虎杖化學(xué)成分及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

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1、分類號(hào)：R931.71單位代碼：10193密級(jí)：公開學(xué)號(hào)：2012112碩士學(xué)位論文虎杖化學(xué)成分及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究Researchonchemicalcomponentsandα-glucosidaseinhibitingactivityofHuzhang作者姓名：__________曹揚(yáng)__________學(xué)位類別：醫(yī)學(xué)_____________專業(yè)名稱：生藥學(xué)_____________研究方向：植物藥_____________指導(dǎo)教師：__________田義新教授________________焦連慶研究員____所在學(xué)院：__________中藥材學(xué)院_

2、_________2015年3月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標(biāo)注和致謝所列內(nèi)容外，論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本學(xué)位論文所有內(nèi)容若有不實(shí)之處，本人愿意承擔(dān)一切相關(guān)法律責(zé)任和后果。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明1、本人完全了解吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：研究生在校攻讀學(xué)位期間所

3、完成的論文及相關(guān)成果的知識(shí)產(chǎn)權(quán)屬吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)所有，并同意將本論文的版權(quán)授權(quán)給吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。2、本人（同意/不同意，務(wù)必打印后填寫）吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)將本論文版權(quán)授權(quán)給不同媒體進(jìn)行電子出版、多媒體出版、網(wǎng)絡(luò)出版以及其他形式出版（涉密學(xué)位論文解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）。3、本人聲明畢業(yè)后若發(fā)表在攻讀研究生學(xué)位期間完成的論文及相關(guān)的學(xué)術(shù)成果，必須以吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)作為第一署名單位。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日指導(dǎo)教師簽名：簽字日期：年月日摘要虎杖為蓼科植物虎杖Polygonumc

4、uspidatumSieb.etZucc.的干燥根及根莖，用于祛風(fēng)除濕、清熱解毒、降血降脂等?；⒄戎兄饕休祯?、二苯乙烯、黃酮等成分。其中二苯乙烯類成分和蒽醌類成分含量較大，且藥理活性廣泛?？芍委熖悄虿?，肝病等疾病，白藜蘆醇還有抗氧化、抗癌、抑菌等作用，具有很高的研究?jī)r(jià)值。因此，選擇虎杖作為研究對(duì)象，研究虎杖中抑制α-葡萄糖苷酶活性成分的最佳提取工藝，分離單體化合物，建立一測(cè)多評(píng)法（QAMS）對(duì)不同產(chǎn)地虎杖藥材進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。探索虎杖中總蒽醌含量的測(cè)定方法，研究其體內(nèi)降血糖活性，為虎杖的臨床應(yīng)用提供更多的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。第一，采用正交實(shí)驗(yàn)法，通過多指標(biāo)評(píng)分優(yōu)選虎杖中抑制α-葡萄糖

5、苷酶活性成分的最佳提取工藝。以乙醇濃度、提取次數(shù)、提取時(shí)間、溶劑用量為考察因素，以虎杖苷、大黃素、大黃素甲醚的含量及α-葡萄糖苷酶抑制活力為指標(biāo)進(jìn)行正交試驗(yàn)，確定虎杖中抑制α-糖苷酶活性成分的最佳提取工藝，為研究虎杖中抑制α-葡萄糖苷酶活性的藥效物質(zhì)奠定基礎(chǔ)。最佳提取工藝為：8倍量70%乙醇提取2次，每次2h。說明虎杖苷、大黃素、大黃素甲醚三種化學(xué)成分對(duì)虎杖抑制α-葡萄糖苷酶效果有促進(jìn)作用。第二，按照最佳提取工藝方法提取虎杖藥材，采用不同極性溶劑提取及活性跟蹤，獲得有效部位。用70%乙醇提取虎杖，得到虎杖總提物，再用環(huán)己烷-乙酸乙酯（2:1）及乙酸乙酯進(jìn)行提取，得到環(huán)己烷-

6、乙酸乙酯（2:1）、乙酸乙酯及乙酸乙酯不溶三個(gè)部分。對(duì)虎杖總提物、環(huán)己烷-乙酸乙酯（2:1）、乙酸乙酯和乙酸乙酯不溶這4個(gè)部分進(jìn)行高效液相色譜和α-葡萄糖苷酶抑制活力測(cè)定，各部分均對(duì)α-葡萄糖苷酶有抑制作用，且虎杖總提物部分最佳。第三，經(jīng)過反復(fù)硅膠色譜柱層析和C18填料柱層析，從虎杖總提物中分離純化得到8個(gè)單體化合物，采用核磁共振氫譜及碳譜進(jìn)行結(jié)果分析，同時(shí)通過與文獻(xiàn)報(bào)道比較，鑒定結(jié)構(gòu)為：大黃素、大黃素甲醚、大黃酸、大黃酚、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、虎杖苷和白藜蘆醇。第四，建立利用一個(gè)對(duì)照品同步測(cè)定虎杖藥材中大黃素、大黃素甲醚、

7、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、虎杖苷、白藜蘆醇6種成分的分析方法，并進(jìn)行了方法學(xué)考察。這為虎杖藥材中多種成分的含量測(cè)定提供簡(jiǎn)單，快捷，可靠的方法。以大黃素為內(nèi)參物，建立大黃素與其他5種成分的相對(duì)校正因子及相對(duì)保留時(shí)間，以相對(duì)保留時(shí)間進(jìn)行色譜峰定位，以相對(duì)校正因子計(jì)算其它5種成分的含量，并對(duì)不同產(chǎn)地虎杖藥材中6種成分含量校正因子法的計(jì)算值與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值進(jìn)行比較。結(jié)果表明，一測(cè)多評(píng)法計(jì)算結(jié)果與外標(biāo)法（ESM）測(cè)定值接近，無顯著性差異。說明一測(cè)多評(píng)法測(cè)定虎杖藥材中含量結(jié)果簡(jiǎn)捷、可