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《蕪菁花青素生物合成相關(guān)催化酶基因的克隆及uv-a誘導(dǎo)表達(dá)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)UniversityCode：10225RegisterCode：080062DissertationfortheDegreeofMasterCLONINGANDEXPRESSIONOFTHEGENESRELATEDTOANTHOCYANINBIOSYNTHESISINTURNIPCandidate：Supervisor：AssociateSupervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：DateofOralExamination：University：趴眥NProf．Li
2、YuhuaProfXUZhiruMasterofScienceDevelopmentalBiology2008．06NortheastForestry摘要一萬方數(shù)據(jù)植物的色素主要有三大類：甜菜堿類、類胡蘿卜素和花青素類。花青素是存在于植物中的水溶性色素，大約88％的被子植物的花顏色是由花青素決定的?；ㄇ嗨刂饕e累在植物液泡中，具有多種生理功能，例如吸引昆蟲傳粉，抵御低溫和紫外線傷害，以及防治病蟲害、抗氧化衰老等?；ㄇ嗨厣锖铣纱x途徑是類黃酮途徑的一個(gè)分支，其調(diào)控機(jī)制的相關(guān)研究己成為生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一?；ㄇ嗨厣锖铣赏窘?jīng)
3、中有很多重要的催化酶參與，如苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase，PAL)是苯丙烷類代謝第一步反應(yīng)的催化酶：苯基苯乙烯酮黃烷酮異構(gòu)酶(chalcone．flavanoneisomerase，Cm)催化苯基苯乙烯酮發(fā)生分子內(nèi)反應(yīng)；黃烷酮．3．羥化酶(flavanone3-hydroxylase，F(xiàn)3H)可以催化4，5，7．三羥基黃烷酮生成二氫堪非醇。本研究以花青素生物合成依光型津田蕪菁和非依光型赤丸蕪菁為試材，利用RT-PCR方法分別克隆了花青素合成的主要催化酶基因PAL、CHI和F3H的全長cD
4、NA序列。利用兩個(gè)品種間PAL、CHI和F3H基因高度同源序列設(shè)計(jì)引物合成探針。利用UV．-A處理津田蕪菁和赤丸蕪菁未見光塊根0h、6h、12h、18h、24h和48h，通過Northem雜交技術(shù)檢測(cè)PAL、CHI和乃日基因的表達(dá)量變化情況。主要研究結(jié)果如下：(1)津田蕪菁和赤丸蕪菁的PAL全長基因的開放閱讀框(OpenReadingFrame，ORF)均為2169bp，編碼722個(gè)氨基酸，在GenBank中的登錄號(hào)分別為EU402423．1和EU，402424．1。兩種蕪菁PAL基因的核苷酸序列與甘藍(lán)型油菜(Brassic
5、anapus)PAL．J的同源性達(dá)99％，PAL氨基酸序列與甘藍(lán)型油菜PAL的同源性達(dá)99％。從第67到第532的氨基酸序列含有PAL結(jié)構(gòu)域。津田蕪菁和赤丸蕪菁PAL基因的核苷酸序列在9個(gè)位置上存在差異，推導(dǎo)的氨基酸序列在3個(gè)位置上存在差異。津田蕪菁和赤丸蕪菁的CHI全長基因的ORF均為756bp，編碼251個(gè)氨基酸，在G-enBank中的登錄號(hào)為EU402416．1和EU402417．1。兩種蕪菁基因的核替酸序列與蘿卜(Raphanussativus)CHI的同源性達(dá)95％，CHI氨基酸序列與蘿卜CHI的同源性達(dá)91％。從
6、第11到第222的氨基酸序列含有CHI結(jié)構(gòu)域。津田蕪菁和赤丸蕪菁CHI基因的核苷酸序列在3個(gè)位置上存在差異，推導(dǎo)的氨基酸序列在3個(gè)位置上存在差異。津田蕪菁和赤丸蕪菁的F3H全長基因的核苷酸序列完全相同，ORF為1077bp，編碼358個(gè)氨基酸，在GenBank中的登錄號(hào)為EU402422．1。核苷酸序列與甘藍(lán)型油菜(Brassicanapus)F3H-1的同源性達(dá)98％，推導(dǎo)的氨基酸序列與甘藍(lán)型油菜F3H-1的同源性達(dá)99％，從第35到第342的氨基酸序列含有F3H相關(guān)的結(jié)構(gòu)域。(2)Northem雜交結(jié)果表明，IⅣ-A可以
7、誘導(dǎo)津田蕪菁和赤丸蕪菁PAL、CHI和F3H基因的表達(dá)，PAL、CHI和F3H基因的表達(dá)量與I『’譏A處理時(shí)間存在相關(guān)關(guān)系。關(guān)鍵詞蕪菁；花青素；Uv-A；基因克隆；基因表達(dá)萬方數(shù)據(jù)AbstractTherearethreemajorplantcoloringmatters：betaine，carotenoidandanthocyanin,amongwhichaIlmoq詘isawater-solublepigmentwhichpresentsinplantsanddecidestheflowercolorofapproxim
8、ately88％oftheangiosperms．Mainlyaccumulatinginvacuoles，Procyanidinhasavarietyofphysiologicalfunctions，suchaSattractinginsectpollinators，resistingh
