豬胸膜肺炎放線桿菌小鼠感染模型的建立及在體內(nèi)移行分布的研究

豬胸膜肺炎放線桿菌小鼠感染模型的建立及在體內(nèi)移行分布的研究

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1、摘要豬傳染性胸膜肺炎(PorcineContagiousPleuropneumonia,PCP)是胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)引起的一種高度傳染性、致死性豬呼吸道傳染病。近年來,規(guī)?;i場的保育豬多發(fā),APP有15個血清型,我國主要有血清1型、血清3型、血清5型和7型,本病的致病機(jī)制尚不明確,為揭示病原感染后各組織臟器的病理變化及體內(nèi)的移行分布規(guī)律,本實(shí)驗(yàn)擬建立豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌病的動物模型。實(shí)驗(yàn)采用豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌7型菌株,通過人工途徑感染實(shí)驗(yàn)動物,探索其對實(shí)驗(yàn)動物的易感

2、性和最佳感染途徑,并利用免疫組化的方法檢測動物感染后,其在模型動物體內(nèi)的移行分布規(guī)律。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明APP-7型菌株對小鼠具有較強(qiáng)的致病性,對小鼠的半數(shù)致死量為76.7×10CFU,篩選出的最佳感染途徑為腹腔注射。通過對小鼠感染后的臨床癥狀、組織器官的病理變化和死亡率等情況觀察,發(fā)現(xiàn)與豬臨床感染本病的表現(xiàn)具有高度的相似性,確定小鼠適合作為豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌感染試驗(yàn)的理想動物模型。免疫組化結(jié)果顯示,細(xì)菌感染小鼠2小時后,小鼠肺臟中能檢測到細(xì)菌存在,感染4小時后,脾臟能檢測到細(xì)菌的存在,隨著感染時間的延長在小鼠肝臟、腎臟、心臟等主要組織器官中相繼

3、監(jiān)測到細(xì)菌的分布,從感染后小鼠體內(nèi)各臟器中再分離的細(xì)菌與攻毒菌株一致。本研究通過感染小鼠試驗(yàn),成功建立了APP-7菌株的小鼠動物模型,探索在細(xì)菌感染小鼠的不同時間后,體內(nèi)各主要組織器官細(xì)菌的分布規(guī)律,揭示了小鼠組織器官內(nèi)細(xì)菌的分布情況與造成動物機(jī)體組織損傷之間的關(guān)系,為進(jìn)一步研究豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的致病機(jī)理,疫苗的研發(fā)以及本病的科學(xué)防治奠定堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:胸膜肺炎放線桿菌;小鼠;免疫組化;動物模型;分布規(guī)律IAbstractPorcineContagiousPleuropneumonia(PCP)isahighlycontagiou

4、sandlethalswinerespiratoryinfectiousdiseasecausedbyActinobacilluspleuropneumoniae(APP).Inrecentyears,thisdiseasehasbeencommonlyfoundinnurserypigswhichareraisedinlargescalefarmsinmostdistrictsofchina.TherehavebeenfifteenserotypesforAPP,themainpopularserotypesareserotype1,serot

5、ype3,serotype5andserotype7inourcountry,thepathogenicmechanismofthisdiseaseisnotclear,inordertorevealthepathologychangesofvariousorganizationsandvisceralorgansafterpathogeninfectionandtherulesoftransitionaldistributioninvivo,thisexperimentplanstoestablishtheanimalmodelofActino

6、bacilluspleuropneumoniaedisease.ExperimentusesActinobacilluspleuropneumoniae7strain,throughartificialmeansofinfectioninexperimentalanimals,exploretheirsusceptibilityandthebestwaytoexperimentalanimals.Theimmunohistochemistrymethodisusedtodetectinfectioninanimalsanditstransitio

7、naldistributioninthemodelanimals.ExperimentalresultsshowthattheAPP-7typestrainhasstrongpathogenicitytomice.Theresultsindicatedthatobviousclinicalsymptomshaveobservedinmiceandthemedianlethal7dose(LD50)was6.7×10CFU.Andfoundthatthebestwayofinfectionwasintraperitonealinjection.By

8、observingtheclinicalsymptomsofmicewhichwereinfected,pathologicalchan

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