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《衢州地區(qū)宮頸病變患者HPV感染分子流行病學(xué)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、衢州地區(qū)宮頸病變患者HPV感染分子流行病學(xué)研究［摘要］目的分析衢州地區(qū)1280例宮頸病變女性中人乳頭瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)21種基因型的分子流行病學(xué)特點(diǎn)。方法對(duì)衢州地區(qū)1280例宮頸病變的女性進(jìn)行21種HPV基因型分型檢測(cè),比較不同基因型的流行病學(xué)特點(diǎn)。結(jié)果本組病例中總HPV感染率為55.31%(708/1280),其中HR-HPV感染率為38.83%,LR-HPV感染率為16.48%,高危型最常見(jiàn)類(lèi)型為HPV16、58、52,低危型最常見(jiàn)類(lèi)型為HPV6、11。HR-HPV亞型中16、58、52是主要的
2、獨(dú)立影響因素，而LR-HPV亞型中6、11是主要的影響因素。HPV單一型感染率11.1%,兩種亞型合并感染率42.9%,三種亞型合并感染率30.6%,四種及以上亞型合并感染率15.4%o不同年齡段感染HPV及感染HR-HPV的比例均有顯著性差異，最高為31?40歲組，分別占67.39%和50.58%,其次為21?30歲組，分別占61.75%和45.78%,HPV感染與宮頸病變程度呈正相關(guān)。結(jié)論本研究提供了衢州地區(qū)宮頸病變女性的21種HPV基因型分子流行病學(xué)資料，為本地區(qū)宮頸癌的臨床防治工作提供了可靠的科學(xué)依據(jù)，對(duì)本地區(qū)今后疫苗的開(kāi)發(fā)、應(yīng)
3、用也具有重要價(jià)值。［關(guān)鍵詞］HPV；基因型；高危型；宮頸病變［中圖分類(lèi)號(hào)］R737.33［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］B［文章編號(hào)］1673-9701(2012)32-0011-03宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，流行病學(xué)調(diào)查和分子生物學(xué)研究均已證實(shí)人乳頭瘤病毒(HPV)感染是引起宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的主要原因，其中高危型HPV(HR-HPV)感染被認(rèn)為是引起宮頸癌的最重要因素［1］。目前已發(fā)現(xiàn)的HPV亞型共有100多種，但能從被感染生殖道中分離出的亞型僅30多種［2］,不同種族、不同地區(qū)、不同的研究人群其感染的HPV亞型分布也有所不同［3］。
4、衢州市因地屬浙西山區(qū)，女性宮頸病變的發(fā)病率一直較高，已嚴(yán)重影響到本地區(qū)女性的生殖健康和生命安全，因此，我們對(duì)本地區(qū)宮頸病變的女性進(jìn)行HPV感染分子流行病學(xué)調(diào)查，旨在為本地區(qū)HPV感染防治措施的制度以及今后HPV疫苗的使用提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。1資料與方法1.1一般資料2009年1月?2010年12月間來(lái)我院婦科門(mén)診就診時(shí)自愿做TCT宮頸疾病篩查的患者共17578例，其中1280例患者TCT診斷為不能明確意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASCUS)及以上，對(duì)該部分患者均進(jìn)行了HPV病毒檢測(cè)，并在陰道鏡下行多點(diǎn)活檢組織病理學(xué)確診，同時(shí)行相關(guān)流行病
5、學(xué)調(diào)查分析。該組患者年齡27?56歲，平均(43.8±21.4)歲，最終經(jīng)病理確診為炎癥846例、濕疣104例、CINI237例、CINII和III共92例、鱗癌1例。1.2試劑和儀器采用香港凱普生物科技有限公司生產(chǎn)的HPV核酸擴(kuò)增分型檢測(cè)試劑盒（包括DNA提取試劑盒、PCR擴(kuò)增試劑盒及雜交試劑盒）和醫(yī)用核酸分子快速雜交儀，美國(guó)ABI公司生產(chǎn)的ABI2720普通擴(kuò)增儀和Beckman公司生產(chǎn)的DU800紫外分光光度儀，同時(shí)對(duì)21種HPV亞型（包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68等1
6、5種高危亞型以及6、11、42、43、44、CP8304等6種低危亞型）進(jìn)行檢測(cè)。1.3實(shí)驗(yàn)方法1.3.1標(biāo)本采集及保存用棉拭子輕輕擦凈宮頸口分泌物，再將專(zhuān)用拭子插入宮頸管內(nèi)，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)4?5周以獲取足夠的上皮細(xì)胞樣本，取出后將其置入內(nèi)有專(zhuān)用細(xì)胞保存液的取樣管中，將宮頸刷柄折斷，旋緊瓶蓋，做好樣品編號(hào)及登記，4工保存并于1周內(nèi)檢測(cè)。1.3.2PCR擴(kuò)增及雜交檢測(cè)①DNA提?。何?biāo)本保存液0.5mL,離心1min（14000r/min）后棄上清液，剩余標(biāo)本用DNA試劑盒隨帶的提取液進(jìn)行HPV-DNA提取。②PCR擴(kuò)增：在ABI2720擴(kuò)
7、增儀中進(jìn)行PCR擴(kuò)增，采用HPV通用引物，引物序列5'端帶生物素標(biāo)記。擴(kuò)增過(guò)程：20°C10min（UNG酶作用）、95°C9min（預(yù)變性）、95°C20s（變性）、55°C30s（退火）、72°C30s（延伸），共進(jìn)行40個(gè)循環(huán)后行72°C5min（再延伸）。③雜交：在醫(yī)用核酸分子快速雜交儀中進(jìn)行雜交，具體操作按雜交試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。1.4結(jié)果判斷[4]雜交膜共設(shè)24個(gè)點(diǎn)，Biotin和IC設(shè)為對(duì)照點(diǎn)，當(dāng)兩點(diǎn)均為陽(yáng)性則提示檢測(cè)結(jié)果可信，兩點(diǎn)全部或其中之一陰性均提示檢測(cè)結(jié)果不可信；當(dāng)對(duì)照點(diǎn)正常時(shí)，其他點(diǎn)出現(xiàn)藍(lán)紫色圓點(diǎn)時(shí)其對(duì)應(yīng)的HPV亞
8、型判定為陽(yáng)性。任何一種HPV亞型陽(yáng)性均判定為HPV感染，其中兩種或以上HPV亞型陽(yáng)性均判定為HPV復(fù)合感染，HR-HPV陽(yáng)性或HR-HPV和低危型HPV（LR-HPV）同時(shí)陽(yáng)性者均判定為HR-HPV感染，僅
