資源描述：
《枝桿菌屬（Mycobacterium）》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、第三節(jié)分枝桿菌屬(Mycobacterium)分枝桿菌屬的分類(lèi)結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(生長(zhǎng)慢不產(chǎn)色)結(jié)核分枝桿菌牛分枝桿菌非洲分枝桿菌田鼠分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌Ⅰ群(光產(chǎn)色菌)Ⅱ群(暗產(chǎn)色菌)III群(不產(chǎn)色菌)Ⅳ群(快速生長(zhǎng)菌)麻風(fēng)分枝桿菌(人工培養(yǎng)基不生長(zhǎng))√√結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)1882年3月24日德國(guó)細(xì)菌學(xué)家郭霍發(fā)現(xiàn)一、分類(lèi)結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(生長(zhǎng)慢不產(chǎn)色)結(jié)核分枝桿菌(90%)牛分枝桿菌(5%)非洲分枝桿菌(5%)田鼠分枝桿菌二、生物學(xué)特性結(jié)核桿菌抗酸染色(×1000)結(jié)核桿菌的掃描電鏡照片結(jié)核桿菌菌落“讒
2、、懶、頑、變”“讒、懶”：胞壁含脂質(zhì)高，營(yíng)養(yǎng)要求高，生長(zhǎng)緩慢；羅-琴(L-J培養(yǎng)基)（含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無(wú)機(jī)鹽、孔雀綠等）培養(yǎng)需2-4周有菌落生成“頑”：對(duì)某些理化因素抵抗力較強(qiáng)抗干燥：在干燥痰中可生存6-8個(gè)月，附在塵埃上傳染性可保持8-10d;抗酸堿：抗6%H2SO4或4%NaOH達(dá)30min(集菌)抗染料：1:13000孔雀綠或1:75000結(jié)晶紫“變”：形態(tài)、菌落、毒力及耐藥性均可變異卡介苗:毒力變異株（BacilleCalmette-Guerin，BCG）耐藥變異株:藥物選擇作用(應(yīng)規(guī)范用藥,藥敏試驗(yàn)選敏感藥物聯(lián)合用藥)R-S變異:菌落變異L型
3、變異:藥物等誘導(dǎo)而成,TSA-L培養(yǎng)基生長(zhǎng)肺結(jié)核患者外周血中的分枝桿菌伴非抗酸顆粒，培養(yǎng)法 抗酸染色×1000殺滅結(jié)菌的方法：1、陽(yáng)光下暴曬2h；2、5%-12%來(lái)蘇作用5min-2h；3、75%酒精接觸2min；4、煮沸1min；5、焚燒—是最簡(jiǎn)便的滅菌方法生化反應(yīng)熱觸酶試驗(yàn)結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌(-)非結(jié)核分枝桿菌(+)硝酸鹽還原試驗(yàn)煙酸試驗(yàn)煙酰胺酶試驗(yàn)結(jié)核分枝桿菌(+)牛分枝桿菌(-)三、細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)結(jié)核病確診的重要依據(jù)(一)標(biāo)本的采集與注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)標(biāo)本采集：視病變部位取標(biāo)本如：痰取晨痰約5ml無(wú)菌密閉容器及時(shí)接種低溫送檢痰液合格收檢(二)檢驗(yàn)程序
4、集菌涂片1、沉淀集菌法：2、漂浮集菌法：生理鹽水稀釋高壓滅菌液化離心，取沉渣二甲苯1ml振蕩30min吸取泡沫和油層接界部分意義:陽(yáng)性可確診為結(jié)核病，有傳染性。但檢出率低;制定治療方案和化療療效評(píng)價(jià)的重要指標(biāo).√37℃30min4%NaOH染色抗酸染色金胺O染色報(bào)告方式鏡檢結(jié)果-仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌±300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~2條抗酸菌＋100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌2＋10個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌3＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌4＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌抗酸染色鏡檢結(jié)果報(bào)告方式痰檢至少2次陽(yáng)性!!!操作及報(bào)告結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化《中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)
5、劃實(shí)施工作指南》（2008新版）《痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊(cè)》結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程（1995年）生物安全??！請(qǐng)注意：廢棄標(biāo)本和污染物的處理痰盒和廢棄標(biāo)本等污染物，均需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能丟棄或清洗，嚴(yán)禁不經(jīng)滅菌隨意處理。痰盒等污染物如采用焚燒處理，須置于焚燒爐內(nèi)徹底焚化。焚燒不徹底或暴露焚燒是有害的。痰檢工作面的消毒：可將痰標(biāo)本置于一搪瓷盤(pán)中，在操作櫥內(nèi)進(jìn)行痰涂片操作。操作完畢后將盤(pán)與廢棄物等一并進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，或與操作臺(tái)面同時(shí)以3％石炭酸或其他可靠消毒液擦拭后，再以紫外線(xiàn)滅菌燈（距離≤1米）照射30min。生物安全??！分離培養(yǎng)與鑒定固體培養(yǎng)基
6、L-J（選擇）、PNB和TCH（鑒別）液體培養(yǎng)基（Middlebrook7H9/12和Sauton培養(yǎng)基）L型培養(yǎng)基（TSA-L培養(yǎng)基、92-3TBL）全自動(dòng)快速培養(yǎng)鑒定藥敏系統(tǒng)：Bactec全自動(dòng)系統(tǒng)等標(biāo)本前處理后培養(yǎng)!!!Middlebrook7H10/11意義:金標(biāo)準(zhǔn)，陽(yáng)性可確診為結(jié)核病，有傳染性。并可進(jìn)一步做生化反應(yīng)、藥敏試驗(yàn)，但需時(shí)長(zhǎng)。、小川培養(yǎng)基標(biāo)本培養(yǎng)前處理1、痰：酸/√堿處理堿/酸性L(fǎng)-J培養(yǎng)基胰蛋白酶-新潔爾滅法NaOH-NALC法2、腦脊液、胸腹水：離心、沉淀（有污染堿處理）3、尿液：離心、沉淀（堿處理）4、膿液：酸/堿處理報(bào)告方式培養(yǎng)結(jié)
7、果＋斜面20個(gè)菌落以上，占斜面1/4以下2＋斜面上菌落生長(zhǎng)面積占1/4以上，1/2以下3＋斜面上菌落面積占斜面1/2以上，3/4以下4＋斜面上菌落生長(zhǎng)密集，成菌苔培養(yǎng)結(jié)果記錄與報(bào)告方法分離培養(yǎng)與鑒定固體培養(yǎng)基L-J、PNB、TCH液體培養(yǎng)基（Middlebrook7H9/12和Sauton培養(yǎng)基）L型培養(yǎng)基（TSA-L培養(yǎng)基、92-3TBL）全自動(dòng)快速培養(yǎng)鑒定藥敏系統(tǒng)：Bactec960系統(tǒng)等標(biāo)本前處理后培養(yǎng)Middlebrook7H10/11意義:金標(biāo)準(zhǔn)，陽(yáng)性可確診為結(jié)核病，有傳染性。并可進(jìn)一步做生化反應(yīng)、藥敏試驗(yàn)，但需時(shí)長(zhǎng)、小川培養(yǎng)基Bactec460B
8、actec9000MBBactecMGIT960L菌
