foxp3在dc細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響

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1、系，口、考SOOCHOWUNIVERSITY碩士學(xué)位論文po?i'‘?i:y^V'^l;J^-.?'…-:"r::".、{:：r"；-.‘：‘?議義議編纖_論文題目Foxp3在DC細(xì)胞中的表迖及其對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響研究生姓名崔大廣指導(dǎo)教師姓名沈振亞教授專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)胸心血管外科學(xué)研究方向t?肺移植的基礎(chǔ)與臨床研究論文提交日期2015年5月蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或

2、其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：字

3、存和匯編學(xué)位論文，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在年—月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文口論文作者簽名：衣T日期：MiL生導(dǎo)師簽名：期：賺、[JFoxp3在DC細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響牛：??；磲要Foxp3在DC細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響中文摘要目的：不同處理的樹(shù)突狀細(xì)胞?Dendriticcells,DC)胞內(nèi)Foxp3的表達(dá)對(duì)其免疫調(diào)節(jié)作用的影響。方法：提取BABL/C小鼠骨髓，用含有GM-CSF(10ng/ml)和IL-4(10n&'ml)的RPMI-1640培養(yǎng)基誘導(dǎo)生

4、成DC,在此基礎(chǔ)上給予不同的刺激，分組包括，未成熟DC組?immaturedendriticcells,imDC)：5d-iraDC組及MSCs組；成熟DC組?maturedendriticcells,mDC)：ODN1585組，R848組，LPS組。分別檢測(cè)其表型變化及胞內(nèi)Foxp3的表達(dá)。用BABL/C小鼠的DC+C57BL/6小鼠的CD4+T細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，CCK-8檢測(cè)T細(xì)胞的增殖情況；qPCR方法檢測(cè)T細(xì)胞T-bet?GATA-3?RORyt?Foxp3的表達(dá)，CBA檢測(cè)共培養(yǎng)體系上清液中細(xì)胞因子表達(dá)水平，分析DC對(duì)CD4+T

5、細(xì)胞分化的影響。結(jié)果：首先流式細(xì)胞儀檢測(cè)DC表面共刺激分子的表達(dá)結(jié)果顯示5d-imDC及MSCs組表面共刺激分子CD80?CD86的表達(dá)較mDC組?ODN1585組，R848組，LPS組）低，表明5d-imDC及MSCs處理的DC保持了其未成熟性。接著本實(shí)驗(yàn)分別從基因及蛋白水平檢測(cè)DC中Foxp3表達(dá)，結(jié)果顯示imDC胞內(nèi)Foxp3的表達(dá)明顯高于mDC(P<0.05)，各組mDC中表達(dá)的Foxp3無(wú)明顯差異。為了判斷各組DC對(duì)T紜胞的影響，本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了CD4‘T增殖分化情況，增殖結(jié)果顯示：5d-imDC及MSCs~DC能抑制CD4+T細(xì)胞增

6、殖?P<0.05)；而mDC能促進(jìn)CD4+T細(xì)咆増殖（尸<0.05)，分化結(jié)果顯示5d-imDC及MSCs-DC中GATA-3?Foxp3的表達(dá)較其他各組高.表達(dá)的T-bet?RORyt較其他組低，表明imDC可以誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向免疫筅甸性的T飪胞亞型分化，而mDC可以誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向Thl方向分化：最后本實(shí)驗(yàn)檢湧了共培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子表達(dá)，結(jié)果表明5d-imDC及MSCs-DC中IL4?IL-10分泌量其他各mDC組高（尸<0.05)，分泌IFN-Y?TNF-a和IL-17A較其性mDC組低(P<0.05),證明imDC可以誘導(dǎo)

7、CD4+T細(xì)胞向免疫抑制功能的鈿狍分化并且誘導(dǎo)T細(xì)胞分泌更多的免疫抑制性細(xì)胞因子。中文摘要Foxp3在DC細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響結(jié)論：高表達(dá)Foxp3的imDC可以抑制CD4+T的增殖，并且促進(jìn)其向抑炎性的Th2和Treg分化。關(guān)鍵詞：樹(shù)突狀細(xì)胞；Foxp3；免疫耐受。作者：崔大廣指導(dǎo)老師：沈振亞教授IIFoxp3在DC細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用的影響英文摘要TheexpressionofFoxp3inDCcellsanditseffectsontheimmuneregulationAbstractObjective:To

8、exploretherelationbetweentheexpressionofFoxp3inDCandimmuneadjustmentability.Method:Firstl