白藜蘆醇上調(diào)人肺泡上皮細(xì)胞sirt1表達(dá)抑制高氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡

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1、中圖分類號(hào)jR285,R392-33,Q255醫(yī),乂謦SICHUANMEDICALUNIVERSITY碩士學(xué)位論文白藜蘆醇上調(diào)人肺泡上皮細(xì)胞SIRT1表達(dá)抑制高氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡脘(系)、所_臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名張舂銫學(xué)科、專業(yè)兒科學(xué)(新生兒專業(yè))導(dǎo)師姓名_蕾立斌教桴二〇—五年四月四川醫(yī)科大學(xué)畢業(yè)碩士研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及發(fā)表承諾書(shū)本人聲明所呈交的學(xué)位論文(已整理成發(fā)表形式)是我個(gè)人在四川醫(yī)科大學(xué)導(dǎo)師指導(dǎo)下,由導(dǎo)師及四川醫(yī)科大學(xué)提供一切科研條件的情況下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加以標(biāo)注

2、和致謝的地方外,不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。其他同志對(duì)本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。在即將畢業(yè)離校之際,本人鄭重承諾:該論文將以四川醫(yī)科大學(xué)的名義發(fā)表(論文作者為研究生及導(dǎo)師,作者所在單位為四川醫(yī)科大學(xué)),并在發(fā)表后立即將發(fā)表論文原件(期刊)寄與導(dǎo)師1冊(cè)。四川醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解四川醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,g卩:四川醫(yī)科大學(xué)有權(quán)保留并向有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交本人學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,允許有關(guān)部門(mén)

3、或機(jī)構(gòu)以電子出版物形式出版發(fā)行’并對(duì)外進(jìn)行全文內(nèi)容服務(wù)。本人授權(quán)四川醫(yī)科大學(xué)可以將本人學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,進(jìn)行數(shù)字化處理匯編、通過(guò)網(wǎng)絡(luò)或其它途徑進(jìn)行交流傳播,可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用影印、縮印、掃描或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文,即四川醫(yī)科大學(xué)具有本人學(xué)位論文的數(shù)字化制品復(fù)制權(quán)、信息網(wǎng)絡(luò)傳播權(quán)和匯編權(quán)。同時(shí)授權(quán)將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)》,并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù):保密□,在..年解密后適用本授權(quán)書(shū)=本人提交的學(xué)位論文屬

4、(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“V”學(xué)位論文年者簽名:賞,之日期年s月卻1四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄1白藜蘆醇上調(diào)人肺泡上皮細(xì)胞SIRT1表達(dá)抑制高氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡…………………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………31.3前言……………………………………………………………61.4材料與方法……………………………………………………81.5結(jié)果……………………………………………………………201.6討論……………

5、………………………………………………361.7結(jié)論……………………………………………………………401.8參考文獻(xiàn)………………………………………………………411.9英漢縮略詞對(duì)照表……………………………………………472致謝……………………………………………………………483沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1(SIRT1)和活性氧(ROS)在氧化應(yīng)激調(diào)控中的相互作用………………………………………49-2-四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文本研究基金來(lái)源:1.中華兒科雜志第二屆雙鶴珂立蘇科研基金(編號(hào):cjp-009)2.四

6、川省教育廳科研項(xiàng)目基金(編號(hào):08ZA150-033)3.四川省衛(wèi)生廳科研基金(編號(hào):110340)4.瀘州市科技局(瀘州市政府-瀘州醫(yī)學(xué)院聯(lián)合專項(xiàng)資金)(編號(hào):2013LZLY-J08)5.四川省科技廳項(xiàng)目(編號(hào):4ZQ010-023)-3-四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文白藜蘆醇上調(diào)人肺泡上皮細(xì)胞SIRT1表達(dá)抑制高氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡摘要目的:探討去乙?;?(SIRT1)氧化應(yīng)激通路介導(dǎo)高氧誘導(dǎo)肺泡上皮細(xì)胞(HPAEpiC細(xì)胞)凋亡的作用,探討其激動(dòng)劑白藜蘆醇(Res)對(duì)高氧誘導(dǎo)肺泡上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。方法

7、:將體外培養(yǎng)的人肺泡上皮細(xì)胞HPAEpiC株作為研究對(duì)象。首先采用MTT法找出最佳Res藥物作用濃度,再將HPAEpiC細(xì)胞隨機(jī)分為三組:對(duì)照組、高氧組、Res組。對(duì)照組:在含10%胎牛血清和1%青鏈霉素的DMEM高糖培養(yǎng)液中常規(guī)培養(yǎng);高氧組:細(xì)胞第一次換上述培養(yǎng)液時(shí)后,通入3L/min的含95%氧氣的高純混合氣,10~15min后置于50ml/LCO2培養(yǎng)箱密閉中培養(yǎng);Res組:第一次換液時(shí)用終濃度為100μmol/L的等量SIRT1誘導(dǎo)劑Res培養(yǎng),隨后通入3L/min的含95%氧氣的高純混合氣,10~

8、15min后置于50ml/LCO2培養(yǎng)箱密閉中培養(yǎng)。培養(yǎng)24小時(shí)后檢測(cè)以下指標(biāo):倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變并照相;采用SP細(xì)胞免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)caspase-9/XIAP/SIRT1蛋白的表達(dá),激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞線粒體內(nèi)活性氧簇及其膜電位的變化,Westernblot檢測(cè)細(xì)胞SIRT1蛋白的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率變化。-4-四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果:(1)MTT法提示,最佳Re

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