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《rnai下調(diào)survivin及vegf表達(dá)抑制胰腺癌細(xì)胞增殖、凋亡及血管形成的實驗研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中圖分類號UDC735．9610博士學(xué)位論文學(xué)校代碼密級10533l礬Ai下調(diào)Survivin及VEGF表達(dá)抑制胰腺癌細(xì)胞增殖、凋亡及血管形成的實驗研究EffectsofshRNAtargetedSurvivinandVEGFonproliferation，apoptosisandangiogenesisforhumanDanCreanCcanCercellsJ●ll作者姓名：宋建林學(xué)科專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)研究方向：普通外科學(xué)學(xué)院(系、所)：湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師：李宜雄教授論文答辯日期叫答辯委員會主席中南大學(xué)二零
2、一三年五月一奄一二，平血月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：整牲嘿丑年』月導(dǎo)日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被
3、查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。作者簽名：j婦師簽名妻遜日期：二生d年土月翠日RNAi下調(diào)Survivin及VEGF表達(dá)抑制胰腺癌細(xì)胞增殖、凋亡及血管形成的實驗研究摘要：目的：探討小干擾對蛆(smallinterferingRNA，siRNA)對人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC．1Survivin和／或血管內(nèi)皮生長因子fvascularendot
4、helialgrowthfactor,VEGF)表達(dá)的抑制作用，對胰腺癌細(xì)胞生長、凋亡的影響；并制備相應(yīng)的條件培養(yǎng)基作用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HIⅣEC)，測定抑制人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC．1survivin表達(dá)后條件培養(yǎng)基對內(nèi)皮細(xì)胞生長、凋亡的影響；方法：分別設(shè)計并合成針對Survivin及VEGF的siRNA表達(dá)載體，經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染PANC．1細(xì)胞。實時熒光定量PCR和Western．blot半定量檢測胰腺癌細(xì)胞內(nèi)Survivin和VEGF的表達(dá)情況；采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測轉(zhuǎn)染后PANC．
5、1細(xì)胞的增殖，流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染后PANC．1細(xì)胞的凋亡率；將各組轉(zhuǎn)染后Panc．1細(xì)胞培養(yǎng)液收集，作用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)，四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測HUVEC的增殖，流式細(xì)胞儀檢測HUVEC的凋亡率。結(jié)果：1．成功構(gòu)建4個針對Survivin的載體(Sl、S2、S3、S4)，SurvivinmRNA及蛋白表達(dá)明顯下降，其中載體S4抑制效率最高；抑制Survivin表達(dá)后胰腺癌細(xì)胞Panc．1增殖減慢，細(xì)胞凋亡率增加；同時HUVEC(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)增殖減慢，細(xì)胞凋亡率增加。2．
6、成功構(gòu)建4個針對VEGF的載體(Vl、V2、V3、V4)，VEGFmRNA及蛋白表達(dá)明顯下降，其中載體V3抑制效率最高；抑制VEGF表達(dá)后胰腺癌細(xì)胞Panc．1增殖減慢，細(xì)胞凋亡率增加；同時HUVEC(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)增殖減慢，細(xì)胞凋亡率增加。3．同時抑制Survivin和VEGF表達(dá)后，較對照組及單獨抑制Survivin或VEGF組，胰腺癌細(xì)胞Panc．1增殖顯著減慢，細(xì)胞凋亡率顯著增加；同時HUVEC(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)增殖顯著減慢，細(xì)胞凋亡率顯著增加。結(jié)論：1．靶向Survivin或VEGF的R
7、NAi能夠有效抑制胰腺癌細(xì)II胞Survivin的表達(dá)，抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖，增加胰腺癌細(xì)胞的凋亡，并通過抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，增加血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，抑制腫瘤血管的形成。2．同時靶向Survivin及VEGF的RNAi能夠同時有效抑制胰腺癌細(xì)胞Survivin及VEGF的表達(dá)，較單獨抑制Survivin或VEGF，顯著抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖，增加胰腺癌細(xì)胞的凋亡，并通過抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，顯著增加血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，抑制腫瘤血管的形成。關(guān)鍵詞：Survivin；VEGF；‘RNAi；Panc．1；
8、HUVEC；胰腺癌分類號：735．9IIIEffectsofshRNAtargetedSurvivinandⅦGFonproliferation，apoptosisandangiogenesisforhumanpancreaticcancercellsAbstract：Objective：ToinvestigatetheeffectsofshorthairpinRNA(shRNA)-targetedSurvivinand／orⅦGFinhi
