植物組培復(fù)習(xí)資料

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1、第一章1、植物組織培養(yǎng)：是指在離體條件下，利用人工培養(yǎng)基對植物的器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體等進(jìn)行培養(yǎng)，使其長成完整植株2、外植體：在植物組織培養(yǎng)中，由活體（invivo）植物上提取下來的、接種在培養(yǎng)基上的無菌細(xì)胞、組織、器官等均稱為外植體。3、愈傷組織：指在人工培養(yǎng)基上由外植體長出來的一團(tuán)無序生長的薄壁細(xì)胞。4、應(yīng)用一、農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用1.種苗快速繁殖(rapidpropagation)2.無病毒苗(virusfree)的培養(yǎng)3.在育種上的應(yīng)用(breeding)（1）倍性育種，縮短育種年限，雜種優(yōu)勢明顯；（2）克服遠(yuǎn)緣雜交的不親合性和不孕性（胚培養(yǎng)）；（3）保存種質(zhì)（4）創(chuàng)造

2、變異二、在遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、組織學(xué)、胚胎學(xué)、基因工程、生物工程等方面的應(yīng)用。用于基因工程技術(shù)創(chuàng)造植物新種質(zhì)。用于植物生長發(fā)育理論研究，包括生理學(xué)、病理學(xué)、胚胎學(xué)和細(xì)胞與分子生物學(xué)等。三、利用組織培養(yǎng)材料作為植物生物反應(yīng)器第二章1、細(xì)胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的細(xì)胞核的植物細(xì)胞都擁有形成一個完整植株所必須的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的能力。2、細(xì)胞分化（celldifferentiation）：指導(dǎo)致細(xì)胞形成不同結(jié)構(gòu)，引起功能或潛在的發(fā)育方式改變的過程。3、脫分化（Dedifferentiation）：指離體條件下生長的細(xì)胞、組織或器官

3、逐漸失去原來的結(jié)構(gòu)和功能而恢復(fù)分生狀態(tài)，形成無組織結(jié)構(gòu)細(xì)胞團(tuán)或愈傷組織的過程。4、再分化（Redifferentiation）：指脫分化的細(xì)胞重新恢復(fù)分化能力，形成具有特定結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)胞、組織、器官甚至植株的過程。5、植物組織培養(yǎng)中常遇到的問題以及解決措施一、污染及防治：1、真菌污染后，如果已形成孢子，則必須經(jīng)高壓滅菌后扔掉。但若是細(xì)菌污染，只要及時發(fā)現(xiàn)，將材料上部未感菌的部分剪下轉(zhuǎn)接，材料仍可使用。~1/15~2、用抗生素等殺菌藥劑的處理，會影響植物材料正常生長。二、褐變及防止（1）選擇合適的外植體（2）合適的培養(yǎng)條件（3）使用抗氧化劑16/16（4）連續(xù)轉(zhuǎn)移三、玻璃化

4、問題及其防止（1）增加培養(yǎng)基溶質(zhì)水平，降低培養(yǎng)基水勢；（2）減少培養(yǎng)基含氮化合物用量；（3）增加光照；（4）增加容器通風(fēng)，進(jìn)行CO2施肥，對減輕試管苗玻璃化現(xiàn)象有明顯作用；（5）降低培養(yǎng)溫度，進(jìn)行變溫培養(yǎng)，有助于減輕試管苗玻璃化現(xiàn)象發(fā)生；（6）降低培養(yǎng)基細(xì)胞分裂素含量，加入適量脫落酸。四、其他問題和解決措施（一）初始培養(yǎng)階段：1、培養(yǎng)物水浸狀、變色、壞死、莖斷面干枯改進(jìn)措施：調(diào)換其他殺菌劑或降低濃度，縮短消毒時間；試用其他部位，生長初期取材。2、長期培養(yǎng)培養(yǎng)物幾乎無反應(yīng)改進(jìn)措施：更換基本培養(yǎng)基或調(diào)整培養(yǎng)基成分，尤其是調(diào)整鹽離子濃度，增加生長素用量，試用2,4-D，調(diào)整培養(yǎng)溫

5、度。3、愈傷組織生長過旺、疏松，后期水浸狀改進(jìn)措施：減少激素用量，適當(dāng)降低培養(yǎng)溫度，調(diào)整無機(jī)鹽（尤其是銨鹽）含量，適當(dāng)提高瓊脂用量增加培養(yǎng)基硬度。4、愈傷組織太緊密、平滑或突起，粗厚，生長緩慢改進(jìn)措施：減少細(xì)胞分裂素用量，調(diào)整細(xì)胞分裂素與生長素比例，降低糖濃度。5、側(cè)芽不萌發(fā)，皮層過于膨大，皮孔長出愈傷組織改進(jìn)措施：減少激素用量，采用較老化枝條。（二）繼代培養(yǎng)階段1、苗分化量少、速度慢、分枝少、個別苗細(xì)高改進(jìn)措施：增加細(xì)胞分裂素，降低溫度，改善光照，改單芽繼代為團(tuán)塊（叢芽）繼代。2、苗分化過多，生長慢，畸形，節(jié)間極短，苗叢密集，微型化改進(jìn)措施：減少或停用細(xì)胞分裂素一段時間，

6、調(diào)節(jié)溫度。3、分化率低，畸形，培養(yǎng)時間長時苗再次愈傷組織化改進(jìn)措施：減少生長素用量，適當(dāng)降溫。4、葉粗厚變脆改進(jìn)措施：減少激素用量，避免葉片接觸培養(yǎng)基。5、再生苗的葉緣、葉面等處偶有不定芽分化出來改進(jìn)措施：適當(dāng)減少細(xì)胞分裂素，或分階段地利用這一再生方式。~2/15~6、叢生苗過于細(xì)弱，不適于生根或移栽16/16改進(jìn)措施：減少細(xì)胞分裂素，免用赤霉素，延長光照時間，增強(qiáng)光照，及時轉(zhuǎn)接，降低接種密度。7、幼苗淡綠，部分失綠改進(jìn)措施：針對營養(yǎng)元素虧缺情況調(diào)整培養(yǎng)基，調(diào)好PH值，調(diào)控溫度、光照。8、幼苗生長無力、發(fā)黃落葉、有黃葉、死苗夾于叢生苗中改進(jìn)措施：及時轉(zhuǎn)接、降低密度，調(diào)整激素

7、配比和營養(yǎng)元素濃度，改善瓶內(nèi)氣體狀況，控制溫度。（三）生根階段1、久不生根，基部切口無適宜愈傷組織改進(jìn)措施：選用適宜的生長素或增加生長素用量，適當(dāng)降低無機(jī)鹽濃度。2、愈傷組織生長過快、過大，根莖部腫脹或畸形，幾條根并聯(lián)或愈合。改進(jìn)措施：調(diào)換生長素種類或幾種生長素配合使用，降低濃度，附加VB2或PG等減少愈傷等。6、操作技術(shù)一、洗滌技術(shù)1、玻璃器皿洗滌已用過的玻璃器皿2、塑料用品洗滌晾干備用3、金屬用品洗滌擦干二、滅菌技術(shù)1、滅菌（1）培養(yǎng)基滅菌：高溫高壓濕熱滅菌法（2）玻璃器皿滅菌：蒸汽高壓消毒滅菌干熱消毒滅菌。（