foxp3調(diào)節(jié)性t細胞在喉癌中的表達及意義

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1、Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞在喉癌中的表達及意義劉昉1李瑞玉1趙苗青2(1福建省立醫(yī)院耳鼻喉科/福建醫(yī)科大學省立臨床醫(yī)學院350001)(2山東省立醫(yī)院病理科)【摘要】目的研究Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞(Foxp3+Treg)在喉鱗狀細胞癌中的表達和臨床病理特征關系。方法采用免疫組織化學方法檢測36例喉鱗狀細胞癌和15例正常喉部組織中Foxp3+Treg的表達,并分析其與臨床病理特征的相關性。結果喉癌組織中Foxp3+Treg表達顯著多于正常組織,差異顯著(P<0.01);低分化組Foxp3+Treg細胞數(shù)

2、明顯高于中高分化組(P<0.01);有頸部淋巴結轉移者Foxp3+Treg細胞數(shù)高于無頸淋巴結轉移者(P<0.05)。結論喉癌組織中Treg細胞增多可能導致腫瘤免疫逃逸,Treg細胞表達受腫瘤相關因素的影響,而其數(shù)量變化可能與喉癌的發(fā)生發(fā)展有直接關系?!娟P鍵詞】TregFoxp3喉癌免疫組織化學【中圖分類號】R730.2【文獻標識碼】A【文章編號】2095-1752(2012)18-0035-02調(diào)節(jié)性T淋巴細胞(Treg)是CD4+T淋巴細胞的分支之一,它可通過抑制各種生理性和病理性免疫反應,包括抑

3、制病原微生物、同種器官移植和腫瘤的細胞免疫等,從而維持著機體的自身免疫耐受和免疫穩(wěn)態(tài)。腫瘤微環(huán)境中的Treg細胞能夠識別腫瘤相關性自身抗原,并能抑制針對腫瘤抗原的T細胞免疫應答,因此Treg細胞在抗腫瘤免疫砬答的免疫抑制和免疫逃逸過程中起著重要作用[1]。頭頸部惡性腫瘤的研究也證實其微環(huán)境可嚴重損害多種免疫細胞,鈕括NK細胞、單核細胞和T淋巴細胞。轉錄因子Foxp3,是目前公認的Treg的特異性分子標志,其基因表達產(chǎn)物可控制CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)的生長、分化和成熟[2]。通過Tre

4、g細胞對抗腫瘤細胞免疫的免疫抑制,F(xiàn)oxp3在腫瘤的發(fā)牛.、發(fā)展中起到重要作用。喉癌是常見的頭頸部惡性腫瘤之一,木研究采用免疫組化方法檢測Foxp3+Treg在喉癌組織中的表達水平及其與患者臨床病理特征的關系,探討Foxp3在喉癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。1材料和方法1.1患者和樣本采集36例標本取自福建省立醫(yī)院耳鼻喉科2008.8-2010.12月行手術切除喉癌患者,其中34例,女2例;年齡45?79歲,平均年齡64歲;腫瘤組織高分化16例,中分化11例,低分化9例;T1?T2期21例,T3?T4期15例

5、;有頸部淋巴結轉移11例,無淋巴結轉移25例。15例對照來源于喉癌患者正常的喉部組織。所有病例均未行放、化療和生物免疫治療,均為首次手術,所有標本經(jīng)病理學診斷證實。標本經(jīng)福爾馬林固定,石蠟包埋,4μm厚連續(xù)切片,常規(guī)H-E染色和免疫組織化學染色。1.2檢測方法1.2.1免疫組織化學染色鼠抗人Foxp3單克隆抗體(Abeam公司);即用型免疫組化超敏SP試劑盒、DAB顯色試劑盒均為福州邁新生物技術公司產(chǎn)品。常規(guī)SP法,每次染色設置陽性(喉癌組織)和陰性對照(PBS代替一抗)。結果判定,陽性細胞形態(tài)

6、完整,結構清晰,棕黃色顆粒特異性定位于細胞核。1.2.2免疫組織化學結果觀察采用雙盲法進行觀察,隨機對每張切片選擇5個高倍視野(400×)計數(shù)陽性細胞數(shù),求其平均值。1.3統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)以x-&plUsmn;S表示,采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析,數(shù)據(jù)進行t檢驗和Spearman等級相關分析,以P<0.05為差異顯著,有統(tǒng)計學意義;P<0.01為差異非常顯著,有統(tǒng)計學意義。2結果(見圖)2.1喉癌組織高表達Foxp3+TregFoxp3+Treg細胞形態(tài)完整,結構明晰,DAB顯

7、色細胞核棕黃色染色,散在分布于腫瘤組織中。腫瘤組織中陽性細胞的平均浸潤數(shù)目(31.40±10.89)高于正常組織(2.70±2.35)P<0.01,差異有統(tǒng)計學意義。2.2喉癌組織Foxp3+Treg表達與臨床病理特征關系對喉癌組織Foxp3+Treg分布與艽臨床病理特征進行分析,結果顯示:低分化組Foxp3+Treg細胞數(shù)(47.89±5.58)顯著高于中分化組(26.72±4.34)和高分化組(25.43±5.56),P<0.0

8、1;中分化組稍高于高分化組,但無統(tǒng)計學差異(圖1、2、3)。Spearman等級相關分析顯示Foxp3+Treg細胞數(shù)與腫瘤細胞分化等級間存在相關(相關系數(shù)0.65,P=0.000)。冇頸部淋巴結轉移者Foxp3+Treg細胞數(shù)(40.4±14.2)高于無頸淋巴結轉移者(27.50±5.98),P<0.05。患者的年齡、病史、腫瘤的原發(fā)部位及腫瘤大小(T)與Foxp3+Treg細胞數(shù)之間的相關性研究未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學意義(表1)。表

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