sirna沉默dad1基因表達對腎癌細胞a498增殖與侵襲能力的影響

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1、分類號Ｒ６９密級公開ＵＤＣ６１０學校代碼１０５５５秦考義拿碩：ｔ學位論文（專業(yè)學位）Ｓ瓜ＮＡ沉默ＤＡＤ１基因表達對腎癌細胞Ａ４９８增殖與侵襲能力的影研究生姓名：韓慶杰指導教師、職稱：吳萬瑞教授合作導師、職稱：專業(yè)學位類別（領域）：臨床醫(yī)學（外科學）研究方向：泌尿外科所在學院：附屬湖南省人民醫(yī)院二〇—五年五月戀冶＃義掌ｓｉＲＮＡ沉默ＤＡＤｌ基因表達對腎癌細胞Ａ４９８增殖與侵襲能力的影響論文作者簽名：拜亂．指導教師

2、簽名？ｔ蛛悚］論文評閱人１：王蔭槐教授碩導中南大學湘雅二民院評閱人２：何樂業(yè)教授博導中南大學湘雅蘭民院評閱人３：答辯委員會主席：楊金瑞教授博導中南大學湘雅二醫(yī)院委員１：湯育新教授博導中南大學湘雅Ｈ民院委員２：劉紫庭教授碩導中南大學湘雅二睽院３一委員：李清副教授碩導南華大學附屬第醫(yī)院委員４導南華大學：譚辟副教授碩委員５：委員６：答辯日期：２０１５年０５月２０日■南華大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文是本乂在導師指導下進行的研

3、究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加Ｗ標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。作者簽名：韓曰Ｗ南華大學學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文是本人在南華大學攻讀（博／碩）±學位期間在導師指導下完成的學位論文。本論文的研究成果歸南華大學所有，本論文的研究內(nèi)容不得Ｗ其它單位的名義

4、發(fā)表。本人同意南華大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即；學校有權(quán)保留學位論文，允許學位論文被查閱和借閱學?？桑坠紝W位論文的全部；或部分內(nèi)容，可Ｗ采用復印、縮印或其它手段保留學位論文；學?？筛鶕?jù)國家或湖南省有關部口規(guī)定送交學位論文。同意學校將論文加入《中國優(yōu)秀博碩±學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并按《中國優(yōu)秀博碩±學位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程》規(guī)定享受相關權(quán)益。同意授權(quán)中國科學信息技術(shù)研究所將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。對于涉密的學位論文，

5、解密后適用該授權(quán)。作者簽名辟掏日誦鐘叩＞＆礦ｓｉＲＮ乂沉默ＤＡＤｌ基因表達對督癌細胞Ａ４９８增殖與侵襲能力的影響摘要；背景：腎癌又稱腎細胞癌（ｒｅｎａｌｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｏｍａ民ＣＣ是成人皆臟）最常見的惡性腫瘤占成人惡性腫瘤２％－３％在男性和女性惡性腫瘤中，分別排第７位和第９位。在全球范圍內(nèi)，每年大約新發(fā)病例２７萬，其中１２萬死亡，在我國，腎癌的發(fā)病率在泌尿系腫瘤中僅次于膀脫癌，并在過去２０年中每年６％速度遞増。病理上腎癌可分為：透明細胞癌、腎郭頭狀癌、嫌

6、色細胞癌、集合管癌及未分化癌。其中透明細胞癌（ｃｌｅａｒｃｅ。ｒｅｎａｌｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａｃｃＲＣＣ）是最常見的病理類型，起源于近－曲小管上皮細胞且易發(fā)生轉(zhuǎn)移占轉(zhuǎn)移性腎癌的８０％８５％。，，腎癌對放療及化療均不敏感，手術(shù)切除仍是目前最佳的治療手段，但術(shù)后復發(fā)率２０％－４０％約為。由于腎癌的化療及放療抵抗性遇此臨床上沒有有效的術(shù)盾治療手段。皆癌作為泌尿科常見疾病，尤其是早期腎癌無特殊、臨床表現(xiàn)，待出現(xiàn)血尿腰痛或腹部包塊時多已是晚期。腎癌對放療、…一化療均不敏感，臨床

7、上般予行腎癌根治性切除術(shù)，但是旦出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，即使行根治性淋己結(jié)清掃術(shù)，患者生存期也極少超過５年，一、若出現(xiàn)肝肺轉(zhuǎn)移或臨近器官浸潤則預后更差，因此摸索出條新的治療方案變的尤為重耍。目前祀向沉默目的基因來治療腫瘤正在被廣大研究者所關注，相關研究顯示沉獸腫瘤細胞中抗調(diào)亡的基因可Ｗ促。使腫瘤細胞大幅度調(diào)亡，起到治療腫瘤的作用Ｉ目的：合成寡糖基轉(zhuǎn)移酶亞基ＤＡＤｌ的ｓｉＲＮＡ序列，觀察其對人Ａ４９８腎癌細胞増殖和侵襲能力的影響。－ＲＮＡ方法：設計合成蘭條ＤＡＤｌｓｉ干擾片段，采用

8、脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染人Ａ４９８腎癌細胞后采用定量ＰＣ民和免疫印跡法檢測轉(zhuǎn)染前后人Ａ４９８腎癌細胞中ＤＡＤ１ｍＲＮＡ和蛋白的表達變化；ＭＴＴ檢測轉(zhuǎn)染前Ａ４９８細ＡＶ－ＰＩ流式細胞Ａ４９８腎后胞增殖能力變化；術(shù)檢測各組人癌細胞轉(zhuǎn)染４化后的調(diào)亡率變化；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ檢測細胞侵襲能力的變化。結(jié)果：定量ＰＣ民及免疫印跡法檢測顯示３《ＳｉＲＮＡ均能有效抑制ＤＡＤ－ｌｍＲＮＡ及Ｐ＜００５ｌＲＮＡｌ蛋白表達