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1、乳酸菌的篩選及應用鄒遠強2010年7月12日7/22/20211乳酸菌的分類乳酸菌的篩選乳酸菌的應用7/22/20212第一部分、乳酸菌的分類指發(fā)酵糖類主要產物為乳酸的一類無芽孢、革蘭氏染色陽性細菌；分為18個屬，共有200多種；大部分是人體內必不可少的且具有重要生理功能的菌群，其廣泛存在于人體的腸道中。一、乳酸菌7/22/20213二、乳酸菌的分類運動性：通常不運動，有的能夠運動,具有周生鞭毛。營養(yǎng)類型：化能異氧型需氧情況：微好氧性1、乳桿菌屬（Lactobacillus）形態(tài)：細胞呈長或細長桿狀、彎曲形短桿狀,一般成鏈狀排列7/22/20214形態(tài)：細胞呈球
2、形或卵圓形，成對或成鏈排列運動性：一般不遠動營養(yǎng)類型：化能異養(yǎng)型需氧情況：兼性厭氧型2、鏈球菌屬（Streptococcus）7/22/20215形態(tài)：細胞球形或豆狀，成對或成鏈排列運行性：不運動營養(yǎng)類型：化能異養(yǎng)型需氧情況：兼性厭氧型3、明串珠菌屬（Leuconostoc）7/22/20216形態(tài)：細胞呈多樣形態(tài)：Y字形、V字形、彎曲狀、勺形，典形形態(tài)為分叉桿菌運行性：不運動營養(yǎng)類型：化能異養(yǎng)型需氧情況：專性厭氧4、雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）7/22/20217形態(tài)：細胞球形，成對或四聯(lián)狀排列運行性：不運動營養(yǎng)類型：化能異養(yǎng)型需氧情況：兼性厭
3、氧5、片球菌屬（Pediococcus）7/22/20218第二部分、乳酸菌的篩選乳酸菌絕大多數(shù)都是厭氧菌或兼性厭氧的化能營養(yǎng)菌。生長繁殖于厭氧或微好氧、礦物質和有機營養(yǎng)物豐富的環(huán)境中。具體如下：（1）與動物相關分布：乳汁、消化道、糞便等；（2）與植物相關分布：花蜜、樹液、植物殘骸、果實損傷部位等；（3）發(fā)酵食品：泡菜、醬油、發(fā)酵肉制品等；（4）乳酸飲料：酸奶等。一、乳酸菌的分布7/22/20219（一）溶鈣圈法利用一些產酸類細菌在含CaCO3的培養(yǎng)基上產生CaCO3溶解圈，從而篩選出這些產酸類細菌，可用于乳酸菌的篩選。其中培養(yǎng)基中加入CaCO3的作用是：①鑒別
4、能產生酸的細菌；②中和產生的酸，以維持培養(yǎng)基的PH。二、篩選方法7/22/2021101、乳酸菌篩選培養(yǎng)基（MRS培養(yǎng)基）配方（1L）:蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母提取物5.0g，K2HPO42.0g，檸檬酸三銨2.0g，乙酸鈉5.0g，葡萄糖20.0g，吐溫801.0mL，MgSO4·7H2O0.5g，MnSO4·4H2O0.25g配制：1.調PH至6.2～6.4；2.稱取20gCaCO3加入到100mL蒸餾水中，制成CaCO3乳濁液；3.將MRS培養(yǎng)基和CaCO3乳濁液分開滅菌；4.倒平板前，待培養(yǎng)基融化冷卻后，平板上加入一定量的CaCO3乳濁液
5、，晾干了以后再接種。7/22/202111樣品預處理→梯度稀釋至10-6→選擇合適的稀釋度涂布→37℃培養(yǎng)48h→挑選產生溶鈣圈的菌落反復在MRS培養(yǎng)基上劃線→挑起單菌落染色，經鏡檢確認為純種→挑選革蘭氏陽性單菌落→試管穿刺4℃冰箱保存。2、篩選過程7/22/202112（二）溴甲酚綠指示劑法1、培養(yǎng)基：MRS培養(yǎng)基（含溴甲酚綠酒精溶液）2、篩選過程：同上，不同之處是稀釋涂布后長出菌落，挑取使溴甲酚綠變色的菌落。7/22/202113（三）幾種乳酸菌篩選舉例樣品來源：市售酸奶培養(yǎng)基：M17改良培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度：42℃需氧情況：兼性厭氧篩選方法：常規(guī)的稀釋涂布和劃線
6、分離1、嗜熱鏈球菌7/22/2021142、保加利亞乳桿菌樣品來源：市售酸奶培養(yǎng)基：牛肉浸膏1.5％，酵母浸膏0.5％，葡萄糖3.0％，檸檬酸三銨0.2％，七水硫酸鎂0.02％，瓊脂1.5％，pH5.1。培養(yǎng)溫度：42℃需氧情況：兼性厭氧篩選方法：常規(guī)的稀釋涂布和劃線分離法7/22/202115樣品來源：嬰兒新鮮糞便培養(yǎng)基：MRS培養(yǎng)基、NPNL培養(yǎng)基、TYP培養(yǎng)基、PTYG培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度：37℃需氧情況：嚴格厭氧篩選方法：常規(guī)的稀釋涂布和劃線分離法3、雙歧桿菌7/22/202116第三部分、乳酸菌的應用一、乳酸菌的生理功能①維持腸道菌群的微生態(tài)平衡；②增強機體
7、免疫功能；③預防和抑制腫瘤發(fā)生；④提高營養(yǎng)利用率、促進營養(yǎng)吸收；⑤控制內毒素、降低膽固醇；⑥延緩機體衰老。7/22/202117二、乳酸菌的應用1、乳酸菌在食品、飲料中的應用（1）酸奶；（2）乳酸飲料；（3）釀造調味品中的應用；（4）功能性食品的開發(fā)；（5）防腐、保鮮；（6）肉制品加工；（7）腌漬物等。7/22/2021182、乳酸菌在醫(yī)藥中的應用（1）乳酸菌素；（2）γ-氨基丁酸(GABA)7/22/2021193、開發(fā)可降解的聚乳酸塑料7/22/202120（1）聚乳酸（PLA）簡介聚乳酸是以微生物發(fā)酵產物乳酸為單體用化學合成方法聚合而成的一種高分子材料，它
8、無毒、無刺激性。聚乳酸制
