骨髓間充質(zhì)干細胞對大鼠重癥急性胰腺炎損傷修復(fù)的作用

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1、【摘要】目的探討骨髓間充質(zhì)干細胞(MSC)對重癥急性胰腺炎(SAP)胰腺損傷的修復(fù)作用。方法將60只大鼠隨機(隨機數(shù)字法)分為健康對照組、SAP模型組、MSC移植組、MSC加粒細胞集落刺激因子(G-CSF)聯(lián)合組。免疫熒光檢測MSC的轉(zhuǎn)化率,生化法檢測血清淀粉酶含量,ELISA法檢測血清白介素IL-6質(zhì)量濃度。結(jié)果骨髓間充質(zhì)干細胞轉(zhuǎn)化率上升,血清淀粉酶含量和白介素IL-6質(zhì)量濃度下降,增加粒細胞集落刺激因子(G-CSF)聯(lián)合治療,MSC細胞量較少時,產(chǎn)生協(xié)同作用增強MSC的修復(fù)作用,MSC細胞量較大時,產(chǎn)生拮抗作用加重胰腺組織的損傷。差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P中國論文網(wǎng)  【關(guān)鍵詞】骨髓

2、間充質(zhì)干細胞;重癥急性胰腺炎;保護作用;粒細胞集落刺激因子  ExploretheprotectiveeffectsofthebonemarrowmesenchymalstemcellsonsevereacutepancreatitisinratsSHANYU-qiang*,LUOLiang,JIAZhong,CAIYang,JINHui-cheng,F(xiàn)ENGGuang-hua.*DepartmentofGenernalSurgery,HangzhouFirstPeople’sHospital,Hangzhou310006,China  Correspondanceauthor:J

3、INHui-cheng,Email:shang110117@163.com  【Abstract】ObjectiveToinvestigateeffectsofbonemarrowmesenchymalstemcells(MSC)onsevereacutepancreatitis(SAP)inrats.MethodsAtotalof60ratswererandomlydividedintonormalgroup(n=10),themodelofSAPgroup(n=10),thetransplantationoftheMSCgroup(n=20),thecombinationoft

4、heMSCandthegranulocytecolony-stimulatingfactor(G-CSF)group(n=20).TheconversionrateofMSCwasdetectedbyusingimmunofluorescencemethods,andthelevelofamylaseinserumwasassayedbyusingbiochemicalmethods.Simultaneously,thelevelofinterleukin-6(IL-6)inserumwasdeterminedbyusingenzymelinkedimmunosorbentassa

5、y(ELISA).ResultsTheconversionratesoftheMSCincreased,andconsequently,thelevelsofamylasesandinterleukin-6inserumwerereduced(P[1]。骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstemcells,MSC)是存在于多種器官中的多能干細胞,具有多向分化潛能,且易進行體外分離和純化培養(yǎng)。因此,探索其在胰腺損傷中發(fā)揮的修復(fù)作用,具有重要的臨床應(yīng)用價值[2-3]。粒細胞集落刺激因子(granulocytecolony-stimulatingfactor,G-CSF)是一種多肽

6、鏈的細胞生長因子,具有免疫調(diào)節(jié)、血管保護及促進血管發(fā)生的作用。近年來,使用MSC緩解脊髓損傷、MSC治療腦損傷、MSC治愈肺損傷等具有一定作用[3-4]。因此,本實驗首次以SAP大鼠模型為研究對象,尾靜脈注射EDU標(biāo)記的MSC與G-CSF,檢測SAP大鼠胰腺組織的免疫熒光及轉(zhuǎn)化率、血清淀粉酶的含量和白介素IL-6的質(zhì)量濃度。探討MSC對SAP胰腺損傷后修復(fù)作用的機制[5],為臨床開展MSC治療重癥急性胰腺炎提供理論依據(jù)。  1材料與方法  1.1實驗動物與主要試劑  雌性成年大鼠,鼠齡8周,60只,體質(zhì)量200~250g,由南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,動物合格證:0096502;

7、雌性幼鼠,鼠齡4周,5只,體質(zhì)量40~50g,由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供,動物合格證:0097319;L-精氨酸購于北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司;重組人粒細胞刺激因子注射液購于齊魯制藥有限公司;淀粉酶檢測試劑盒購于南京建成生物工程研究所;IL-6ELISA試劑盒購于NeoBioscience公司?! ?.2方法  1.2.1MSC的分離培養(yǎng)及EDU標(biāo)記造模前1周,將雌性幼鼠脫臼處死,用75%酒精浸泡。無菌條件下分離股骨和肱骨,用DMEM培養(yǎng)基沖出骨髓,制備成單細

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