刺參養(yǎng)殖添加菌的篩選、特性分析及應(yīng)用效果研究

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1、分類號(hào)＾單位代碼：１０１６０２０１２２００６１學(xué)號(hào)：？賽番ｆ後碩壬學(xué)位論文題目、特性分析及應(yīng)用效果：刺參養(yǎng)殖添加菌的躺選研究Ｓｔｕｄｏｎｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｙ，ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｉｎｆｅｅｄｉｎｇｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆＡｐｏｓｔｉｃｈｏｐｕｓａｏｎｉｃｕｓｊｐ硏究生：李麗麗導(dǎo)師：顧英…學(xué)科專業(yè)：糧食油脂及植物蛋白工程３一２０論女課題起止時(shí)間；２０１年３月１５

2、年３月論文完成時(shí)間：２０１５年３月過寧醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加Ｌ乂標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，化不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料一，與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何賈獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處一，本人承擔(dān)巧相關(guān)責(zé)任。論文作者簽?。海壢掌冢海蹋牐崳娺|寧醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人

3、完全了解巧寧醫(yī)學(xué)院有關(guān)保護(hù)知巧產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，目Ｐ：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬巧寧醫(yī)學(xué)院。本人保證畢業(yè)且離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為巧寧醫(yī)學(xué)院，導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為巧寧醫(yī)學(xué)院。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部口或化構(gòu)送交論文的復(fù)印件和撫盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？桑。迊V公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容（保密內(nèi)容除外），Ｌ乂采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽雀：店廟指導(dǎo)教師簽名：度衰喪目錄一、摘要中文論著摘要……………………………………………………………1英文論

4、著摘要……………………………………………………………4二、英文縮略語…………………………………………………………7三、論文前言………………………………………………………………………8實(shí)驗(yàn)材料與方法…………………………………………………………9實(shí)驗(yàn)結(jié)果…………………………………………………………………14討論………………………………………………………………………35結(jié)論………………………………………………………………………38四、本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)…………………………………………40五、參考文獻(xiàn)……………………………………………………………41

5、六、附錄文獻(xiàn)綜述…………………………………………………………………44致謝………………………………………………………………….…..52個(gè)人簡介………………………………………………………………….53·中文論著摘要·刺參養(yǎng)殖添加菌的篩選、特性分析及應(yīng)用效果研究目的通過實(shí)驗(yàn)初步鑒定和篩選對(duì)刺參的免疫酶和消化酶具有作用的益生芽孢桿菌，構(gòu)建提高刺參免疫力、促進(jìn)消化的益生菌劑，為刺參養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展提供理論依據(jù)。方法采用涂布平板法和平板劃線法分離篩選健康刺參養(yǎng)殖池塘和刺參腸道內(nèi)的益生菌株，通過革蘭氏染色、生理生化及菌株的16SrDNA同源分析對(duì)菌株進(jìn)行鑒定。采

6、用分光光度法研究菌株的生長特性。利用淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶選擇培養(yǎng)基篩選產(chǎn)酶菌株。采用刺參急性攻毒試驗(yàn)評(píng)價(jià)5株菌株的安全性。采用刺參飼喂試驗(yàn)，以刺參體腔液中的酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（AKP）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、酚氧化酶（PO）活性、腸道內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性為指標(biāo)，篩選出對(duì)刺參具有刺激作用的菌株。通過正交實(shí)驗(yàn)探索復(fù)合菌株的最佳配比。結(jié)果從遼東灣健康的刺參養(yǎng)殖池塘沉積物和健康刺參腸道中篩選出5株菌株編號(hào)為B1、B2、B4、B6、B7菌株。通過菌落形態(tài)觀察、生理生化特征、革蘭氏染色和16SrDNA同源性分析，確定這5株菌

7、株為芽孢桿菌屬，B1菌株為谷死芽孢桿菌，B2枯草芽孢桿菌、B4為芽孢桿菌，B6菌株為甲基營養(yǎng)化芽孢桿菌，B7菌株為阿氏芽孢桿菌。菌株生長特性、產(chǎn)酶特性結(jié)果表明：B1、B2和B4菌株的適宜生長溫度為20℃~35℃。菌株B6和B7在15℃~35℃內(nèi)長勢(shì)良好；5株菌的生長pH范圍1寬泛，菌株B1、B4和B6的最適pH范圍為6.0~9.0，B2和B7菌株的生長的最適pH范圍為6.0~8.0；菌株B1、B4和B7生長的最適鹽度為3%~7.5%，B2和B6菌株生長的最適鹽度為3%~5%。產(chǎn)酶特性分析結(jié)果表明，5株菌株都產(chǎn)蛋白酶、淀粉酶，只有菌株B1和B7產(chǎn)脂

8、肪酶。通過刺參急性攻毒試驗(yàn)得出5株菌株在終濃度≤1500mg/L范圍內(nèi)，5株菌株是安全的。通過飼喂刺參不同菌株，考察菌株對(duì)刺參的刺激作用