月季丁香酚合成酶基因的克隆及其表達(dá)分析

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1、園藝學(xué)報(bào)2012,39(7):1387–1394http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com月季(Rosachinensis)丁香酚合成酶基因RcEGS1的克隆及其表達(dá)分析1,2222222王海萍,晏慧君,張顥,蹇洪英,王其剛,邱顯欽,李淑斌,21,2,*周寧寧,唐開(kāi)學(xué)12(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院,武漢430070;云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所,云南省花卉育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,昆明650205)摘要:根據(jù)GenBank發(fā)表的丁香酚合成酶(EGS)基因的蛋白保守序列設(shè)計(jì)引物,利用RT-PCR結(jié)合R

2、ACE-PCR技術(shù),從古老月季(Rosachinensis)品種‘月月粉’盛開(kāi)期的花瓣中獲得了1個(gè)新的丁香酚合成酶基因RcEGS1,GenBank登錄號(hào)為JQ522949。該基因全長(zhǎng)為1171bp,開(kāi)放閱讀框(ORF)951bp,編碼317個(gè)氨基酸;蛋白質(zhì)理論分子量為35.64kD,等電點(diǎn)為7.36。氨基酸同源性分析表明,RcEGS1與矮牽牛PhIGS1的氨基酸同源性達(dá)到70%,與羅勒ObEGS1的同源性為59%,與月季RhEGS1的同源性?xún)H為48.2%。運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法分析RcEGS1在不同組織部位和不同開(kāi)放時(shí)期花瓣中的表達(dá),發(fā)現(xiàn)其在葉片和莖段中沒(méi)有表達(dá),在花瓣和萼片中有表

3、達(dá),在盛開(kāi)期的花瓣中表達(dá)量最高。關(guān)鍵詞:月季;花香;丁香酚合成酶基因;實(shí)時(shí)定量PCR中圖分類(lèi)號(hào):S685.12文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0513-353X(2012)07-1387-08CloningandExpressionAnalysisofEugenolSynthaseGeneRcEGS1inRosachinensis‘Pallida’1,222222WANGHai-ping,YANHui-jun,ZHANGHao,JIANHong-ying,WANGQi-gang,QIUXian-qin,221,2,*LIShu-bin,ZHOUNing-ning,andTANGKai-xue

4、12(CollegeofHorticultureandForestrySciences,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,China;YunnanFlowerBreedingKeyLab,F(xiàn)lowerResearchInstitute,YunnanAcademyofAgriculturalSciences,Kunming650205,China)Abstract:UsingPCRdegenerateprimersdesignedbasedonGenBankpublishedtheconservedproteinsequencesof

5、eugenolsynthasegenestoamplifycDNAfragmentsbyRT-PCRandRACE-PCR,aneweugenolsynthasegenenamedRcEGS1wasclonedfromtheflowerpetalofRosachinensis‘Pallida’,anditsGenBankaccessionnumberisJQ522949.ThefullcDNAwas1171bpinlengthwithanopenreadingframe(ORF)of951bpencodingaproteinof317aminoacids.Molecularweigh

6、tandisoelectricpointoftheproteinwas35.64kDand7.36,respectively.AminoacidshomologyanalysisindicatedthattheRcEGS1andRhEGS1proteinsare47.7%identicaltoeachother,andhad70%and59%homologieswithCbEGS2inClarkiabreweriandPhEGS1inPetuniahybirida,respectively.TheexpressionprofileofRcEGS1indifferenttissuesa

7、nddifferentdevelopmentalstagesofroseflowerwasanalyzedbyquantitative收稿日期:2012–02–07;修回日期:2012–05–11基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31060268);云南省青年基金項(xiàng)目(2010CD097);云南省科技創(chuàng)新強(qiáng)省計(jì)劃項(xiàng)目(2007C0004Z)*通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:kxtang@hotmail.com)1388園

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