骨髓間充質(zhì)干細胞對肺損傷大鼠的治療作用.doc

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1、骨髓間充質(zhì)干細胞對肺損傷大鼠的治療作用作者:趙峰張宇飛馬福成李志奎吳昌歸戚好文【摘要】目的:觀察骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)對大鼠肺損傷的治療作用.方法:將SD大鼠MSCs用DAPI標記后注入受體大鼠體內(nèi).將受體大鼠分為4組:肺損傷組、MSCs治療組、MSCs對照組和正常對照組.2wk后觀察肺組織結(jié)構(gòu)、植入細胞的變化,同時檢測支氣管肺泡灌洗液中層黏連蛋白、透明質(zhì)酸以及肺組織耗脯氨酸含量的變化.結(jié)果:MSCs治療組大鼠肺組織中可見少量DAPI標記的細胞,其中部分細胞表達廣譜細胞角蛋白,肺間質(zhì)增生減輕;支氣管肺泡灌洗液中層黏連蛋白、透明質(zhì)酸及肺組織耗脯氨酸的含量在肺

2、損傷組均有明顯升高(P≪0?01),而在MSCs治療組均有所下降(卩&吐;0?01)?結(jié)論:MSCs可在損傷的大鼠肺組織中分化為肺泡上皮細胞,降低支氣管肺泡灌洗液屮層黏連蛋白、透明質(zhì)酸及肺組織輕脯氨酸的含量,減輕大鼠肺損傷及纖維化的形成.【關(guān)鍵詞】骨髓;間充質(zhì)干細胞;肺損傷;分化;治療[Abstract]AIM:Toinvestigatethetherapeuticeffectofbonemarrowderivedmesenchymalstemcel1s(MSCs)oninjuredlungofrats?METHODS:MSCswereisolatedfr

3、omSDratsandinjectedintorecipientratsafterlabeledwith4'6Diamidino2phenylindole(DAPI).Therecipientratsweredividedinto4groups:lunginjurygroup,MSCstreatmentgroup,MSCscontrolgroupandnormalcontrolgroup.Lungtissueandbronchoalveolarlavagefluid(BALE)werecollected2weeksafterimplantation.Cel1sw

4、hichwere1abeledwithDAPTandpancytokeratinpositiveweredetectedunderfluorescencemicroscope.Lungstructure,fibroblastsininterstiliumwereobserved?Thecontentsofhydroxyprolineinlungandlaminin,hyaluronaninBALEweredetected.RESULTS:MSCsfromdonorcouldbefoundininjuredlungofrecipientratsandsomeoft

5、hemwerefoundpancytokeratinpositive.ThethicknessofalveolarwallandthenumberoffibroblastinlunginterstitiumwerereducedsignificantlyinMSCstreatmentgroup?MSCsengraftmentcouldalsoreducethecontentsoflamininandhyaluronaninBALEandhydroxyprolineininjuredlung(P<0.01).CONCLUSION:MSCscoulddiffe

6、rentiateintoalveolarepithelialcellsininjuredlunginducedbybleomycinandamelioratelunginjuryandfibrosis.【Keywords]bonemarrow;mesenchymalstemcells;lunginjury;differentiation;therapyo引言骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)是成體干細胞的一種,在一定條件下可分化為多個胚層來源的組織細胞[1]?近年的研究發(fā)現(xiàn)小鼠MSCs異體移植后可在損傷的小鼠肺組織中存活并分化為肺泡上皮細胞,減少肺組織膠原的沉積,為肺

7、纖維化的治療提出了一個新的思路[2-3]?我們應(yīng)用博來霉素(BLM)誘發(fā)的大鼠肺損傷模型,觀察MSCs在大鼠肺組織中的分化及對肺組織細胞外基質(zhì)層黏連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(IIA)的影響,為將MSCs用丁肺損傷及纖維化的治療提供實驗依據(jù).1材料和方法1.1材料雄性SD大鼠1只,體質(zhì)量100-150g;雌性SD大鼠20只,體質(zhì)量200?250g(第四軍醫(yī)大學實驗動物中心);DAPI(4,6二乙?;?苯基U引味,Roche公司);小鼠抗大鼠廣譜細胞角蛋白(PCK)mAb(SantaCruz公司);耗脯氨酸(HYP)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所);LN,IIA放

8、免試劑盒(上海海軍醫(yī)學研

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