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1、1?5f蹺碩士學位論文骨髓間充質(zhì)干細胞來源exosomes對大鼠急性胰腺炎損傷后修復(fù)作用的實驗研究Roleofexosomesderivedfrombonemarrowmesenchymalstemcellsinratacutepancreatitis作者:徐均導師:鄧紹平教授二〇一五年五月川北醫(yī)學院碩士研究生學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的論文是本人在導師的指導下獨立進行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容外’本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對本文的研
2、究做出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標明。除與外單位合作項目將予以明確方式規(guī)定外,本研究已發(fā)表與未發(fā)表成果的知識產(chǎn)權(quán)均歸屬川北醫(yī)學院。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名:/R期年了月川北醫(yī)學院碩士研究生學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和屯子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)川北醫(yī)學院可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索’可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯
3、編本學位論文。本學位論文屬于(請在以下相應(yīng)方框內(nèi)打“V”):1.保密?,在一年解密后適用本授權(quán)書。2.不保密口。.中圖分類號R657.5學校代碼10634UDC612.3密級授予單位川北醫(yī)學院骨髓間充質(zhì)干細胞來源exosomes對大鼠急性胰腺炎損傷后修復(fù)作用的實驗研究Roleofexosomesderivedfrombonemarrowmesenchymalstemcellsinratacutepancreatitis作者徐均導師鄧紹平教授培養(yǎng)院系臨床醫(yī)學院授位類別學術(shù)學位授位級別碩士學科門類醫(yī)學學科
4、專業(yè)外科學研究方向肝膽外科年級2012級學號201203102二○一五年五月致謝在四川省人民醫(yī)院兩年的學習生活中,我的每一份收獲都離不開導師鄧紹平教授的悉心教導,我的每一步成長都離不開導師的關(guān)心和支持,他的言傳身教,深深的影響著我,在未來的生活和工作中,不管在怎么樣的環(huán)境中,導師的為人處事都將永遠是我前進道路上的明燈。在此,我對恩師鄧紹平教授表示崇高的敬意和衷心的感謝!特別衷心感謝實驗指導老師朱世凱博士,為我順利的完成碩士課題提供了極大的幫助。感謝器官移植中心楊洪吉教授、張宇副主任醫(yī)師、陳凱主治醫(yī)師、
5、劉興超主治醫(yī)師、陳云飛醫(yī)師等,他們在科研、臨床和生活中給予的教導和幫助,讓我銘記在心,希望借此機會向他表示最衷心的感謝!感謝與我一起并肩作戰(zhàn)的碩士同學們,與他們在一起工作學習使我的實驗充滿熱情和動力!時間瞬間即逝,轉(zhuǎn)眼臨近畢業(yè),回眸令人難忘的三年研究生生活,幾多付出,幾多收獲,展望新的階段,有太多的暢想,太多的憧憬。此時,但更多的是感激,感激那些真誠地、無私地給予我諸多關(guān)心、幫助和支持的善良的人們,并深深祝福他們,愿幸福、快樂永遠伴隨他們!感謝我的家人對我無私的付出!骨髓間充質(zhì)干細胞來源exosome
6、s對大鼠急性胰腺炎損傷后修復(fù)作用的實驗研究摘要研究背景:急性胰腺炎(acutepancreatitis,AP)是一種嚴重威脅人們生命健康的急腹癥,病情發(fā)展迅速,救治難度大,死亡率極高。目前認為胰酶異常激活、白細胞過度激活以及炎性因子級聯(lián)反應(yīng)是致使AP發(fā)病及迅速發(fā)展的重要因素。尤其在早期白細胞過度激活促使大量促炎因子釋放,嚴重破壞機體促炎與抗炎間的平衡,致使肝、腎、肺以及小腸等全身多器官受到不同程度的損傷,也是其致死的重要原因之一。有研究證實骨髓間充質(zhì)干細胞(bonemarrowmesenchymals
7、temcells,BMSCs)通過強大的抗炎與組織修復(fù)作用能夠明顯改善急性胰腺炎患者的預(yù)后,但臨床也出現(xiàn)由不良分化所致惡變、心肌鈣化、肺纖維化以及由細胞輸注導致血管閉塞等并發(fā)癥。最近,研究發(fā)現(xiàn)BMSCs可以釋放一類由真核細胞的內(nèi)吞體產(chǎn)生并被分泌出細胞的膜性囊泡exosomes(即BMSCs-exosomes),能夠發(fā)揮出與BMSCs移植相似的生物學效應(yīng),同時也可以消除BMSCs移植的潛在安全隱患。目前,尚未見報道關(guān)于BMSCs-exosomes干預(yù)治療AP的相關(guān)研究。因此,本課題擬通過分離提純與鑒定大
8、鼠骨髓間充質(zhì)干細胞來源exosomes,然后通過建立SD大鼠AP模型,初步探討B(tài)MSCs-exosomes對大鼠急性胰腺炎損傷后修復(fù)作用及可能的作用機理,為深入研究BMSCs-exosomes替代MSCs臨床治療AP提供一定的理論基礎(chǔ)。第一部分大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞來源exosomes的分離提純與鑒定目的:通過對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞提取分離與原代培養(yǎng),以及分離純化骨髓間充質(zhì)干細胞來源exosomes(BMSCs-exosomes),為后續(xù)的動物干預(yù)實驗做準