肉雞沙門氏菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)_王傲雪 (1)

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1、中國畜牧獸醫(yī)２０１３年第４０卷第７期疾病防治·１６７·肉雞沙門氏菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)王傲雪１，２，張凌云２，張桉潮３，李昆鵬２．４，張秀麗２，梁晚?xiàng)鳎?，張林波２（１．延邊大學(xué)，吉林延吉１３３０００；２．吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，吉林長春１３０１１８；３．吉林正大實(shí)業(yè)有限公司，吉林長春１３００３３；４．中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京１００１９３）摘要：為了解吉林省某地雞源性沙門氏菌的感染及耐藥情況，對該地７個(gè)肉雞場１５０份病雞組織樣品進(jìn)行細(xì)菌分離，并進(jìn)行了血凝試驗(yàn)、致病性試驗(yàn)和藥敏試驗(yàn)。分離得到２６株沙

2、門氏菌，經(jīng)血凝鑒定有１９株呈陽性，其中５株呈強(qiáng)陽性并均能使雛雞致死。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，該５株沙門氏菌對頭孢噻肟較為敏感；對氨芐西林、替米考星、林可霉素、阿奇霉素和頭孢拉定表現(xiàn)出極高的耐藥性，耐藥率高達(dá)１００％；諾氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、強(qiáng)力霉素和氯霉素５種臨床用藥與痢菌凈不具有協(xié)同或累加作用。試驗(yàn)結(jié)果表明，沙門氏菌是危害該地肉雞養(yǎng)殖場的主要病原菌之一，且耐藥性十分嚴(yán)重。關(guān)鍵詞：沙門氏菌；分離鑒定；藥敏試驗(yàn)中圖分類號：Ｓ８５２．６１＋４文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：１６７１－７２３６（２０１３）０７－０

3、１６７－０４禽沙門氏菌?。ǎ幔觯椋幔睿螅幔欤恚铮睿幔欤欤铮螅椋螅┦怯桑狈N限公司?；蚨喾N沙門氏菌引起的禽類急性或慢性傳染病的總１．１．３沙門氏菌屬診斷血清沙門氏菌Ａ～Ｆ群稱，已被國際獸疫局列為Ｂ類傳染?。纬伤?，“Ｏ”多價(jià)診斷血清購于中國生物技術(shù)集團(tuán)公司蘭州２０１０）。沙門氏菌是影響食品安全的致病菌之一，廣生物制品研究所，批號：２０１００１０１。泛存在于自然界和溫血?jiǎng)游矬w內(nèi)，是一種重要的人１．１．４試驗(yàn)藥物頭孢噻肟、頭孢唑啉、頭孢拉定、獸共患性病原菌。隨著中國集約化養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展，慶大霉素、恩諾沙星、

4、強(qiáng)力霉素、奧復(fù)星和卡那霉素病毒性傳染病依靠良好的疫苗和完善的免疫程序基８種藥敏紙片均購自杭州微生物試劑有限公司，批本得到控制，而細(xì)菌性傳染病日趨嚴(yán)重，難以防制，號１０１２２３；硫酸慶大霉素、阿莫西林、頭孢曲松、諾使得極易形成耐藥性的沙門氏菌的流行愈演愈烈氟沙星、痢菌凈、阿米卡星、泰勒菌素、阿奇霉素、壯（申之義等，２００１）。雖然抗生素的應(yīng)用對控制和預(yù)觀霉素、新霉素、左旋氧氟沙星、林可霉素、呋喃唑防沙門氏菌病發(fā)揮了巨大的作用，然而隨著抗菌藥酮、泰妙菌素、替米考星、復(fù)方新諾明、沙拉沙星、磷物的濫用及不當(dāng)

5、使用，沙門氏菌病的耐藥性日趨嚴(yán)霉素、黏桿菌素、青霉素、氯霉素、阿奇霉素、甲硝唑、重，加強(qiáng)對該菌耐藥性的監(jiān)測力度和耐藥機(jī)制的研環(huán)丙沙星、氨芐西林、左旋氧氟沙星及培氟沙星２７究迫在眉睫（鄧樹軒等，２００７）。鑒于此，作者對吉林種藥敏紙片按ＷＳ／Ｔ１２５－１９９９紙片法抗菌藥物敏省某地雞源沙門氏菌病進(jìn)行了病原菌的分離、鑒定感試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)生物制藥實(shí)驗(yàn)室自制，密封低溫保存?zhèn)浼八幟粼囼?yàn)，為臨床獸醫(yī)選擇和使用抗菌藥物提供用；青霉素鉀購自江蘇南農(nóng)高科動(dòng)物藥業(yè)有限公司。參考。１．１．５試驗(yàn)動(dòng)物１日齡健康ＡＡ＋雛雞由德惠市

6、１材料與方法種雞場提供。１．１材料１．２方法１．１．１病料來源２０１０年４月—２０１０年５月收１．２．１病料采集病料來源于發(fā)病地區(qū)，病雞臨床集的１５０份來自吉林省某地７個(gè)規(guī)模雞場疑似患沙癥狀表現(xiàn)為精神萎頓，畏寒不愿走動(dòng)，同時(shí)腹瀉排白門氏菌病的病料。色漿糊狀稀便，泄殖腔周圍羽毛污染，將其處死并剖１．１．２培養(yǎng)基ＨＥ營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、ＳＳ營養(yǎng)瓊檢取其肺臟、心臟、肝臟、脾臟和腸，于－２０℃保存脂培養(yǎng)基和三糖鐵瓊脂（ＴＳＩ）均購自青島某技術(shù)有備用。１．２．２沙門氏菌的分離鑒定在實(shí)驗(yàn)室無菌條件收稿日期：２０１２

7、－１２－２５下將病料組織劃線接種于ＨＥ營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和作者簡介：王傲雪（１９８６－），女，吉林人，碩士生，研究方向：雞?。樱訝I養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，置３７℃培養(yǎng)１８～２０ｈ后觀研究與防治。通信作者：張林波（１９７３－），男，吉林人，博士生導(dǎo)師，教授，從事察，挑取直徑約０．５ｍｍ的小菌落進(jìn)行革蘭氏染色，免疫學(xué)研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｃｚｌｂ＠１６３．ｃｏｍ革蘭氏陰性、大多單個(gè)存在或有少量成對排列的小·１６８·疾病防治中國畜牧獸醫(yī)２０１３年第４０卷第７期桿菌為可疑落菌，按照Ｉｃｇｅｎｌ等（２００２）的介紹對其１．

8、２．８聯(lián)合藥敏試驗(yàn)ＦＩＣ指數(shù)ＦＩＣ指數(shù)＝（甲藥純化擴(kuò)增，并將革蘭氏陰性短桿菌分離菌株接種于聯(lián)合時(shí)的ＭＩＣ／甲藥單獨(dú)時(shí)的ＭＩＣ）＋（乙藥聯(lián)合時(shí)ＴＳＩ中。的ＭＩＣ／乙藥單獨(dú)時(shí)的ＭＩＣ）。ＦＩＣ指數(shù)≤０．５，協(xié)１．２．３血清型鑒定挑取三糖鐵培養(yǎng)物中呈陽性同作用；０．５＜ＦＩＣ指數(shù)≤１，相加（累加）作用；１＜的菌落進(jìn)行沙門氏菌Ａ～Ｆ多價(jià)“Ｏ”診斷血清玻片ＭＩＣ指數(shù)≤２，無關(guān)作用；ＦＩＣ指數(shù)＞２，頡頏作用。凝集試驗(yàn)，并設(shè)生理鹽水為對照。玻片凝集試驗(yàn)用２結(jié)果與分析于篩選常見的菌體