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《金龜子綠僵菌內(nèi)生性及對花生生長促進作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、密級論文編號中囯農(nóng)北科學院立論文金龜子綠僵菌內(nèi)生性及對花生生長促進作用EndophytismandGrowth-PromotingofMetarhiziumanisopliaeduringPeanutDevelopment碩士研究生：劉少芳指導教師：農(nóng)向群研究員申請學位類別：農(nóng)學碩士專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究方向：害蟲防治培養(yǎng)單位?.植物保護研究所研究生院2015年5月密級:論文編號:中國農(nóng)業(yè)科學院學位論文金龜子綠僵菌內(nèi)生性及對花生生長促進作用EndophytismandGrowth-PromotingofMetarhiziumanisopliaeduringPean
2、utDevelopment碩士研究生：劉少芳指導教師：農(nóng)向群申請學位類別：農(nóng)學碩士專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究方向：害蟲防治培養(yǎng)單位：植物保護研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationEndophytismandGrowth-PromotingofMetarhiziumanisopliaeduringPeanutDevelopmentM.S.Candidate：LiuShaofangSupervisor：NongXiangqunMajor：AgricuturalEnt
3、omology&PestControlSpecialty:PestControlMay2015摘要金龜子綠僵菌（Metarhiziumanisopliae）用于防治農(nóng)作物害蟲，可與植物發(fā)生相互作用。已發(fā)現(xiàn)綠僵菌對一些植物有促生長作用和內(nèi)生性。為探討綠僵菌在防治花生蠐螬中對花生生長的影響及內(nèi)生性，本文研究了施用綠僵菌對花生早期發(fā)育及整個生長期生長的影響，分析其花生根中的內(nèi)生性，為確定綠僵菌的內(nèi)生定植和定位還構建了egfp工程菌株。主要研究結(jié)果如下：1.綠僵菌對花生種子萌發(fā)和根早期發(fā)育的影響。花生播種時以澆灌和種衣方式施菌，檢測播種后3d內(nèi)種子萌發(fā)率和16d內(nèi)主根長度及側(cè)根
4、數(shù)，同時檢測根際綠僵菌種群數(shù)量。結(jié)果表明，綠僵菌對種子萌發(fā)無影響（P>0.05）；種衣施菌對主根長度、側(cè)根生長無影響（P>0.05），而澆灌施菌的主根長度、側(cè)根數(shù)在4d-10d比對照顯著增加（P<0.05）。兩種施菌處理的根際綠僵菌種群在施菌后初始8d內(nèi)呈現(xiàn)由小幅波動到緩慢下降趨勢，8d-12d內(nèi)明顯下降，斜率分別為0.637和0.268。相關分析表明，澆灌施菌后4d-16d內(nèi)的主根長度與對照的比值、側(cè)根數(shù)與對照的比值均與綠僵菌群數(shù)量顯著相關（P=0.0216，R=0.8273主根根長；P=0.0032，R=0.9213側(cè)根數(shù)量）。說明綠僵菌能促進花生根早期發(fā)育，相比種
5、衣施菌，澆灌施菌是更適宜的施菌方式。2.綠僵菌對花生整個生長期生長的影響。設置花生播種期施菌和初花期施菌處理，每15d檢測株高、株重等11個生長參數(shù)及根際綠僵菌種群數(shù)量。結(jié)果表明，初花期施菌的葉片數(shù)、下針數(shù)、好果數(shù)、地上和根及果干濕重顯著（P<0.05）高于對照，播種期施菌與對照無顯著差異（P>0.05）。相比播種期施菌，初花期施菌的根際綠僵菌有較高的定植率和增殖率，其種群高峰期菌量為初始量1.46倍，且與蠐螬種群高峰期吻合，防治蠐螬效果顯著。播種期施菌的綠僵菌種群高峰期菌量為初始量0.69倍，與蠐螬種群錯峰，防治蠐螬效果明顯低于苗期施菌。因此，綠僵菌對花生生長有促進作
6、用，初花期施菌作用更為顯著，且防治蠐螬效果更好。3.綠僵菌在花生根中內(nèi)生性檢測。根據(jù)菌株ITS序列和標記基因benA3序列，設計并篩選得到2對特異性引物，對目標菌株檢測的靈敏度分別達到1:2000和1:1000。以兩對特異性引物PCR和選擇培養(yǎng)檢測接種的花生根樣品，結(jié)果從苗期施菌75d和90d的根樣品中檢測到特異DNA條帶和目標菌落，證明了綠僵菌在花生根中內(nèi)生定植。4.綠僵菌egfp工程菌株的構建。構建了以egfp為報告基因、苯菌靈抗性基因benA3為標記基因的Camben-eGFP表達載體，通過農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化綠僵菌菌株，經(jīng)PCR和熒光顯微檢測證明egfp基因在轉(zhuǎn)化菌株
7、中成功表達。egfp工程菌株為進一步確定綠僵菌在花生根中定植和定位分布奠定基礎。關鍵詞：金龜子綠僵菌，促生作用，植物內(nèi)生性，綠色熒光蛋白，花生IAbstractMetarhiziumanisopliaecouldinteractwithplantswhenitwasusedforpestcontrolasabiocontrolagent.Ithasbeenreportedpromotingthegrowthofsomeplantsandbeinganendophyte.Theaimofthispaperistoexploretheeffe
