波姬紅無花果組織培養(yǎng)與植株再生技術(shù)的研究

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1、萬方數(shù)據(jù)分類號(hào)：密級(jí)：$663．3公玨單位代碼：學(xué)號(hào)：10086波姬紅無花果組織培養(yǎng)與植株再生技術(shù)的研究StudyontissuecultureandplantletregenerationofBoJihongFicuscaricaL．學(xué)位申請(qǐng)人：劉晶指導(dǎo)教師：馬俊蓮教授張子德教授學(xué)科專業(yè)：農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程學(xué)位類別：農(nóng)學(xué)碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二。一四年五月二十四日萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或

2、撰寫過的研究成果，也不包含為獲得塑j量壅些太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：別晶簽字日期：力孵年多月矽日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解邐j匕壅些太堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)邐j壁壅些太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論

3、文作者簽名：糾晶導(dǎo)師簽名：簽字日期：礎(chǔ)年歲月矽日簽字日期：學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通訊地址：電話：郵編鄉(xiāng)～蜥蜒¨研冰萬方數(shù)據(jù)摘要【IMIIMIIIIIIIIIIIHIlUIY2668448無花果果實(shí)皮薄無核，肉質(zhì)松軟，風(fēng)味甘甜，還具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值，尤其是它的抗癌功效已得到了世界各國的公認(rèn)。目前我國無花果栽培面積迅猛增長，產(chǎn)量迅速提高，加之果實(shí)采收期比較集中，采后又極不耐貯運(yùn)，常溫條件下1～2d即軟化、褐變、風(fēng)味下降以致腐爛，給貯藏、加工、運(yùn)輸?shù)葞順O大的困難，嚴(yán)重影響了其經(jīng)濟(jì)效益。利用現(xiàn)代轉(zhuǎn)基因技術(shù)可望從根本上解決無花果軟

4、化問題，而無花果的組織培養(yǎng)與植株再生是利用生物技術(shù)獲得耐貯運(yùn)無花果研究中的重要一環(huán)。本研究以波姬紅無花果的幼嫩芽體為外植體，對(duì)無花果的組織培養(yǎng)與葉片植株再生進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，以期為通過轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)抑制無花果的軟化奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：1．無花果的初代培養(yǎng)結(jié)果表明，外植體取材時(shí)的氣候條件和消毒方法都與接種的污染率密切相關(guān)，Vc濃度則明顯的影響了無花果接種的褐化率。連續(xù)晴天的天數(shù)越長，染菌率越低，連續(xù)晴天10d以上時(shí)，染菌率為46．2％，與雨后采集和連續(xù)晴天5d采集差異極顯著；抗褐化效果在一定范圍內(nèi)隨著Vc濃度的增高而越發(fā)明顯，當(dāng)其濃度

5、為1500mg／L時(shí)，與Vc濃度為1000mg／L和2000mg／L差異均不顯著，但與Vc濃度為500mg／L時(shí)差異顯著，因此從經(jīng)濟(jì)和效果雙重考慮，選擇Vc濃度為1000～1500m鞏；與0．1％HgCl2消毒8～10min和2％的NaCl0消毒5～7min相比，2％的NaCl0消毒5min+0．1％HgCl2消毒5min能起到較好的消毒效果，染菌率為36．2％，與其它兩種方法差異顯著。2．無花果的繼代培養(yǎng)結(jié)果表明，基礎(chǔ)培養(yǎng)基和激素種類對(duì)芽體分化和幼芽的伸長有很大影響。當(dāng)6-BA濃度為0．5mg／L時(shí)，組培苗太細(xì)弱，不易成活，當(dāng)6-BA濃度為2

6、．0mg／L時(shí)，苗會(huì)出現(xiàn)玻璃化狀態(tài)，也不予以考慮。當(dāng)6-BA濃度為1．5mg／L時(shí)，NAA濃度為O．1mg／L和0．2mg／L時(shí)，苗的增殖率差異不顯著，與其他處理差異均顯著；當(dāng)6-BA濃度為1．0mg／L時(shí)，NAA濃度為0．2mg／L和NAA濃度為O．1mg／L，增殖芽平均高度差異不顯著，和不添加NAA差異顯著。綜合考慮，將初代培養(yǎng)成活后的幼芽接種于MS+6-BA1．5mg／L+NAAO．1～O．2mg／L培養(yǎng)基中，有助于芽體的分化，將幼芽接種于MS+6-BA1．0mg／L+NAA0．1～0．2mg／L培養(yǎng)基中有助于芽體的伸長，兩種培養(yǎng)基交替接

7、種，可得到大量的無菌苗。3．對(duì)無花果葉片愈傷組織的誘導(dǎo)結(jié)果表明，基礎(chǔ)培養(yǎng)基、TDZ濃度、所接種葉片的葉齡、部位、接種方式及切塊大小都對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)有很大影響，將葉齡為30～35d的葉片葉基處4iilm×4into大小的葉塊正放接入含有TDZ1．0～1．5mg／L，NAAO．05mg／L的1／2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基中時(shí)，在葉片內(nèi)部接觸到培養(yǎng)基的部位尤其是葉脈部位以及切口周圍靠近培養(yǎng)基的部位生成大量疏松的愈傷組織，這樣的愈傷組織多為淺綠色，少部分為白色絮狀，活性強(qiáng)。4．對(duì)無花果愈傷組織分化為不定芽的結(jié)果表明，6-BA濃度為愈傷組織能否分化為不定芽的關(guān)鍵

8、。當(dāng)不添加6-BA時(shí)，愈傷組織不分化，只是繼續(xù)增大；6-BA濃度大于6mg／L時(shí)，愈傷組織幾乎不分化，且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，愈傷組織逐漸褐化萬方數(shù)據(jù)死