：矽似年6月乙R電話：郵編：萬方數(shù)據(jù)本文所用縮略詞及中文對(duì)照AmpAmpicillin氨芐青霉素KQAdenosinetriphosphate三磷酸腺苷BLASTBasiclocalalignmentsearchtool基本的局部序列聯(lián)配搜索工具CefCefotaxime頭孢噻肟C1jABCetyltriethyminetetradeticacid十六烷基三乙基溴化銨dmDeoxyribonucleosidetriphosphate脫氧核糖核苷三磷酸DMSODimethylsulphoxide二甲基亞砜EDTAEthylenediaminete
4、traaceticacid乙二胺四乙酸GSPGenespecificprimer基因特異引物1mIsopropyl--13-o-·thiogalactopyranoside異丙基．p—D硫代?卜乳糖營KanKanamycin卡那霉素LBLuria-bertanimediumLB培養(yǎng)基MSMurashigeandSkoogmediumMS培養(yǎng)基NAA1-naphthlceticacid葉萘乙酸NCBlNationalCenterforBiotechnologyInformation美國國家生物信息中心0l心Openreadingframe開放閱讀框OD260Absorbanceat260mn
5、260rim處的吸光值OD280Absorbanceat280nm280rim處的吸光值PCRPolymerasechainreaction聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RifRifampicin利福平rmpRevolutionperminute每分鐘轉(zhuǎn)速TaqThermusaquaticusDNApolymerase棲熱水生菌DNA聚合酶TBE靦s-Boricacidt汐弱bufferTris-硼酸緩沖液X-gal5-bromo·4·chloro一3--indolyl-肛D-galactoside5．溴4氯．3一吲哚．B_D一半乳糖苷昏BA6-Benzylaminopurine6-芐氨基腺嘌呤萬方數(shù)據(jù)摘
6、要重金屬離子對(duì)植物的生長發(fā)育的毒害作用非常明顯，會(huì)改變植物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞形態(tài)、抑制植物生長、甚至導(dǎo)致死亡。印度芥菜對(duì)Cd、Zn等多種重金屬有富集或忍耐能力，是作為植物修復(fù)技術(shù)的一種模式植物。印度芥菜可通過對(duì)重金屬的螯合、區(qū)域化等多種方式解除重金屬的毒性，或緩解重金屬的毒害。BjCRPl基因是本實(shí)驗(yàn)室從CdCl2脅迫印度芥菜中克隆的核糖體相關(guān)膜蛋白R(shí)AMP4家族基因。本實(shí)驗(yàn)利用GenomeWalking技術(shù)獲得了BjCRPl的啟動(dòng)子序列，通過分析啟動(dòng)子的順式作用元件對(duì)BjCRPl的生物學(xué)功能進(jìn)行了預(yù)測(cè)分析。同時(shí)，本研究利用農(nóng)桿菌侵染法獲得了BjCRPl過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因煙草植株及其To代種子。
7、通過GUS染色和重金屬脅迫處理，對(duì)轉(zhuǎn)基因煙草BjCRPl的組織表達(dá)部位和對(duì)不同重金屬脅迫的抗性進(jìn)行了初步分析。取得的實(shí)驗(yàn)研究如下：1．采用染色體步移技術(shù)克隆了BjCRPl的啟動(dòng)子。通過生物信息軟件分析表明，該啟動(dòng)子全長733bp，含有轉(zhuǎn)錄調(diào)控的保守元件TATA盒和CAAT盒，此外，還含有多個(gè)與重金屬響應(yīng)及抗病、逆境脅迫、激素信號(hào)途徑、光信號(hào)途徑、發(fā)育有關(guān)的順式作用元件。2．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)染技術(shù)，進(jìn)行了BjCRPl向煙草的轉(zhuǎn)
