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《乙酰肝素酶和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線(xiàn)閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、中圖分類(lèi)號(hào):R碩士學(xué)位論文乙酰肝素酶和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義院(系)、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名王長(zhǎng)安學(xué)科、專(zhuān)業(yè)內(nèi)科學(xué)導(dǎo)師姓名鄧述愷教授二Ο一二年四月1目錄1HPA和MMP-9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義………………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………31.2英文摘要………………………………………………………61.3前言…………………………………………………………91.4材料與方法……………………………………………………111.5結(jié)果……………………………………………………………171.6討論…………
2、…………………………………………………261.7結(jié)論……………………………………………………………351.8參考文獻(xiàn)………………………………………………………361.9英漢縮略詞對(duì)照表……………………………………………422致謝……………………………………………………………433三氧化二砷抗腫瘤機(jī)制研究進(jìn)展(綜述)……………………………………………………………442乙酰肝素酶和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義摘要目的:通過(guò)檢測(cè)乙酰肝素酶(heparanase,HPA)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrixmetalloproteinases-9,MMP-9)在非小細(xì)
3、胞肺癌(NSCLC)與正常肺部組織中的表達(dá),初步探討HPA和MMP-9在NSCLC的發(fā)生、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中的作用。方法:用免疫組化SP法檢測(cè)120例NSCLC組織(鱗癌60癌,腺癌60例)和30例正常肺部組織中HPA和MMP-9的表達(dá)水平。NSCLC組織標(biāo)本均取自四川省瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科,所有患者均未作任何放療或化療。30例正常肺部組織標(biāo)本作對(duì)照。根據(jù)NSCLC標(biāo)本組織分化程度將高-中分化分為第一組,低分化分為第二組;根據(jù)病理類(lèi)型鱗癌為第一組,腺癌為第二組;根據(jù)患者臨床及病理相關(guān)信息進(jìn)行TNM分期:I期為第一組,II-III期為第二組,IV期為第三組。所有組織標(biāo)本用10%福爾馬
4、林固定,以石蠟包埋,進(jìn)行常規(guī)4μm連續(xù)切片。經(jīng)石蠟切片進(jìn)行常規(guī)脫蠟為無(wú)水后,蒸餾水予以沖洗,磷酸鹽緩沖液(phosphatebuffersaline,PBS)浸泡5min。高壓高熱修復(fù)抗原,然后取3%過(guò)氧化氫甲醇液孵育10min以便清除內(nèi)源性過(guò)氧化酶的活性。其次取正常山羊血清封閉交叉反應(yīng)產(chǎn)生的非特異性著色。滴加一抗(HPA兔抗人多克隆抗體的稀釋度為1:50;MMP-9兔抗人多克隆抗體的稀釋度為1:100)孵育,用PBS沖洗,以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照。滴加生物素標(biāo)記二抗進(jìn)行孵育,又用PBS沖洗,滴加辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液(S-A/HRP)進(jìn)行孵育,再用PBS沖洗,DA
5、B顯色,Mayer蘇木精溶液輕度復(fù)染,酸化,藍(lán)化,梯度脫水,透明,封片,最后用3顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察。要注意控制背景。HPA陽(yáng)性主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞漿中,少數(shù)表達(dá)于細(xì)胞核內(nèi),均呈細(xì)顆粒狀或團(tuán)塊狀;MMP-9陽(yáng)性主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞漿和胞膜中,呈細(xì)顆粒狀或團(tuán)塊狀,散在點(diǎn)狀分布。按每張切片陽(yáng)性細(xì)胞比例數(shù)、著色深淺劃分為-、+、++、+++共四個(gè)等級(jí),以幾乎不著色或著色細(xì)胞少于5%為(-),著色較淡或著色細(xì)胞占整張切片5%~25%為弱陽(yáng)性(+),著色適中或著色細(xì)胞占整張切片26%~50%中度陽(yáng)性(++),著色較深或著色細(xì)胞占整張切片大于50%強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。結(jié)果:⑴NSCLC組與正常肺部組
6、織組比較,HPA的表達(dá)水平和MMP-9的表達(dá)水平均不同,且NSCLC組的HPA與MMP-9表達(dá)水平均高于正常肺部組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑵腺癌組和鱗癌組的HPA表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而腺癌組和鱗癌組的MMP-9表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑶根據(jù)NSCLC的分化程度,低分化組的HPA和MMP-9表達(dá)水平均較高-中分化組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑷根據(jù)TNM分期,I期組﹑II-III期組和IV期組的HPA和MMP-9表達(dá)水平不全相同,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。且經(jīng)兩兩比較,II-III期組HPA和MMP-9表達(dá)水平
7、高于I期組,IV期組的HPA和MMP-9表達(dá)水平高于I期組﹑II-III期組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑸根據(jù)等級(jí)相關(guān)分析,HPA與MMP-9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)成正相關(guān)(r=0.416,P<0.005)。結(jié)論:⑴HPA和MMP-9參與了非小細(xì)胞肺癌的形成過(guò)程。⑵HPA和MMP-9在非小細(xì)胞肺癌的進(jìn)展、侵襲和轉(zhuǎn)移方面起到了促進(jìn)作用。⑶HPA和MMP-9在NSCLC中的發(fā)生發(fā)展中可能起到協(xié)同作用,共同促進(jìn)NSCLC的發(fā)生發(fā)展。4關(guān)鍵詞:乙酰肝素酶(HPA);基質(zhì)金屬蛋白酶