海桿菌耐鹽基因beta和na~+h~+ antiporter的克隆及功能驗(yàn)證

海桿菌耐鹽基因beta和na~+h~+ antiporter的克隆及功能驗(yàn)證

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1、??..::,V',學(xué)校代碼:mm學(xué)校名裕:東北師范大學(xué)012022分類號(hào):公研究生學(xué)號(hào):2110?一東聲畔洽fe畫碩±學(xué)位論文^海巧"唐腑乾基風(fēng)betA和NaVlfantiporter巧免蔭&功能驗(yàn)征CloningandCharacterizationofSaltToleranceGenesbetAand^Na/ltAntiporterofMarinobactersp.Verification.作者;并悅指導(dǎo)教

2、師:巧勁化勘教授一級(jí)學(xué)科:生物學(xué)二級(jí)學(xué)科:巧傳學(xué)研究乂向:植物分子表觀巧傳學(xué)學(xué)位類型:學(xué)術(shù)碩±東北師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)2015年5月學(xué)校代碼:10200學(xué)校名稱:東北師范大學(xué):212102102:值0分類號(hào)_研究生學(xué)號(hào)東批作筵:達(dá)碩±學(xué)位論文+^海締當(dāng)耐證基因beLi和IVa/HantipoWer的克隆及功錐《驗(yàn)證CloninandCharaderizationofSaltToleranceGenesandg+^Na/

3、HAntioiieroft.riRcatipMarinobacerspVe(瓜.作者:井悅指導(dǎo)教師;龐勁松副教授--級(jí)學(xué)科:生物學(xué)二級(jí)學(xué)科:遺傳學(xué)研究方向:植物分子表觀遺傳學(xué)學(xué)位類型;學(xué)術(shù)碩±東北師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)2015年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,。據(jù)我所知,除了文中特別加W標(biāo)注和致謝的地方外論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果,也不包含為獲得東北師范大學(xué)或其他教育

4、機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料一。與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:曰期:學(xué)位論文版巧使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解東北師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:東北師范大學(xué)有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)東北師范大學(xué)可W將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可W采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密

5、后適用本授極書)、、學(xué)位論文作者簽名:m指導(dǎo)教師簽名:'日期;I、;:)〇1化V日期學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向;工作單位;電話:通巧地址:郵編:摘要鹽堿±壤是我國(guó)±地資源的一部分,尤其在中國(guó)的東北部,荒地資源中鹽堿±壤占有很大比例?!廊乐卸嗔康目扇苄喳}溶液會(huì)造成植物細(xì)胞壁兩側(cè)體液滲透壓的不同,使細(xì)胞內(nèi)部不同程度的脫水,從而影響植物生長(zhǎng)甚至死亡。一從我國(guó)內(nèi)蒙古吉蘭泰鹽堿湖王壤樣品中分離得到株中度嗜鹽細(xì)菌菌株,經(jīng)生物學(xué)一6SDNA序一

6、特征和1r列鑒定,是海桿菌屬的個(gè)新種。海軒菌是中度嗜鹽茵的類,海一?桿菌的生長(zhǎng)環(huán)境般在鹽濃度比較高的地區(qū),例如鹽湖等0%12%。1為海桿菌的最適生長(zhǎng)鹽濃度。這個(gè)菌株跟海桿菌其他的種屬的差別比較大,同源性較低,因此我們決定測(cè)定這株海桿菌的新種的全基因組井得到了完整序列。一些耐鹽基因我們希望從這株海竿菌中分離和鑒定。我做了兩部分實(shí)驗(yàn):首先查找+—大腸桿茵E.C0"包含的兩個(gè)耐鹽相關(guān)基因膽堿脫氨酶基因(6化4)和Na/HT逆向轉(zhuǎn)za)運(yùn)蛋白基因(M,通過(guò)基因克隆方法得到了海桿菌

7、中6化4和巧wWw的CDS區(qū)序列,其次,構(gòu)建了耐鹽基因的過(guò)表達(dá)載體,轉(zhuǎn)基閑方法為-^用農(nóng)桿菌侵染法。對(duì)轉(zhuǎn)基因材料用(5〇200mM)的NaCl溶液處理,觀察其生長(zhǎng)情況,+臥驗(yàn)證這些耐鹽相關(guān)基因的功能,6心Va妒an郵oWer基因的擬。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明轉(zhuǎn)和7/南邦的耐鹽能力都有所提高,耐受程度提高到200mM氯化鋼溶液。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果希望能一些理論依據(jù)和候選基因夠?yàn)楹笤谥参锬湍娣矫嫣峁?。關(guān)鍵詞;:擬南芥;海桿菌耐鹽基因IAbstract-SalineatlkaliSO

8、"isoneoftheimortantlandresourceseseciallnthenortheasartpi,pypofChina.Itoccuiesalareroortionofuncultivatedandresources.Thelareexcessofpgplgipsolublesaltsol山ioninthesoilcouldleadtothediferentosmoticpressureamo打

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