生化檢驗報告的審核

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1、臨床生化檢驗反應原理及報告的審核瀘州市人民醫(yī)院檢驗科潘庭榮主要內容常見的生化反應原理檢驗報告審核普遍存在的問題檢驗報告審核的建議總結終點分析法（平衡法）連續(xù)監(jiān)測法比濁測定法一、常見的生化反應原理終點分析法是基于反應達到平衡時反應產物的吸收光譜特征及其對光吸收強度的大小，對物質進行定量的一類分析方法。反應混合物進行一定時間反應后，達到平衡終點，即在顯色反應處于穩(wěn)定階段時，監(jiān)測其顏色對光的吸收強度，以此計算待測物濃度。分為一點、兩點終點法終點分析法一點終點法一點終點法：一點終點法的特點是使用一種或兩種試劑。當樣品

2、和試劑混合后，待測物與試劑的物理化學反應達到終點時，測定吸光度，計算待測物質的濃度。該法要求試劑本底顏色要深，該法具有代表性的試驗有：總蛋白、白蛋白、鎂測定TP反應曲線Mg反應曲線二點終點法：一般是用雙試劑，是自動化生化分析儀常用的一種方法。該方法的優(yōu)點是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度以及一些干擾物質的影響。代表性的試驗有葡萄糖等兩點終點法Cre反應曲線測定底物的消耗或產物生成的速度的化學方法稱為連續(xù)監(jiān)測法（又稱動態(tài)分析法、速率法或動力學法）。在反應速度恒定期（零級反應期）來連續(xù)觀察和記錄一定反應時間內底物或產

3、物量的變化。以單位時間酶促反應初速度計算酶活力的大小和代謝物的濃度。連續(xù)監(jiān)測法酶促反應進程曲線酶促反應進程曲線典型酶聯(lián)法反應曲線AMY反應曲線ALT反應曲線通過檢測物質對光的散射或透射強度來測定物質的方法稱比濁法。比濁法可分為化學比濁法和免疫比濁法，免疫比濁法又分為透射比濁和散射比濁。全自動生化儀常用透射比濁法，常用于特種蛋白測定。其工作曲線為拋物線。比濁測定法比濁測定法注意事項：抗原或抗體量（測定物）大大過剩，可出現(xiàn)可溶性復合物，造成誤差。應維持反應管中抗體蛋白（底物）始終過剩。易受到脂血的影響。二、報告審核

4、中的普遍問題責任心不強，未對結果進行認真審核對檢測儀器或試劑方法學不夠了解專業(yè)知識欠缺，工作經驗不足對儀器檢測的結果及室內質控結果過于相信三、報告審核的建議結合臨床資料審核結合分析項目間的內在聯(lián)系審核（專業(yè)知識）結合影響檢驗結果因素審核檢驗項目的方法學和線性檢驗標本的影響檢驗儀器性能影響結合當日檢驗結果總體趨勢審核結果結合臨床資料結合病人的性別、年齡、臨床診斷、其他檢查結果審核例：某病人檢測的TP為110g/L，該標本沒有脂血等影響檢測結果的因素臨床診斷：多發(fā)性骨髓瘤另：胰島素與低血糖、病人輸注藥物對結果的影響

5、檢驗項目間的內在聯(lián)系各檢測參數(shù)間存在大小、比例、邏輯關系例：HDL-C+LDL-C﹤TC、Dbil﹤TbilCK-MB﹤CK(M+B)α-HBDH﹤LDH(H+M)原發(fā)性甲亢：T3↑、T4↑、TSH↓等影響檢驗結果的因素試劑線性范圍：了解檢驗項目試劑的線性范圍，對超過或低于范圍的項目，必須進行相應的減量稀釋或增量后重新測定。線性范圍在實際工作中，用連續(xù)監(jiān)測法會遇到檢驗結果為0或者負值的情況，此時不能盲目相信該結果低就出具低值報告，應查看其反應曲線例：某病人的尿液AMY檢測結果為0U/L其反應曲線如下圖：AMY反

6、應曲線AMY反應曲線分析分析：由于測定物質濃度過高處理：對測定物質進行十倍左右的稀釋再測定，直到反應曲線恢復正常結果才可靠影響檢驗結果的因素檢測項目的方法學：要了解該項目試劑采用的方法學：例：某病人在測定心肌酶譜時，其CK:246U/L、CK-MB:286U/L，標本無溶血等因素影響其結果中CK-MB﹥CK檢測項目的方法學分析：CK是由M和B兩類亞基組成的二聚體，其構成為CK-MB(心型)約占0-3%、CK-MM(肌型)約占97-100%、CK-BB（腦型）約占0-1%檢測項目的方法學CK-MB采用的檢測方法為

7、免疫抑制法原理:正常人體中，CK同工酶中CK-MM﹥CK-MB﹥CK-BB,其中CK-BB含量極少，可忽略。免疫抑制法正是建立于忽略CK-BB的基礎上。采用抗體抑制其M亞基活性，使CK-MM失去活性，而CK-MB失去一半的活性。單測定B亞基的活性，其結果×2即為CK-MB活性檢測項目的方法學原因分析：由于在患輕度或中度腦損傷、腦血管意外及腦手術后、新生兒產程窒息造成腦組織發(fā)生實質性損害的病人中，CK-BB會升高，這時該方法測定的CK-MB的活性相當于是CK-MB+2CK-BB的活性之和，造成CK-MB活性假性升

8、高檢測項目的方法學為什么CK-MB﹥2CK不可能該測定CK-MB活性=CK-MB+2CK-BB,如果CK-BB﹥CK-MM,結果要乘2，即CK-MB+2CK-BB﹥CK-BB+CK-MB+CK-MM,測定的CK-MB活性﹥CK活性，但CK-MB﹥2CK不可能解決方法：其他方法測定CK-MB的質量檢驗標本的影響標本脂血會使反應濁度增加，透光度下降，吸光度增加，從而造成檢驗結果不準確。如T