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1、分類(lèi)號(hào)：密級(jí)：學(xué)校代碼：學(xué)號(hào)：10165201011026逢掌研耗大學(xué)碩士學(xué)位論文⑨肽類(lèi)陽(yáng)離子類(lèi)脂的合成及生物作者姓名：學(xué)科、專(zhuān)業(yè)：研究方向：導(dǎo)師姓名：性能研究陳美玲化學(xué)、有機(jī)化學(xué)有機(jī)合成于世鈞教授張樹(shù)彪教授2013年4月學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人承諾：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所取得的研究成果。論文中除特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含他人和其他機(jī)構(gòu)已經(jīng)撰寫(xiě)或發(fā)表過(guò)的研究成果，其他同志的研究成果對(duì)本人的啟示和所提供的幫助，均已在論文中做了明確的聲明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：途差．絲：學(xué)位論文版權(quán)的使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作
2、者完全了解遼寧師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，及學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交復(fù)印件或磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。本文授權(quán)遼寧師范大學(xué)，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)并進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，并且本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學(xué)位論文在解密后使用本授權(quán)書(shū)。學(xué)位論文作者簽名：璺禾乏遂指導(dǎo)教師簽名：簽名日期：1明>年0月‘同遼寧師范大學(xué)碩十學(xué)位論文摘要基因治療的關(guān)鍵就是選擇安全有效的載體，非病毒載體因毒性低，生物相容性好，制備容易等一些優(yōu)點(diǎn)，逐漸取
3、代病毒載體，具有廣闊的應(yīng)用前景。本文設(shè)計(jì)合成了兩個(gè)肽類(lèi)陽(yáng)離子類(lèi)脂，其極性頭部分別為甘氨酸和甘氨酸二肽，產(chǎn)品重結(jié)晶后，經(jīng)過(guò)ESI．MS、1HNMR、13CNMR、IR和LC表征，結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確，純度較高，可以滿足基因轉(zhuǎn)染。將所合成的類(lèi)脂制成陽(yáng)離子脂質(zhì)體，通過(guò)透射電鏡分析檢測(cè)，脂質(zhì)體分布較均勻，粒徑大小分布在50．200nm之間，可應(yīng)用于基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。通過(guò)延滯實(shí)驗(yàn)考察脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力，結(jié)果表明，脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力隨著脂質(zhì)體／DNAL匕例的增大而增加；極性頭部為甘氨酸二肽的陽(yáng)離子脂質(zhì)體與DNA結(jié)合能力強(qiáng)于頭部為氨基酸的陽(yáng)離子脂
4、質(zhì)體；助類(lèi)]指DOPE的加入可以提高脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力。利用所制備的陽(yáng)離子脂質(zhì)體作為基因運(yùn)載工具，轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)粒pGFP—N2，對(duì)Hep一2細(xì)胞株進(jìn)行了體外轉(zhuǎn)染，研究了肽類(lèi)陽(yáng)離子類(lèi)脂結(jié)構(gòu)與其轉(zhuǎn)染效率之間的關(guān)系。結(jié)果表明，脂質(zhì)體與DNA的比例為4／1．6／1之間轉(zhuǎn)染效率較高：二肽頭部的脂質(zhì)體比甘氨酸頭部的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率更好；助類(lèi)J]旨DOPE的加入可使脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率提高。本文將為新結(jié)構(gòu)陽(yáng)離子類(lèi)脂的研究提供參考和思路。關(guān)鍵詞：非病毒基因載體；陽(yáng)離子類(lèi)脂；陽(yáng)離子脂質(zhì)體；脂質(zhì)體／DNA復(fù)合物；體外轉(zhuǎn)染肽類(lèi)陽(yáng)離子類(lèi)脂的合成及生物性能研究
5、SynthesisandbiologicalpropertiesofpeptidedlipidsAbstractAsafeandeffectivecarrierplaysakeyroleingenetherapy．Non-viralvectorsaregraduallyreplacingviralvectorsastheyhavetheadvantagessuchaslowtoxicity，biocompatibilityandeasypreparation．Theyhaveapromisingperspectiveforapp
6、lication．TwocationiclipidsweresynthesizedinthisPaper，afterseparationandpurificationusingrecrystallization，targetlipids“tllhighpuritywereobtained．AllthestructuresoftargetlipidswerecharacterizedbyESI．MS，IR，1HNMRand13CNMR．TherequiredpurityoftransfeetioniStestedbyESI．MSa
7、ndHPLC．CationicliposomeshavebeenmadefromcationiclipidsthroughblowingfilmwithN2．Theparticleswerewell．distributedintherangeof50．200nnlfromtransmissionelectronmicroscopy．Gelelectrophoresisofcationiclipid／DINAcomplexesWasusedtoassesstherelativebindingcapabilityofDNAtolip
8、osomesandthefollowingresultswereobtained．Lipidwhichhadaglycinedi-peptideshowingbetterbindingcapabilitythanthathadaglycineasthepolar
