利用捕獲測(cè)序技術(shù)篩選影響雞血清igy含量的候選基因

利用捕獲測(cè)序技術(shù)篩選影響雞血清igy含量的候選基因

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1、讀赤緊、玲玲玲玲&式錢、.'旅薩1i;一皆府皆>冷苗^巧左、、'-*盧矣巧;處球香零#菩^■衣去?.'^鄭弟為.技心游過(guò)弘樂若祭安>本/^4媛巧叫乂A等手織巧:為?。牐径海ǎ?、它、;?三?^茜皆-^、’..-?*.YANGZHOUUN,:WIVERISTY、^、^J/^^^;壬學(xué)化(學(xué)術(shù)型)"聲.麟夢(mèng)?^:利片捕獲細(xì)序技術(shù)篩選穀響雞血清Y含量的候逸基因-Ig、己峽、?-、’:冷.—/聲;^——劈心續(xù)戶.、點(diǎn)片f言..苗'’、'^’'’叫?-今.曲/:>fV

2、v誠(chéng)磅一荷褒讀^-滬仁如/‘技參哭:六?225009導(dǎo)教師姓名陳國(guó)宏教授,揚(yáng)州大學(xué),江蘇揚(yáng)州,二背'?^U趙桂蘋研究員-,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,北京,100193."、A申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:擊學(xué)科專業(yè)名稱:動(dòng)物遺傳育種與繁殖:._時(shí)每 ̄.'2015;20.論文提交H期:年5月論文答辯日期15年5月23日_____^w-J學(xué)位授予單粒揚(yáng)州欠學(xué)學(xué)位授予日期;戶;2015年6月30日->*''--、-:。一;鄭元林教授?-.答辯委員會(huì)主席:>./每<f,.、*’七;.本地矜端:舍心^巧義^

3、%巧衣冷己,喪,馬^?策巧^方方彎結(jié)蠻興,編凌雑鳥"".....占?之義^二^義、礙誤V蓋父知論文資助項(xiàng)目現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金CARS-42)(項(xiàng)目EarmarkedfundforChinaAgricultureResearchSystem-Grantno.CARS42()劉滿:利用巧獲測(cè)序技術(shù)篩選影響雞血清I巧含量的候選基因[利用捕獲測(cè)序技術(shù)篩選影響雞血清IgY含量的候選基因中文摘要一抗病性狀的功能基因篩選和鑒患直是現(xiàn)代家禽育種研究的熱點(diǎn)。前期研究中,已利

4、用60KSNPBead濁ip技術(shù),通過(guò)全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWA巧篩選到了與雞免疫性狀相關(guān)顯著關(guān)聯(lián)位點(diǎn)及重要區(qū)域,在此基礎(chǔ)上,對(duì)與血清免疫球蛋白YdmmunoglobulinY,IgY)含量顯著相關(guān)的染色體區(qū)域進(jìn)行了重測(cè)序分析。W56日齡北京油雞(樣本數(shù)728只)和白來(lái)航雞(樣本數(shù)525只)為素材,分別選擇IgY含量極高和極低個(gè)體各40個(gè),組成兩品種、高低表型各4個(gè)處理組,每個(gè)處理隨機(jī)等量(lOOng心L)混成分為4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)(池)包含10個(gè)個(gè)體。篩選分布于11,16和19H條染色體上共3.3M的候選目

5、標(biāo)區(qū)域,運(yùn)用捕獲芯片、Solexa高通量測(cè)序等技術(shù)進(jìn)行測(cè)序分析。共獲得單堿基變異35154個(gè),經(jīng)注釋,其中基因型為純合的堿基變異為28862個(gè),雜合的單堿基變異6292個(gè)CDS區(qū)的同義突變SNP1045個(gè),得到,引起氨基酸發(fā)生變化的錯(cuò)義突變有2190個(gè),位于基因上的SNP有18332個(gè)829el位點(diǎn),。篩選到個(gè)Ind其中絕大部分位于mRNA區(qū)域。隨機(jī)挑選四個(gè)基因乃?/M7義公巧防厶^扮PW及乂及以,運(yùn)用PC民-NPSanger法進(jìn)行混池測(cè)序得到24個(gè)S,包含二代測(cè)序結(jié)果中的21個(gè)SNP位點(diǎn),證實(shí)捕獲測(cè)序SNP結(jié)果

6、可靠。對(duì)2個(gè)Indel進(jìn)行驗(yàn)證,其中16號(hào)染色體上公基因上的9個(gè)堿基(CCACTGCCA)的缺失是在兩品種高表型組共有的Indel突變,與捕獲測(cè)序結(jié)果一致。對(duì)公fV基西Indel所在的內(nèi)含子5的多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明,在進(jìn)行捕獲測(cè)序的北京油雞和白來(lái)航雞樣本中,該Inde()l區(qū)域存在蘭種基因型,即野生型9個(gè)堿基全部存在,AA型、突變型巧個(gè)堿基其中蘭個(gè)發(fā)生突變,BB型)、缺失型(9個(gè)堿基全部缺失,CC型),但基巧型IgY均值間呈現(xiàn)AA<BBAA<CC的變化.,但差異并不顯著(P>005),,兩個(gè)品種具有相同的變化

7、趨勢(shì)。在窩度選育的白來(lái)航雞馬立克氏病易感品系B19單倍型(37只)的基因型全部為AA型,抗病品系B21單倍型(34只)的基因型全部為BB型,基因型頻率各為100%。MHC5/7基巧影響1類抗原分子與抗原化結(jié)合的特異性,本研究發(fā)現(xiàn)的9bp堿基的突變可能引起的W變剪接或者基因表達(dá)差異,繼而改變雞血清IgY抗體的生成及馬立克氏病的抗病性。I//關(guān)鍵詞:雞Y含量公MC立克氏?。崳姡谎澹?;捕獲測(cè)序;:馬?揚(yáng)州大學(xué)碩±學(xué)位論文ScreeningCandidateGenesAssociatedwithChicke

8、nSerumIYgContentbyTaretedReseencingqugAbstractThescreeningandidenti行cationoffunctional

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