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1、SHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY碩士學(xué)位論文MASTER’STHESIS論文題目：農(nóng)桿菌介導(dǎo)茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究學(xué)科專(zhuān)業(yè)：園藝專(zhuān)業(yè)作者姓名：張國(guó)剛指導(dǎo)老師：劉楊日期:2015年1月上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文農(nóng)桿菌介導(dǎo)茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究碩士研究生：張國(guó)剛學(xué)號(hào)：1121509075導(dǎo)師：劉楊專(zhuān)業(yè)：園藝(專(zhuān)業(yè)學(xué)位)所在單位：農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院答辯日期：2015年1月授予學(xué)位單位：上海交通大學(xué)DissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityfortheDegreeof
2、MasterRESEARCHONEFFICIENTTRANSFORMATIONSYSTEMOFEGGPLANTMEDIATEDBYAGROBACTERIUMAuthor:ZHANGGuogangStudentID:1121509075Supervisor:ViceProf.LIUYangSpecialty:HorticultureDepartment:CollegeofAgricultureandBiologyDateofDefence：Jan.2015Drgree-Conferring-Institution:Shangh
3、aiJiaoTongUniversity上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文農(nóng)桿菌介導(dǎo)茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究摘要茄子(solanummelongnaL.)，茄科茄屬一年生草本植物，是我國(guó)一種重要經(jīng)濟(jì)類(lèi)蔬菜。茄子產(chǎn)量和品質(zhì)容易受到蟲(chóng)害、病害、不良環(huán)境等影響。因此，培育具有抗蟲(chóng)、抗病、抗逆的茄子新品種具有重要意義。常規(guī)的育種方式是品種改良的重要手段，同時(shí)也存在選育年限長(zhǎng)、遠(yuǎn)源雜交不親和及種質(zhì)資源匱乏等問(wèn)題。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育茄子新品種是未來(lái)主要的研究方向。本研究以茄子子葉為外植體材料，探討植物激素NAA、ZT、6-BA的不同濃度與組合對(duì)白撮茄
4、子葉外植體分化的影響、比較不同基因型外植體分化能力、研究硝酸銀在外植體出芽分化中的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，白撮茄愈傷組織分化最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg/L+ZT3.0mg/L，出愈率為97%；誘導(dǎo)芽分化最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg/L+ZT4.0mg/L+6-BA1.5mg/L+AgNO38.0mg/L，出芽率為82%；不同基因型外植體分化能力不同；AgNO3對(duì)外植體芽分化具有促進(jìn)作用；1/2MS培養(yǎng)基生根效果較好，生根率可達(dá)80%。建立了穩(wěn)定的茄子再生體系。本研究還對(duì)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的茄子遺傳轉(zhuǎn)化進(jìn)行了初步探索，篩選抑制非
5、轉(zhuǎn)化外植體的潮霉素濃度、抑制農(nóng)桿菌生長(zhǎng)的特美汀濃度，研究不同預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、菌液濃度、侵染時(shí)間對(duì)外植體轉(zhuǎn)化率的影響。結(jié)果表明：10mg/L的潮霉素可對(duì)外植體抗性芽進(jìn)行有效篩選；150mg/L特美汀可以有效抑制農(nóng)桿菌污染；預(yù)培養(yǎng)2天的外植體分化效果好，轉(zhuǎn)化率為71%；菌液濃度OD600值為0.5時(shí)適宜侵染，轉(zhuǎn)化率為80%；I上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文菌液侵染時(shí)間為10min時(shí)，轉(zhuǎn)化率為76%。GUS染色結(jié)果和分子檢測(cè)初步證明，外源基因已經(jīng)整合到‘白撮茄’基因組中，獲得了8株轉(zhuǎn)化植株。關(guān)鍵詞：茄子，子葉，再生體系，農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化
6、，分子檢測(cè)II上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文ResearchonEfficientTransformationSystemofEggplantMediatedbyAgrobacterium.ABSTRACTEggplant(solanummelongnaL.),annualherbplants,animportanteconomicvegetablesinChina.However,theyieldandqualityofeggplantisvulnerabletodiseases,insectsorotheradverseenv
7、ironment.Therefore,breedingneweggplantvarietiesresistancetoinsects,diseaseshasgreatsignificance.Regularbreedingmethodsandpracticeofeggplantplayanimportantroleinimprovingthenewspecies,atthesametimetherearesomeproblems,likelongbreedingperiod,farsourcehybridincompatib
8、ilityandlackofgermplasmresources.Itisvitalforustoutilizetransgenictechnologytocultivateneweggplant.Usingeggplantcotyledonsasexplants,differentcon
