油茶枯餅中皂甙的提取純化及分析新方法研究

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1、摘要茶皂素是一類(lèi)齊墩果烷型三萜類(lèi)皂甙,是一種性能優(yōu)良的天然非離子型表面活性劑,具有抗菌消炎、殺滅病毒、抗氧化、抗高血壓、抑制酒精吸收保護(hù)腸胃以及殺蟲(chóng)驅(qū)蟲(chóng)等功能,因此,開(kāi)發(fā)利用這一資源有著重要意義。本論文以油茶餅粕為原料,研究了油茶餅粕中茶皂素的提取、分離純化工藝及茶皂素的定量分析新方法,并對(duì)油茶皂素的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究。主要研究成果如下:應(yīng)用具有控壓和控溫的密閉微波萃取裝置對(duì)油茶枯餅中茶皂素進(jìn)行微波萃取研究,討論了乙醇濃度、固液比、提取時(shí)間和提取溫度對(duì)提取率的影響。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn),得出微波輔助提取茶

2、皂素的最佳工藝條件為萃取劑乙醇-水(9:1,V:V)溶液、固液比1:20(W/V)、萃取時(shí)間9min和萃取溫度90℃。并與乙醇溶劑回流提取方法相比較,微波萃取不僅大大縮短提取時(shí)間,而且提高了茶皂素得率和純度。建立了毛細(xì)管電泳測(cè)定茶皂素含量的定量分析新方法,并用此方法考察測(cè)定了油茶枯餅和不同濃度乙醇水溶液洗脫大孔樹(shù)脂流出組分中的茶皂素含量。采用毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜法,考察了不同濃度乙醇水溶液洗脫大孔樹(shù)脂對(duì)油茶皂甙的提純效果,在高濃度的緩沖溶液中首次成功一次性分離出8種以上的油茶皂甙峰。應(yīng)用優(yōu)化的高效液

3、相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)茶皂素對(duì)照品進(jìn)行分析,較好地分離出了28個(gè)茶皂素峰。在負(fù)離子檢測(cè)模式下,由電噴霧質(zhì)譜得到各成分的準(zhǔn)分子離子峰,再根據(jù)二級(jí)多反應(yīng)檢測(cè)獲得進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)信息,大致推測(cè)出其中18種主要成分的可能結(jié)構(gòu)。采用分子印跡技術(shù)制備了槲皮素分子印跡聚合物,并通過(guò)裝入固相萃取柱試驗(yàn)了聚合物對(duì)槲皮素的選擇性能,研究了槲皮素在柱上的保留行為。結(jié)果表明槲皮素印跡聚合物對(duì)槲皮素有特異選擇性吸附,實(shí)現(xiàn)了實(shí)際樣品金銀花中槲皮素的分離與富集。該印跡聚合物可望用于油茶枯餅中茶皂素的純化工藝。關(guān)鍵詞:茶皂素;微波輔

4、助萃??;毛細(xì)管電泳;高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用;大孔樹(shù)脂;分子印跡聚合物IAbstractTheasaponinisakindofoleanene-typetriterpenesaponinandnaturalnon-ionicsurfaceactiveagentwithgoodpharmacologyfunctions,suchasantigungi,antiinflammation,antivirus,antioxidant,antihypertension,alcoholabsorbinginh

5、ibition-protectgastrointestinalandinsecticide,soit’snecessarytogivemorestudyoncakeofcamelliaoleiferaseeds.Inthisdissertation,thetechniquesofextracting,separating,andpurifyingtheasaponinwereinvestigated,onenewmethodwhichwassuitableforquantitativedevelo

6、ped.Theasaponin’sstructurewasalsostudied.Usinganairtightmicrowave-assistedextractionapparatuswithpressureandtemperaturecontrollingdevice,amicrowave-assistedextractionprocedurewasdevelopedforteasaponinfromcakeofcamelliaoleiferaseeds.Theeffectsofethanol

7、solventconcentration,theratioofsampleweighttosolventvolume,themicrowaveradiationtimeandtemperaturewereinvestigated.Theoptimumconditionsofextractionobtainedbyorthogonalexperimentsshowasfollows:volumeratioofethanoltowaterinextractionsolventis9:1,20times

8、volumetosampleweight,radiationtime9minandmicrowavetemperature90℃.Comparedwithalcoholrefluxingextraction,microwave-assistedextractionforteasaponinwasarapidmethodwithahigheryieldandhigherpurity.Wedevelopedacapillaryelectrophoresismethodforquanti

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