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1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文蠶蛹多糖的提取分離研究姓名:賴泰君申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):化學(xué)工藝指導(dǎo)教師:廖丹葵20090624蠶蛹多糖的提取分離研究摘要蠶蛹(Silkwormpupa)為蠶蛾科昆蟲家蠶蛾(BombyxmoilL.)的蛹,為藥膳同源傳統(tǒng)中藥材,具有很高的營養(yǎng)和藥用價值。蠶蛹多糖是蠶蛹中的主要成分之一,具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用。目前,關(guān)于蠶蛹的研究主要集中在蠶蛹蛋白成分上,而蠶蛹多糖的相關(guān)信息很少,特別是對蠶蛹多糖的提取、分離純化未見任何系統(tǒng)的報道。本文對蠶蛹多糖的提取、分離純化進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,論文主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1.采用苯酚.硫酸
2、法測定蠶蛹多糖含量。2.以蠶蛹為原料,采用傳統(tǒng)熱水浸提法、微波輔助提取法以及超聲波輔助提取法提取蠶蛹多糖,在單因素實驗的基礎(chǔ)上,采用正交設(shè)計對蠶蛹多糖的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。確定傳統(tǒng)水提最佳提取工藝參數(shù):浸提時間10h,溫度100℃,料液比1:10,多糖提取率為93.78%。微波輔助提取最佳提取工藝參數(shù):微波處理時間100min,功率600W,料液比1:15,多糖提取率為80.24%。超聲波輔助提取最佳工藝參數(shù):超聲處理時間40min,功率750W,料液l:l匕l(fā):10,多糖提取率達(dá)至1J95.61%。比較不同提取方法,超聲波輔助法提取蠶蛹多糖效
3、果最好,明顯縮短提取時間,降低能耗,提高蠶蛹多糖提取率。3.采用不同的脫蛋白方法去除蠶蛹粗多糖中的蛋白質(zhì),并對各方法的脫蛋白工藝進(jìn)行了優(yōu)化,以蛋白去除率和多糖損失率為參考指標(biāo)比較最佳參數(shù)下各個方法的脫蛋白效果。實驗結(jié)果表明,木瓜蛋白酶.TCA聯(lián)用法脫蛋白效果較好,在木瓜蛋白酶用量[E]/[S]為0.2%,酶解溫度50℃的條件下酶解反應(yīng)1.5h后,采用TCA法除蛋白一次,蛋白去除率達(dá)至IJ97.98%,多糖損失率為18.76%。4.對蠶蛹多糖進(jìn)行了初步的分離純化。實驗確定了DEAE.SephadexA.25作為分離純化的凝膠,對脫蛋白處理后的蠶
4、蛹多糖進(jìn)行柱層析分離,考察不同洗脫條件對蠶蛹多糖分離效果的影響。在上樣量60mg,洗脫速度O.5mL·min~,O~O.5mol·LJNaCl溶液梯度沈脫的條件下分離蠶蛹多糖得到兩個多糖分級組分PSPI和PSPII,回收率分別為74.06%,23.26%。PSPI中多糖含量為95.39%,PSPII中多糖含量為92.69%。關(guān)鍵詞:蠶蛹多糖提取脫蛋白分離純化IIRESEARCHONTHEEXTRACTIONANDPUIUFICATIONPROCESSOFPOLYSACCHA塒DESFROM&陀K∥DRM尸刪ABSTRACTSilwormpup
5、abelongstofamilybombycidae(BombyxmoilL.).Ithasbeenusedasfoodandtraditionalmedicines.PolysaccharidewhichistheoneofmajorcomponentsofSilkwormpupahasthefunctionofenhancingimmunity.Atpresent,theresearchofSilkwormpupafocusedmainlyonproteinandonlyafewaboutpolysaccharidesfromSilkwo
6、rmpupa(PSP).ThereisnosystemicreportontheresearchofextractionandpurificationofPSEInthispaper,theextraction,isolation,purificationofPSPwasdiscussedinordertolaythefoundationforutilizationandexploitationofPSRThemajorresultswereshownasfollows:1.ThequantifyingofPSPwasdeterminedby
7、thesulphuricacid—phenolmethod.2.TakingSilkwormpupaastherawmaterial,classicalextraction,ultrasonic..a(chǎn)ssistedextractionandmicrowave.-assistedextractionwereemployedduringtheextractionofPSEOnthebasisofsingle—factorexperimentforthepolysaccharidesproduction,orthogonaltestdesignin
8、theextractionmodewasusedforoptimizationtheextractionconditionstogetamiaximumextrac